Методические указания МУК 4.1.0.480-96 "Измерение концентраций диоксодета методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.480-96
"Измерение концентраций диоксодета методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 370,35

Диоксодет - {5-[[4,6-бис(1-азаридинил)-1,3,5-триазин-2-ил]амино]-2-2-диметил-1,3-диок сан-5-метанол} - кристаллическое вещество белого цвета. Растворим в воде. Хорошо растворим в ацетонитриле, метиловом и этиловом спиртах. Не растворим в гексане, эфире, 150-152°С.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

В связи с высокой канцерогенной, мутагенной итератогенной опасностью и небольшим объемом производства ПДК на диоксодет не устанавливается. Рекомендуется исключить все виды контактов.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения диоксодета в хроматографируемом объеме (50 мкл) 0,05 мкг.

Нижний предел измерения концентраций диоксодета в воздухе 0,001 (при отборе 500 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций диоксодета в воздухе от 0,001 до 0,01 .

Определению не мешает присутствие фенкарола и дипироксима, мешает присутствие дикаина.

Суммарная погрешность измерения не превышает %.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы, около 100 минут.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб РН " с размером зерен 6,0 мкм (Чехия)
Электроаспиратор ЭА-2	ОСТ 95.10052-84
Фильтродержатель	ТУ 95:7205-77
Микроскоп отсчетный типа МПБ-2	ТУ 3-3.824-78
Роторный испаритель	ТУ 25-11-917-74
Колбы грушевидные для вакуумной разгонки, вместимостью 25 мл	ГОСТ 9737-70

ГАРАНТ:

Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г. взамен ГОСТ 9737-70 с 1 января 1995 г. принят ГОСТ 9737-93

Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Градуированные пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75

Реактивы, растворы, материалы

Диоксодет, фармакопейный, 98% чистоты
Метанол (спирт метиловый), очищенный
Метанол очищенный получают из метанола, путем ректификации	ТУ 2222-78 Е
Ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5
Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2 х 2 х 0,2 мм)
Основную фракцию отбирают при температуре 64,5°С (атмосферное давление) в пределах колебаний °С
Натрий фосфорно-кислый двузамещенный 12-водный,	ТУ 4172-76
Калий фосфорно-кислый однозамещенный,	ТУ 4198-75
Раствор натрия фосфата готовят растворением 23,877 г натрия фосфорно-кислого двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л
Раствор калия фосфата готовят растворением 9,078 г калия фосфорно-кислого однозамещенного в воде в мерной колбе вместимостью 1 л
Фосфатный буфер (рН 7,8) готовят из смеси 915 мл раствора натрия фосфата и 85 мл раствора калия фосфата, добавляя к 100 мл смеси 570 мл воды
Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца
Растворитель: метанол
Элюент: 0,01 М фосфатный буфер (рН 7,8) - метанол, 2:1

Стандартный раствор N 1 с концентрацией диоксодета 500 мкг/мл готовят растворением 0,050 г вещества в элюенте в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией диоксодета 25 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом.

Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение недели.

Фильтры

АФА-ВП-20 ТУ 85-743-80

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 50 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. Для определения нижнего предела измерения достаточно отобрать 500 л воздуха.

Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,05 до 0,5 мкг диоксодета из стандартного раствора N 2.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Скорость подачи элюента (0,01 М фосфатный буфер (рН 7,8) - метанол, 2:1)	50 мкл/мин
Длина волны УФ-детектора	240 нм
Скорость движения диаграммной ленты	6 мм/мин
Чувствительность детектора	0,2-0,4
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания диоксодета	25 мин
Элюирующий объем	1250 мкл
Эффективность колонки по диоксодету	1600 тт

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков, относящихся к диоксодету, и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков () от содержания диоксодета в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема Проверку градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 10 мл метанола и оставляют на 15 минут при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра 99,0%.

Полученный раствор переносят количественно в предварительно взвешенную грушевидную колбу и упаривают на роторном испарителе под вакуумом при температуре 40-45°С до постоянного веса. Сухой остаток растворяют в 0,5 мл элюента.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания диоксодета в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию диоксодета (С) в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание диоксодета в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мкл;

в - общий объем анализируемого раствора, мкл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Е.Н. Беляев