Методические указания МУК 4.1.0.526-96 "Измерение концентраций 3-хлордифениламино-6-карбоновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.526-96
"Измерение концентраций 3-хлордифениламино-6-карбоновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 247,68

3-хлордифениламино-6-карбоновая кислота (ХДФАКК) - кристаллическое вещество коричневого цвета. Не растворима в воде, мало растворима в этаноле, растворима в хлороформе, дихлорэтане. Температура плавления - 196,5-197,5°С.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Оказывает раздражающее действие не кожу и слизистые.

ПДК ХДФАКК в воздухе - 5 .

Принцип и характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора. Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения ХДФАКК в хроматографируемом объеме раствора - 0,005 мкг.

Нижний предел измерения ХДФАКК в воздухе - 2,5 (при отборе 10 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций ХДФАКК в воздухе - от 2,5 до 25 .

Суммарная погрешность измерения не превышает %.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, не превышает 20 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф жидкостной микроклоночный "Милихром-4УФ"
Хроматофафическая колонка КАХ-44-3, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Сепарон ", фракция 5,0 мкм
Аспиратор
Установка вакуумная
Фильтродержатель
Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВЛР-2
Колбы мерные, вместимостью 25, 50 и 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пробирки со шлифом градуированные	ГОСТ 1770-74
Пипетки вместимостью 10 мл	ГОСТ 2029-74
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80

Реактивы, растворы и материалы

3-хлордифениламино-6-карбоновая кислота, содержание основного вещества 97%
Этиловый спирт, х. ч.	ГОСТ 5963-67
Дигидрофосфат калия, ч. д. а.	ГОСТ 4198-75
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии	ТУ 6-09-14-2167-84
Ортофосфорная кислота, х. ч.	ГОСТ 6552-58

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 6552-58 постановлением Госстандарта СССР от 3 января 1980 г. N 26 с 1 января 1982 г. введен в действие ГОСТ 6552-80

Раствор элюента. В колбу, вместимостью 50 мл вносят навеску дигидрофосфата калия 0,34 г и добавляют воду до метки
После полного растворения осадка добавляют по каплям ортофосфорную кислоту до установления рН = 5
В мерном цилиндре смешивают 40 мл полученного раствора и 60 мл ацетонитрила
Фильтруют раствор в толстостенную колбу и дегазируют под вакуумом в течение 5 мин
Раствор устойчив в течение одной недели при хранении в холодильнике

Стандартный раствор N 1 ХДФАКК готовят весовым методом путем растворения навески анализируемого вещества в небольшом объеме этилового спирта в мерной колбе на 25 мл. Объем доводят до метки этиловым спиртом и перемешивают. Вычисляют концентрацию ХДФАКК в мкг/мл.

Стандартный раствор N 2 концентрацией 100 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 водой.

Растворы устойчивы в течение недели.

Отбор пробы воздуха

Отбор пробы производится путем прокачивания воздуха с объемным расходом 1 л/мин через фильтр. Для измерения 1/2 ПДК достаточно отобрать 10 л воздуха. При хранении в закрытом виде пробы устойчивы в течение 1 месяца.

Подготовка к измерению

Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.

Количественный анализ вещества проводят по методу абсолютной калибровки с использованием градуировочных растворов с концентрацией 25-2,5 мкг/мл, которые готовят путем соответствующего разбавления стандартного раствора N 2 водой.

Помещают по 100 мкл каждого раствора в автоматическое пробоотборное устройство хроматографа.

Условия хроматографирования растворов:

Состав элюента:

раствор 50 mМ в воде (рН = 5)	40%
ацетонитрила	60%
Скорость потока элюента	100 мкл/мин
Длина волны детектора	286 нм
Объем пробы	2 мкл
Время удерживания ХДФАКК	5 мин

Регистрируют значения площадей пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 5-ти растворов разных концентраций, проводя не менее 5 параллельных определений для каждого раствора и строят градуировочную кривую зависимости площади пика от количества компонента в пробе (в мкг).

Проверка градуировочного графика проводится при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку и приливают пипеткой 5 мл спирта. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин. Вынимают фильтр и помещают его в другую пробирку, куда также приливают 5 мл спирта. Выдерживают 5 мин, после чего извлекают фильтр и объединяют растворы. Хроматографирование растворов проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуированных растворов. Количественное определение содержания ХДФАКК проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию ХДФАКК С в воздухе (в ) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание ХДФАКК в объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой для хроматографирования, мл;

в - общий объем раствора пробы, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России, заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Е.Н. Беляев