Методические указания МУК 4.1.228-96 "Измерение концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.228-96
"Измерение концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

Диэтиламмониевая соль метиоприла

М. м. 346,49

Лекарственный препарат с антигипертензивными свойствами. Твердое кристаллическое вещество кремового цвета без запаха.

- 119-121°С. Хорошо растворимо в воде, плохо растворимо в эфире, ацетоне.

В воздухе присутствует в виде аэрозоля.

Диэтиламмониевая соль метиоприла не оказывает раздражающего действия на слизистую оболочку и кожу.

ОБУВ в воздухе 3 .

Характеристика метода

Определение основано на концентрировании аэрозоля диэтиламмониевой соли метиоприла на фильтре, экстракции этого вещества из фильтра водой и анализе методом жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.

Нижний предел обнаружения диэтиламмониевой соли метиоприла в анализируемой пробе (10 мкл) - 0,1 мкг (10 мкг/мл).

Нижний предел обнаружения диэтиламмониевой соли метиоприла в воздухе рабочей зоны - 1 (при объеме пробы воздуха 10 л).

Диапазон определения концентраций диэтиламмониевой соли метиоприла 1-10 .

Определению мешает метиоприл.

Погрешность метода - %.

Длительность анализа, включая пробоотбор, - 50 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром", среднее квадратичное отклонение выходных сигналов которого не превышает 3% во всем диапазоне чувствительности
Колонка типа КАХ-2-64-3	ТУ 25-7405.003-86
Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками)
Водоструйный насос	ГОСТ 25336-82
Электроаспиратор с расходомером ЭА-1	ТУ 25-11.1414-78
Весы лабораторные общего назначения, 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г	ГОСТ 24104-88

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С
Испаритель вакуумный типа ЭРА-М
Колба 2(1)-50, 500, 1000-2	ГОСТ 20292-74
Пипетки 4(5)-1-(2); 6(7)-1-5(10)	ГОСТ 20292-74
Пробирки П 1-16-150 ХС	ГОСТ 25336-82
Цилиндры 1 (2, 3, 4)-50, 100	ГОСТ 1770-74
Пробирки резиновые конусные по действующей НТД
Фильтр ФКВ-60-ПОР 250 ХС	ГОСТ 25336-82
Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм, 0,2 мкм, МО КНПО "Диагностикум")

Реактивы и материалы

Калий фосфорнокислый двузамещенный, ч. д. а.	ГОСТ 2493-75;
Метанол, яд, ос. ч.	ТУ 6-09-14-2192-55
Диэтиламмониевая соль метиоприла, содержание основного вещества 90%
Ортофосфорная кислота, ос. ч.
концентрированная	ГОСТ 6552-80
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Спирт изопропиловый, х. ч.	ТУ 6-09-402-81
Спирт этиловый, ректификованный	ГОСТ 18300-87

Допускается применение импортной лабораторной посуды, аппаратуры и реактивов по качеству не ниже отечественных.

Отбор пробы воздуха

С помощью электроаспиратора через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, в течение 10 мин пропускают 10 л воздуха со скоростью 1 л/мин.

Экспонированный фильтр помещают в бюкс и хранят до анализа в холодильнике не более недели.

Подготовка к измерению

Приготовление 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2.

Для приготовления раствора навеску 11,6 г калия фосфорнокислого двузамещенного переносят в мерную колбу, вместимостью 1000 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят рН раствора до 4,2 добавкой концентрированной ортофосфорной кислоты, добавляют дистиллированную воду до метки. Раствор хранят в холодильнике до полного использования.

Элюент: 40 мл метанола смешивают с 60 мл 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2. Элюент хранят в холодильнике в течение месяца.

Исходный и градуировочный растворы диэтиламмониевой соли метиоприла готовится 100 мл исходного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла с массовой концентрацией 0,2 г/л. В качестве растворителя используют элюент.

Разбавлением исходного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла готовят калибровочные растворы с массовыми концентрациями 10, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг/мл.

Подготовка исследуемого образца к анализу

Фильтр с осажденной на него диэтиламмониевой солью метиоприла помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают в течение 5 мин. Раствор декантируют, пробирку с фильтром еще 2 раза встряхивают с 2 мл этилового спирта. Экстракты объединяют, фильтруют через стеклянный фильтр и упаривают досуха на вакуумном испарителе. Осадок растворяют в 1 мл элюента и используют для анализа. При необходимости делают разведение для получения удобно обсчитываемых пиков диэтиламмониевой соли метиоприла на хроматограммах.

Подготовка колонки к проведению анализа

Колонку промывают изопропиловым спиртом (2,5 мл), затем дистиллированной водой (2,5 мл) и элюентом до установления стабильной базовой линии. Скорость потока - 100 мкл/мин.

Все используемые жидкости должны быть предварительно дегазированы.

Для построения градуировочного графика используют свежеприготовленные калибровочные растворы. 10 мкл каждого градуировочного раствора диэтиламмониевой соли метиоприла вводят в колонку хроматографа и проводят анализ при следующих условиях:

температура колонки	20°С;
скорость потока элюента	100 мкл/мин;
длина волны детектора	230 нм;
чувствительность детектора	0,8 А;
скорость диаграммной ленты	0,6 см/мин;
время удерживания диэтиламмониевой соли метиоприла	6,3 мин;
объем удерживания	0,63 .

Измеряют площади пика диэтиламмониевой соли метиоприла на полученных хроматограммах. На основании проведенных измерений строят калибровочный график (для каждой новой колонки) в координатах: по оси абсцисс - концентрация диэтиламмониевой соли метиоприла в растворе (мкг/мл), по оси ординат - площадь пика диэтиламмониевой соли метиоприла (). Каждую точку получают на основании 6 измерений. При использовании одной колонки калибровочный график проверяют не реже одного раза в квартал.

Проведение измерений

В колонку хроматографа вносят 10 мкл подготовленного раствора анализируемого образца и проводят анализ при условиях, описанных в разделе "калибровка". В случае получения очень большого пика диэтиламмониевой соли метиоприла, выходящего за пределы шкалы самописца, анализ повторяют, предварительно приготовив разведение анализируемого раствора образца, или наносят на колонку хроматографа меньшее количество неразведенного раствора.

Вычисляют площадь пика диэтиламмониевой соли метиоприла для каждого анализа (не менее 5) и находят среднеарифметическую величину, по которой определяют концентрацию диэтиламмониевой соли метиоприла в растворе по градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию диэтиламмониевой соли метиоприла (С) в воздухе рабочей зоны вычисляют по формуле:

, где

а - концентрация диэтиламмониевой соли метиоприла в анализируемой пробе; определяют по градуировочному графику, мкг/мл;

в - конечный объем экстракта из фильтра, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко