Методические указания МУК 4.1.0.475-96 "Измерение концентраций бемегрида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.475-96
"Измерение концентраций бемегрида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 208,35

Бемегрид (2-метил-2-этилглутаримид) - кристаллическое вещество белого цвета. Растворим в воде. Трудно растворим в спиртах, эфире. 126-128°С.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе 0,2 .

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения бемегрида в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) 0,01 мкг.

Нижний предел измерения бемегрида в воздухе 0,1 (при отборе 20 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций бемегрида в воздухе от 0,1 до 2,0 .

Определению не мешает присутствие солюсульфона, кетамина и аскорбиновой кислоты.

Суммарная погрешность измерения не превышает %.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 40 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб " с размером зерен 6,0 мкм (Чехия)
Электроаспиратор ЭА-1	ОСТ 95.10052-84
Фильтродержатель
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 1, 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75

Реактивы, растворы, материалы

Бемегрид, фармакопейный
Спирт метиловый, х. ч.	ГОСТ 6995-77
Элюент: метиловый спирт-вода (1:2)

Стандартный раствор N 1 с концентрацией бемегрида 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г бемегрида в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией бемегрида 10 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 водой.

Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение недели.

Фильтры АФА-ВП-10

ТУ 85-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 4 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 20 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,01 до 0,2 мкг бемегрида из стандартного раствора N 2.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки	+20°С
Скорость подачи элюента (метиловый спирт-вода (1:2))	200 мкл/мин
Длина волны УФ-детектора	210 нм
Скорость движения диаграммной ленты	6 мм/мин
Чувствительность детектора	0,4
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания бемегрида	6 мин
Элюирующий объем	1200 мкл
Эффективность колонки по бемегриду	4450 тт

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков () от содержания бемегрида в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее, чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 10 мл воды и оставляют на 15 минут при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра 97%.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания бемегрида в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию бемегрида (С) в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание бемегрида в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Е.Н. Беляев