Методические указания МУК 4.1.214-96 "Измерение концентраций 4-гидроксифенилуксусной кислоты методом жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.214-96
"Измерение концентраций 4-гидроксифенилуксусной кислоты методом жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 152,15

Гидроксифенилуксусная кислота (ГФУК) - твердое вещество белого цвета, хорошо растворимо в воде и спирте, плохо - в эфире. - 148-150°С.

Обладает раздражающим действием на слизистые оболочки и поврежденную кожу. По величине средней смертельной дозы относится к III классу опасности.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

ОБУВ в воздухе - 3 .

Характеристика метода

Метод основан на улавливании ГФУК из воздуха фильтром, извлечении ГФУК из фильтра с помощью бидистиллированной воды и последующем определении ее концентрации на жидкостном хроматографе с УФ-детектором.

Нижний предел измерения ГФУК в пробе (20 мкл) составляет 0,01 мкл (0,5 мкг/мл).

Нижний предел измерения в воздухе - 1 (при отборе 2,5 л воздуха).

Суммарная погрешность определения - %.

Определению не мешают фенолы, салициловая и ацетилсалициловая кислоты, амид ГФУК.

Длительность анализа, включая отбор проб, - 50 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Жидкостный хроматограф "Милихром"
МИ-1718-87 или другой аналогичный хроматограф
Хроматографическая колонка с сорбентом
Силасорб , размер чтиц - 5 мкм
Весы аналитические ВЛР-200	ГОСТ 13076-67
Микрошприц хроматографический, вместимостью 25 и 40 мкл	ТУ 2.833-106
Установка для дегазации элюента под вакуумом
Колбы мерные, вместимостью 50 мл	ГОСТ 1770-74Е
Пробирки с притертыми пробками, вместимостью 10 мл	ГОСТ 10515-75
Пипетки, вместимостью 1, 2 и 5 мл калиброванные	ГОСТ 20292-74
Воронки для фильтрования	ГОСТ 25336
Палочки стеклянные
Цилиндры мерные, вместимостью 1 л и 25 мл	ГОСТ 1770-74
Стаканы химические термостойкие, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336
Плитка электрическая с закрытой спиралью	ГОСТ 14919-83
Сушильный шкаф	ГОСТ 134-70
Электроаспиратор М-822 MP	ТУ 42-862-64
Держатель фильтра (аллонж) типа ИРА

Реактивы, растворы, материалы

Гидроксифенилуксусная кислота, содержание основного вещества - 98%
Вода бидистиллированная	ГОСТ 6709-72
Ацетонитрил "для жидкостной хроматографии", марки "ос. ч. ", ОП-3	ТУ 6-09-06-1092-83
Кислота уксусная "ледяная", х. ч. или ч. д. а.	ГОСТ 61-75
Бумажные беззольные фильтры "синяя лента"	ТУ 6-09-1678-77
Фильтры АФА-ВП-20 или АФА-ХП-20	ТУ 957181-76
Пакеты из кальки и полиэтилена

Подготовка к измерению

Приготовление подвижной фазы (элюента):

200 мл ацетонитрила смешивают с 790 мл бидистиллированной воды, добавляют 10 мл ледяной уксусной кислоты. Раствор дегазируют на установке для дегазации под вакуумом.

Градуировочный график:

Основной стандартный раствор с концентрацией 50 мкг/мл готовят растворением 50 мг вещества в 1 л воды. Разбавляют основной раствор ГФУК с концентрацией 50 мкг/мл и готовят 7 рабочих градуировочных растворов. Для разбавления используют бидистиллированную воду.

Градуировочные растворы должны иметь концентрации: 0,5; 1; 2; 4; 8; 16; 25 мкг/мл.

Градуировочные растворы анализируют на жидкостном хроматографе при условиях, изложенных в разделе "Проведение измерений".

На основании полученных данных строят градуировочный график в координатах: по оси абсцисс - концентрация ГФУК (мкг/мл), по оси ординат - высота хроматографического пика (мм). Каждую точку получают на основании 3 измерений.

Градуировочный график проверяют не реже 1 раза в неделю и обязательно - при смене элюента.

Срок хранения градуировочных растворов в холодильнике - 2 недели.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2,5 л/мин аспирируют через фильтр АФА.

Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 25 л воздуха.

Проведение измерений

Экспонированные фильтры можно хранить в холодильнике в закрытых бюксах в течение недели.

Для анализа фильтр помещают в стакан, вместимостью 100 мл и приливают 20 мл бидистиллированной воды, ставят стакан на электроплитку и доводят раствор до кипения, помешивая его стеклянной палочкой. Кипятят раствор с фильтром в течение 3-5 мин. Далее раствор охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через фильтр "синяя лента" в мерную колбу, вместимостью 50 мл. Стенки стакана обмывают несколько раз бидистиллированной водой, отжимая при этом фильтр стеклянной палочкой. Доводят раствор до метки бидистиллированной водой.

Коэффициент экстракции ГФУК из фильтра равен .

Анализ полученных проб проводят путем введения водного экстракта микрошприцем в инжектор, находящийся в положении "набор". Не извлекая шприца из инжектора, переводят последний в положение "ввод" и одновременно отмечают начало анализа на ленте регистрирующего прибора.

Условия хроматографирования растворов и проб:

хроматографическая колонка
с сорбентом Силасорб	5 мкм;
подвижная фаза	водный ацетонитрил
	(с конц. 20%);
скорость потока элюента	1,1 мл/мин;
длина волны детекции	254 нм;
объем пробы инжектора	20 мкл;
температура колонки	комнатная;
диапазон УФ-детектора	0,016 ед. опт. пл.;
скорость движения диаграммной ленты	150 мм/ч;
время удерживания ГФУК	9 мин.

Обработка результатов

На полученных хроматограммах измеряют высоту пика ГФУК и по градуировочному графику определяют концентрацию ГФУК в пробе.

Расчет концентрации

Концентрацию ГФУК (С) в воздухе () вычисляют по формуле:

, где

а - концентрация ГФУК по градуировочному графику, мкг/мл;

в - объем водного экстракта из фильтра, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к нормальным условиям, л (см. приложение 1).

И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко