Измерение концентраций амида п-гидроксифенилуксусной кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны МУК 4.1.199-96 (утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 8 июня 1996 г.)

Измерение концентраций амида п-гидроксифенилуксусной кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны
МУК 4.1.199-96
(утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 8 июня 1996 г.)

"Структурная формула амида п-гидроксифенилуксусной кислоты"

Амид п-гидроксифенилуксусная кислота (п-гидроксифенилацетамид) - кристаллический белый порошок с сероватым оттенком, без запаха, горького вкуса. Тпл. - 170 - 176°С. Хорошо растворим в воде и спиртах, менее растворим в ацетоне, хлороформе, четыреххлористом углероде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Рекомендуемый ОБУВ в воздухе - 3 .

Характеристика метода

Методика основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения амида в хроматографируемом объеме - 0,2 мкг.

Нижний предел измерения амида в воздухе - 1,5 (при отборе 15 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций амида в воздухе 1,5 - 30 . Измерению не мешают п-гидроксифенилуксусная кислота и другие примеси.

Суммарная погрешность измерения - 19%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, - 40 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф Милихром-2
Хроматографическая колонка длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом "" с размером зерен 7,5 мкм
Весы аналитические типа ВЛА-200 или
ВЛР-2	ГОСТ 24104-80Е
Аспирационное устройство М-822, MP	ТУ 42-862-64
Фильтродержатель	ТУ 95-72-05-77
Посуда мерная, лабораторная	ГОСТ 1770-74

Реактивы, растворы, материалы

П-гидроксифенилацетамид, содержание основного вещества - 98%
Метанол, ч. д. а.	ГОСТ 6995-777
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 85-743-80

Стандартный раствор N 1 гидроксифенилацетамида с концентрацией 80 мкг/мл готовят растворением 40 мг амида в 500 мл воды.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 4 - 80 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора водой (см. табл.). Растворы устойчивы в течение 1 месяца.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 1 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 в течение 15 мин. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 15 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение 2 недель.

Подготовка к измерению

Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:

температура термостата колонок	+45°С;
скорость потока	1 мл/мин;
элюэнт: вода-водный метанол (градиент концентраций 0-40 % об. метанола) длина волны УФ-детектора	275 нм;
скорость движения диаграммной ленты	6 мм/мин;
диапазон измерения самописца	100 мВ;
объем вводимой пробы	50 мкл;
время удерживания пара-гидроксифенилацетамида	10 мин.

С использованием стандартных растворов строят калибровочный график, выражающий зависимость высоты пика амида на хроматограмме от массового содержания его в пробе стандартного раствора (см. табл.); проводят пять параллельных измерений для каждой концентрации. Градуировочный график проверяют не реже 1 раза в месяц и каждый раз при смене элюента.

Таблица

Шкала градуировочных растворов

N стандарта	Стандартный раствор, мл	Вода, мл	Содержание амида в растворе, мкг	Концентрация амида, мкг/мл
1	0	5,0	0	0
2	0,25	4,75	20	4
3	0,5	4,5	40	8
4	1,0	4,0	80	16
5	1,5	3,5	120	24
6	2,5	2,5	200	40
7	3,75	1,25	300	60
8	5,0	0	400	80

Проведение измерения

Фильтр с отработанной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 2,5 мл воды и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Затем фильтр вынимают из пробирки, помещают во вторую такую же пробирку, с 2,5 мл воды и оставляют на 10 мин, периодически перемешивая. Фильтр вынимают из пробирки, дают раствору стечь с фильтра, и растворы из двух пробирок объединяют. Степень десорбции с фильтра - не менее 97%. Растворы устойчивы в течение 1 месяца.

Хроматографирование объединенного раствора проводят в тех же условиях, что и хроматографирование стандартных растворов. Количественное определение содержания п-гидроксифенилацетамида в анализируемой пробе проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию вещества (С) в воздухе () вычисляют по формуле:

, где

а - содержание п-гидроксифенилацетамида в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой для хроматографирования, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к нормальным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко