Методические указания МУК 4.1.0.498-96 "Измерение концентраций кетамина хлоргидрата (2-(орто-хлорфенил)-2-метиламиноциклогексанон хлоргидрат) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.498-96
"Измерение концентраций кетамина хлоргидрата (2-(орто-хлорфенил)-2-метиламиноциклогексанон хлоргидрат) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 274,2

Кетамин хлоргидрат - кристаллическое вещество белого цвета со слабым специфическим запахом. Хорошо растворим в воде и спиртах. Не растворим в хлороформе. Температура плавления - 258-261°С (в разл.).

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 0,3 .

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения кетамина в хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) - 0,25 мкг.

Нижний предел измерения кетамина в воздухе - 0,15 (при отборе 100 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций кетамина в воздухе от 0,15 до 3 .

Определению не мешает присутствие диоксония.

Суммарная погрешность измерения не превышает %.

Время выполнения анализа, включая отбор пробы, - около 40 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроклоночный жидкостной хроматограф "Милихром" или другие модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб " с размером зерен 6,0 мкм (Чехия)
Электроаспиратор ЭА-1	ОСТ 95.10052-84
Фильтродержатель
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 1 и 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75

Реактивы, растворы и материалы

Кетамин, фармакопейный
Спирт метиловый, х. ч.	ГОСТ 6995-77
Ацетонитрил очищенный	ТУ 6-09-3534-82
Ацетонитрил очищенный получают из технического ацетонитрила чистого путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманганата калия из расчета 1 г перманганата калия на 1 л растворителя. Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись марганца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотта N 4, ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2х2х0,2 мм). Основную фракцию отбирают при температуре 81,6°С (атмосферное давление) в пределах колебаний °С
Калий фосфорнокислый однозамещенный, , ч. д. а., 0,05 М раствор	ГОСТ 4198-48
Элюент: 0,05% раствор однозамещенного фосфата калия-ацетонитрил (6:1)
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 85-743-80

Основной стандартный раствор кетамина с концентрацией 250 мкг/мл готовят растворением 0,025 г кетамина в метиловом спирте в мерной колбе, вместимостью 100 мл.

Раствор устойчив при хранении в холодильнике в течение суток.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр типа АФА-ВП-10. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 100 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,25 до 5 мкг кетамина из основного стандартного раствора.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки	20°С
Скорость подачи элюента (0,05 М однозамещенного фосфата калия-ацетонитрил (6:1)	200 мкл/мин
Длина волны УФ-детектора	210 нм
Скорость движения диаграммной ленты	3 мм/мин
Чувствительность детектора	0,8
Диапазон измерения самописца	100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы	50 мкл
Время удерживания кетамина	8 мин
Элюирующий объем	1600 мкл
Эффективность колонки по кетамину	260 тт

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков () от содержания кетамина в хроматографируемом объеме пробы (мкг).

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 3 мл метилового спирта и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра составляет 97%.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение содержания кетамина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию кетамина С в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание кетамина в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Е.Н. Беляев