Методические указания МУК 4.1.0.303-96 "Измерение концентрации метилсалицилата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны" (утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Методические указания МУК 4.1.0.303-96
"Измерение концентрации метилсалицилата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны"
(утв. Государственным комитетом санитарно-эпидемиологического надзора РФ, заместителем Главного государственного санитарного врача РФ 8 июня 1996 г.)

Дата введения: с момента утверждения

М. м. 152,15

Метилсалицилат (метиловый эфир салициловой кислоты) - бесцветная или слегка желтоватая жидкость с характерным ароматическим запахом. Слабо растворим в воде, со спиртом и эфиром смешивается во всех соотношениях. Плотность - 1,176-1,184. - 223,3°С.

В воздухе находится в виде паров и аэрозоля. Обладает слабыми кумулятивными свойствами.

ПДК в воздухе - 1,0 .

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора. Отбор проб с концентрированием.

Нижний предел измерения метилсалицилата в хроматографируемом объеме (5 мкл) - 0,02 мкг.

Нижний предел измерения метилсалицилата в воздухе (при отборе 45 л воздуха) - 0,5 .

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,5 до 7 .

Измерению не мешают другие производные салициловой кислоты.

Суммарная погрешность определения не превышает %.

Время выполнения анализа, включая отбор пробы, - 30 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф "Милихром" с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом "Силасорб " зернением 5 мкм (ЧССР)
Аспирационное устройство
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10 мл	ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 5 мл	ГОСТ 10515-75

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 10515-75 постановлением Госстандарта СССР от 15 июля 1982 г. N 2670 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25336-82

Лупа измерительная

ГОСТ 8309-75

ГАРАНТ:

Взамен ГОСТ 8309-75 постановлением Госстандарта СССР от 8 апреля 1993 г. N 1684 с 1 января 1984 г. введен в действие ГОСТ 25706-83

Линейка измерительная	ГОСТ 427-75
Секундомер	ГОСТ 5072-79
Весы аналитические
Фильтры АФА-ВП-10 Поглотительные сосуды Рихтера	ТУ 95-743-80

Реактивы, растворы, материалы

Метилсалицилат фармакопейный Метанол	ГОСТ 6595-77
Уксусная кислота	ГОСТ 61-75

Элюент: 70%-ный метанол - уксусная кислота ледяная в объемном соотношении 98:2.

Стандартный раствор N 1 с концентрацией метилсалицилата 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1 г (точная навеска) вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл.

Стандартный раствор N 2 с концентрацией 100 мкг/мл вещества готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 этиловым спиртом.

Растворы устойчивы в течение 5 дней в холодильнике.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 2 л/мин аспирируют через фильтр и поглотительный прибор Рихтера, заполненный 5 мл этанола и охлаждаемый льдом с солью. Для определения 0,5 ОБУВ следует отобрать 45 л воздуха.

Пробы могут храниться в холодильнике 5 дней.

Подготовка к измерению

Перед анализом через колонку, предварительно промытую метанолом, пропускают 400 мкл элюента. Элюент должен быть тщательно профильтрован и продегазирован.

Условия хроматографирования:

скорость подачи элюента через колонку	100 мкл/мин;
длина волны УФ-детектора	306 нм;
чувствительность	0,4;
объем вводимой пробы	5 мкл;
время удерживания	3 мин 6 с;
элюирующий объем	310 мкл;
скорость движения ленты самописца	0,3 см/мин.

Для количественного определения метилсалицилата используют метод абсолютной калибровки.

Градуировочные растворы с содержанием определяемого вещества от 4 мкг до 60 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора N 2 этиловым спиртом.

Растворы устойчивы в течение 5 дней при температуре 4°С.

Градуировочные растворы готовят согласно таблице.

Таблица

Шкала градуировочных растворов

Номер стандарта	Стандартный раствор N 2, мл	Этиловый спирт, мл	Концентрация, мкг/мл	Содержание метилсалицилата в 5 мкл хроматографируемого раствора, мкг
1	0,2	4,8	4	0,02
2	0,6	4,4	12	0,06
3	1,0	4,0	20	0,10
4	1,4	3,6	28	0,14
5	1,8	3,2	36	0,18
6	2,2	2,8	44	0,22
7	2,6	2,4	52	0,26
8	3,0	2,0	60	0,30

В колонку хроматографа инжектируют по 5 мкл каждого из градуировочных растворов, приготовленных согласно таблице. На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пика метилсалицилата () от количества компонента (мкг) в хроматографируемом объеме. Построение графика производят из 5 параллельных определений для каждой концентрации.

Проведение измерения

Содержимое поглотительного сосуда переливают в мерную пробирку со шлифом, доводят объем раствора до 5 мл этиловым спиртом, перемешивают и помещают туда фильтр, выдерживают 15 мин и затем хроматографируют, инжектируя в колонку 5 мкл раствора не менее 5 раз.

Количественное содержание метилсалицилата (мкг) в хроматографируемом объеме находят по предварительно построенному градуировочному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию метилсалицилата "С" в воздухе () вычисляют по формуле:

, где

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме поглотительного раствора по градуировочному графику, мкг;

в - общий объем поглотительного раствора, мл;

б - объем поглотительного раствора, взятого для анализа, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

И.о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации

Г.Г. Онищенко