Методические указания МУК 4.1.0.277-96 "Измерение концентрации бензамида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.277-96
"Измерение концентрации бензамида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения: с момента утверждения

М.м. 121,15

Бензамид - белый кристаллический порошок. 132-134°С. Растворим в воде, этиловом спирте, диэтиловом эфире, бензоле, хорошо растворим в четыреххлористом углероде, сероуглероде, горячем бензоле.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 .

Характеристика метода

Метод основан на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.

Нижний предел измерения бензамида в воздухе (при отборе 50 л воздуха) - 0,5 .

Диапазон измеряемых концентраций вещества в воздухе от 0,5 до 10,0 .

Граница суммарной погрешности не превышает %.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 30 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" или другой модели с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб 600" с размером частиц 4 мкм
Весы аналитические ВЛА-200 или ВЛР-2	ГОСТ 24104-80Е
Аспирационное устройство
Фильтродержатели	ТУ 95-72-05-77
Центрифуга лабораторная
Бюксы, вместимостью 50 мл	ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Колбы мерные, вместимостью 25, 100 мл	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованной пробкой градуированные, вместимостью 10-15 мл	ГОСТ 25336-82

Реактивы, растворы, материалы

Бензамид	ТУ 6-09-06-709-76
Этиловый спирт	ГОСТ 18300-87
Диэтиловый эфир	ГОСТ 6265-52
Ацетонитрил, х. ч.	ТУ 6-09-1092-83
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80

Элюент: 50%-ный (по объему) раствор диэтилового эфира в этиловом спирте.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией бензамида 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в мерной колбе вместимостью 100 мл в элюенте.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией бензамида 50 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 элюентом.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для определения 0,5 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха. Срок хранения проб - 3 суток в холодильнике.

Подготовка к измерению

Хроматографическая колонка промышленного изготовления.

Инжектируют в хроматограф от 0,025 до 0,5 мкг бензамида из стандартного раствора N 2.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

температура термостата колонки	20°С;
скорость потока элюента	200 мкл/мин;
элюент: этанол-диэтиловый эфир (50:50);
длина волны УФ-детектора	224 нм;
время удерживания бензамида	2 мин;
максимальный объем вводимой пробы	10 мкл;
эффективность колонки по бензамиду	4000 тт.

На полученной хроматограмме измеряют высоту пиков и строят градуировочный график, выражающий зависимость высоты пика (мм) бензамида от количества вещества (мкг) в хроматографируемом объеме.

Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 5 точкам, выполняя 6 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в бюксу с пришлифованной крышкой, добавляют 5 мл этилового спирта и периодически встряхивают в течение 10 мин. Степень десорбции вещества с фильтра 95%.

Отбирают 1 мл в пробирку, разбавляют равным объемом диэтилового эфира, перемешивают и центрифугируют для осаждения волокон фильтра и пыли. Затем 10 мкл раствора вводят в хроматограф.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Количественное определение бензамида в хроматографируемом объеме пробы проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию бензамида "С" в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

б - объем раствора пробы, взятой для хроматографирования, мл;

V - объем пробы воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1);

К - коэффициент пересчета равный 2, с учетом того, что экстракт перед анализом разбавляют вдвое диэтиловым эфиром.

И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко