Методические указания МУК 4.1.243-96 "Определение концентрации метиоприла в воздухе рабочей зоны методом ВЭЖХ" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.243-96
"Определение концентрации метиоприла в воздухе рабочей зоны методом ВЭЖХ"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

Метиоприлцис-1,3-ацетилмеркаптопропионил-6-метилпипеколиновая кислота.

М. м. 273,35

Лекарственный препарат с антигипертензивными свойствами.

Твердое кристаллическое вещество белого цвета без запаха.

- 97-102°С. Легко растворимо в 95%-ном этаноле, метаноле и хлороформе; плохо растворимо в эфире, почти нерастворимо в воде.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает слабораздражающим действием на слизистую оболочку и кумулятивным эффектом.

ОБУВ в воздухе - 3 .

Характеристика метода

Определение метиоприла в воздухе рабочей зоны основано на концентрировании аэрозоля метиоприла на фильтре, экстракции метиоприла из фильтра этиловым спиртом и анализе методом жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием.

Нижний предел обнаружения метиоприла в анализируемой пробе (10 мкл) - 0,1 мкг.

Нижний предел обнаружения метиоприла в воздухе рабочей зоны - 0,1 (при объеме пробы воздуха 100 л).

Диапазон определения концентраций метиоприла - 1-5 .

Погрешность метода - %.

Длительность анализа, включая пробоотбор, - 50 мин.

Определению мешает диэтиламмониевая соль метиоприла. Не мешают: метилпиколиновая кислота, хлорангидрид метилпипеколиновой кислоты.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром", среднее квадратичное отклонение выходных сигналов которого не превышает 3% во всем диапазоне чувствительности
Колонка типа КАХ-2-64-3	ТУ 25-74-5.003-86
Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками)
Водоструйный насос	ГОСТ 25336-82
Электроаспиратор с расходомером ЭА-1	ТУ 25-11.1414-78
Весы лабораторные общего назначения, 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г	ГОСТ 24104-88

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 24104-88 постановлением Госстандарта РФ от 26 октября 2001 г. N 439-ст с 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001

Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30С
Испаритель вакуумный типа ЭРА-М
Колбы 2(1)-50, 500, 1000-2	ГОСТ 20292-74
Пипетки 4(5)-1-(2); 6(7)-1-5(10)	ГОСТ 20292-74
Пробирки П 1-16-150 ХС	ГОСТ 25336-82
Цилиндры 1 (2,3,4)-50, 10	ГОСТ-74

ГАРАНТ:

По-видимому, в тексте предыдущего абзаца допущена опечатка. Имеется в виду "ГОСТ 1770-74"

Пробирки резиновые конусные по действующей НТД
Фильтр ФКВ-60-ПОР 250 ХС	ГОСТ 25336-82
Фильтродержатель с мембранным капроновым фильтром (25 мм, 0,2 мкм, МО КНПО "Диагностикум")

Реактивы, растворы, материалы

Калий фосфорнокислый двузамещенный, ч. д. а	ГОСТ 2593-75
Метанол, яд, ос. ч.	ТУ 6-09-14-2192-55
Метиоприл, содержание основного вещества 98,5%
Ортофосфорная кислота, ос. ч., концентрированная	ГОСТ 6552-80
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Спирт изопропиловый, х. ч.	ТУ 6-09-402-81
Спирт этиловый, ректификованный	18300-87

Допускается применение импортной лабораторной посуды, аппаратуры и реактивов по качеству не ниже отечественных.

Отбор пробы воздуха

С помощью электроаспиратора через фильтр, закрепленный в фильтродержателе, в течение 10 мин пропускают 100 л воздуха со скоростью 10 л/мин.

Экспонированный фильтр помещают в бюкс и хранят до анализа в холодильнике не более недели.

Подготовка к измерению

Приготовление 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2.

Для приготовления раствора навеску 11,6 г калия фосфорнокислого двузамещенного переносят в мерную колбу, вместимостью 1000 , растворяют в небольшом количестве воды и доводят рН раствора до 4,2 добавкой концентрированной ортофосфорной кислоты, добавляют дистиллированную воду до метки. Раствор хранят в холодильнике до полного использования.

Элюент: 40 мл метанола смешивают с 60 мл 0,05 М раствора калия фосфорнокислого двузамещенного, рН = 4,2. Элюент хранят в холодильнике в течение месяца.

Исходный и градуировочный раствор метиоприла: готовится 100 мл исходного раствора метиоприла с массовой концентрацией 0,2 мг/мл. В качестве растворителя используют элюент.

Разбавлением исходного раствора метиоприла готовят калибровочные растворы с массовыми концентрациями 10, 20, 40, 60, 80 и 100 мкг/мл.

Подготовка исследуемого образца к анализу. Фильтр с осажденным на него метиоприлом помещают в пробирку с 3 мл этилового спирта и встряхивают в течение 5 мин. Раствор декантируют, пробирку с фильтром еще 2 раза встряхивают с 2 мл этилового спирта. Экстракты объединяют, фильтруют через стеклянный фильтр и упаривают досуха на вакуумном испарителе. Осадок растворяют в 1 мл элюента и используют для анализа. При необходимости делают разведения для получения удобно обсчитываемых пиков метиоприла на хроматограммах.

Подготовка колонки к проведению анализа. Колонку промывают изопропиловым спиртом (2,5 мл), затем дистиллированной водой (2,5 мл) и элюентом до установления стабильной нулевой линии. Скорость потока - 100 мкл/мин.

Все используемые жидкости должны быть предварительно дегазированы.

Построение градуировочного графика. Для построения градуировочного графика используют свежеприготовленные калибровочные растворы.

10 мкл каждого градуировочного раствора метиоприла вводят в колонку хроматографа и проводят анализ при следующих условиях:

температура колонки	20°С;
скорость потока элюента	10 мкл/мин;
длина волны детектора	230 нм;
чувствительность детектора	0,8 А;
скорость диаграммной ленты	0,6 см/мин;
время выхода метиоприла	6,3 мин;
объем удерживания	0,63 мл.

Измеряют площади пика метиоприла на полученных хроматограммах. На основании проведенных измерений строят калибровочный график (для каждой новой колонки) в координатах: по оси абсцисс - концентрация метиоприла в растворе (мг/мл), по оси ординат - площадь пика метиоприла (). Каждую точку получают на основании 6 измерений. При использовании одной колонки калибровочный график проверяют не реже 1 раза в квартал.

Проведение измерений

В колонку хроматографа вносят 10 мкл подготовленного раствора анализируемого образца и проводят анализ при условиях, описанных в разделе "калибровка". В случае получения очень большого пика метиоприла, выходящего за пределы шкалы самописца, анализ повторяют, предварительно приготовив разведение анализируемого образца, или наносят на колонку хроматографа меньшее количество неразведенного раствора.

Вычисляют площадь пика метиоприла для каждого анализа (не менее 5) и находят среднеарифметическую величину, по которой определяют массовую концентрацию метиоприла в растворе по градуировочному графику.

Обработка результатов

Концентрацию метиоприла (С) в воздухе рабочей зоны (), определяют по формуле:

, где

А - концентрация метиоприла в анализируемой пробе; определяют по калибровочному графику на основании площади пика метиоприла, мкг;

- общий объем раствора, мл;

V - объем воздуха, пропущенного через фильтр и приведенного к нормальным условиям, (см. приложение 1).

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко