Методические указания МУК 4.1.1663-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина ("5-бензилокситриитамин") в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1663-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина ("5-бензилокситриитамин") в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина в диапазоне массовых концентраций 0,05-0,50 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула.

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 266,30.

2.4. Регистрационный номер CAS 20776-45-8.

2.5. Физико-химические свойства.

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамин - кристаллический порошок желтоватого цвета с температурой плавления 92-93°С. Нерастворим в воде, плохо растворим в бензоле, этилацетате, хорошо растворим в этиловом спирте и хлороформе.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамин - промежуточный продукт синтеза серотонина адипината, оказывает выраженное раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки, обладает общетоксическим действием.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина в воздухе рабочей зоны 0,1 .

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина в этиловом спирте поглощать свет в ультрафиолетовой области спектра.

Измерение проводят при длине волны 210 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания в анализируемом объеме пробы - 15 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина в воздухе - 0,05 (при отборе 300 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства субстанции серотонина адипината.

Определению не мешают пары этилового спирта, аэрозоль 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Аспирационное устройство, модель 822	ГОСТ 2.6.01-86
Фильтродержатели	ТУ 95.72.05-77
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Воронки химические, диаметром 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметром 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Кюветы с толщиной оптического слоя 10 мм
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамин с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	МРТУ 42 N 3851-70
Этиловый спирт, 95%-й, ректификат	ГОСТ 5963-67

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией, не хуже приведенных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов с реактивами горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение и имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина с концентрацией 500 готовят растворением 0,05 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина N 1 с концентрацией 100 готовят разбавлением 5 основного стандартного раствора этиловым спиртом в мерной колбе, вместимостью 25 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина N 2 с концентрацией 30 готовят разбавлением 15 стандартного раствора N 1 этиловым спиртом в мерной колбе вместимостью 50 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности растворов от массы 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина

Номер стандарта	Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина N 1,	Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина N 2,	Этиловый спирт, 95%-й,	Содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этана-мина в градуировочном растворе, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0
2	0,0	0,5	9,5	15,0
3	0,0	1,0	9,0	30,0
4	0,5	0,0	9,5	50,0
5	1,0	0,0	9,0	100,0
6	1,2	0,0	8,8	120,0
7	1,5	0,0	8,5	150,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение часа.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 20 мин измеряют оптическую плотность растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 210 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина(мкг).

Проверку градуировочного графика проводят не реже одного раза в квартал, а также в случае использования новой партии реактивов, оборудования или после ремонта прибора.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объёмным расходом 10 аспирируют через фильтр АФА-ВП-10, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ОБУВ 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина следует отобрать 300 воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение трех суток в химических бюксах с пришлифованными крышками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в химический бюкс с пришлифованной крышкой вместимостью 25 , приливают 5 этилового спирта и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина. Фильтр тщательно отжимают и повторно обрабатывают 5 этилового спирта. Затем фильтр отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку вместимостью 10 и доводят объем раствора пробы до 10 этиловым спиртом. Степень десорбции 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина с фильтра 98%.

Оптическую плотность анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 210 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в этиловом спирте веществ, которые участвуют в синтезе 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина.

11. Вычисление результатов измерения

Массовую концентрацию 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

V - объём воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (см. прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде: , , Р = 0,95. Значение = 0,0014 + 0,17С, , где - характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1H-индол-3-этанамина,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,05-0,50	0,0014 + 0,17С	0,0019 + 0,19С	0,0053 + 0,24С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы () - общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения - и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза, - и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

X - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности

К = 0,0019 + 0,19С ().

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны.

Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,0053 + 0,24С ().

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D, выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 4 ч 30 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко