Методические указания МУК 4.1.245-96 "Измерение концентраций 6-метилпиколиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.245-96
"Измерение концентраций 6-метилпиколиновой кислоты методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения - с момента утверждения

М. м. 137,13

6-метилпиколиновая кислота (МПК) является полупродуктом в синтезе метиоприла.

МПК представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворим в воде, метаноле, ацетонитриле. - 131°С.

В воздухе МПК находится в виде аэрозоля.

МПК оказывает раздражающее действие на слизистую оболочку глаза, обладает сильным кожно-резорбтивным действием.

ОБУВ в воздухе - 3 .

Характеристика метода

Определение МПК в воздухе основано на предварительном концентрировании ее аэрозоля на фильтре, экстракции метанольным раствором гидроксида калия, превращении МПК в п-бромфена-циловый эфир и определении массовой концентрации полученного эфира методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) со спектрофотометрическим детектированием.

Нижний предел измерения в анализируемой пробе - 0,01 мкг; в воздухе - 1 (при отборе 5 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций МПК в воздухе составляет от 1 до 30 .

Погрешность определения %.

Определению не мешают 2,6-диметилпиридин, пиридин-2,6-дикарбоновая кислота.

Длительность анализа, включая пробоотбор, - 3 ч.

Приборы, аппаратура, посуда

Весы аналитические типа ВЛА-200 или ВР-200

ГОСТ 24104-80Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Меры массы

ГОСТ 7328-82Е

См. ГОСТ OIML R 111-1-2009 "Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов , , , , , , , и . Часть 1. Метрологические и технические требования", введеный в действие приказом Росстандарта от 22 августа 2011 г. N 233-ст

Жидкостный хроматограф "Милихром"
Колонка аналитическая размером 250 х 4 мм, упакованная сорбентом "Separon" с размером чтиц 7 мкм или колонка подобного типа
Иономер универсальный типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН (допускается применение рН-метров с аналогичными метрологическими характеристиками)
Аргон в баллонах
Электроаспиратор ЭА-2С-М1	ТУ 2.840.016
Фильтры АФА-ВП-20 с фильтродержателем	ТУ 957181-76
Фильтродержатель с нейлоновым фильтром, с диаметром пор 0,45 мкм
(МО "Диагностикум")
Аппарат для встряхивания пробирок АВ-30 С	ТУ 64-1-2451-78
Колбы мерные и пипетки	ГОСТ 1770-74Е ГОСТ 20292-74Е
Посуда стеклянная	ГОСТ 10394-72 ГОСТ 10515-75

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10394-72 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

Взамен ГОСТ 10515-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

Флаконы с завинчивающейся крышкой или ампулы

Реактивы, растворы, материалы

Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72
Ацетонитрил, х. ч. (в качестве элюента используется 27,5%-ный водный раствор)	ТУ 6-09-1092-83
Метанол, х. ч.	ГОСТ 6995-77
Гидроксид калия, ч. д. а. (используется 0,036 М раствор в метаноле)	СТ СЭВ 1489-78
п-Бромфенацилбромид, ч. (используется раствор в ацетонитриле с концентрацией 3,5 мг/мл)	ТУ 6-09-3397-73
18-Краун-6, ч. (используется 1 мМ раствор в ацетонитриле)	ТУ 6-09-05-946-79
6-Метилпиколиновая кислота, содержание основного вещества - 99%

Стандартный раствор с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг вещества в 100 мл ацетонитрила, срок хранения - неделя.

Подготовка к измерению

Непосредственно перед приготовлением образцов МПК для анализа готовят рабочие растворы гидроксида калия и 18-краун-6 путем разбавления их исходных растворов в 10 раз метанолом и ацетонитрилом соответственно. Срок хранения этих растворов - не более суток.

Разбавлением основного раствора МПК ацетонитрилом готовят калибровочные растворы с концентрациями 0,5; 1; 2; 3; 5; 8; 10 мкг/мл.

Образцы МПК для анализа готовят следующим образом. В флакон с завинчивающейся крышкой помещают 1 мл градуировочного раствора с необходимой концентрацией и растворитель удаляют в потоке аргона при температуре 40-45°С. К полученному остатку приливают 0,05 мл раствора гидроксида калия, 0,25 мл метанола, закрывают крышкой и встряхивают. Затем метанол удаляют в потоке аргона при температуре 40-45°С. К полученному остатку приливают 0,08 мл раствора п-бром-фенацилбромида; 0,01 мл раствора 18-краун-6; 0,25 мл ацетонитрила, закрывают крышкой, встряхивают и выдерживают в водяной бане при 80°С в течение 20 мин. Затем растворитель удаляют в потоке аргона при температуре 40-45°С. К полученному остатку приливают 1 мл ацетонитрила и фильтруют через нейлоновые фильтры.

Срок хранения образцов - не более суток.

Условия хроматографирования стандартных растворов и анализируемых проб:

подвижная фаза	27,5% водный ацетонитрил;
скорость потока подвижной фазы	2 мл/мин;
температура колонки	50°С;
длина волны детектора	254 нм;
диапазон УФ-детектора	0,016 ед. опт. пл.;
объем пробы	20 мкл;
время удерживания производного МПК (п-бромфенациловый эфир)	18 мин.

Измеряемым параметром служит площадь хроматографического пика.

На основании полученных данных строят калибровочный график в координатах: концентрация МПК в растворе (мкг/мл) - площадь хроматографического пика (). Каждую точку получают на основании 5 измерений.

Градуировку проводят не реже 1 раза в неделю.

Отбор пробы воздуха

Воздух со скоростью 1 л/мин аспирируют через фильтр, закрепленный в фильтродержателе.

Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 5 л воздуха. Срок хранения отобранной пробы - 3 суток.

Проведние анализа

Для определения массовой концентрации МПК фильтр режут на мелкие кусочки, помещают в флакон на 3 мл, добавляют 0,2 мл раствора гидрооксида калия и полностью заливают метанолом. Затем крышку завинчивают и встряхивают 10-15 мин. Раствор отбирают, помещают в флакон на 10 мл. Эту операцию повторяют 3 раза. Срок хранения объединенного раствора не более суток.

Отбирают 1 мл полученного раствора и анализируют, как описано в разделе "Градуировка".

Если площадь пика МПК более 20000, то пробу разбавляют до той концентрации раствора, площадь пика которого лежит примерно в середине градуировочной характеристики. Определение повторяют 5 раз и полученные значения усредняют. Разброс данных при повторных измерениях не должен быть более 5%.

Расчет концентрации

Массовую концентрацию МПК (С) в воздухе рассчитывают по формуле:

, где

а - количество МПК по калибровочному графику, мкг/мл;

б - конечный объем экстракта МПК с фильтра, мл;

V - объем пробы воздуха, приведенный к нормальным условиям, л (см. приложение 1).

0,59 - степень извлечения МПК из фильтра.

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко