Методические указания МУК 4.1.1664-03 "Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида ("5-бензилокситринтамина гидрохлорид") в воздухе рабочей зоны" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1664-03
"Спектрофотометрическое измерение массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида ("5-бензилокситринтамина гидрохлорид") в воздухе рабочей зоны"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный спектрофотометрический анализ воздуха рабочей зоны на содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в диапазоне массовых концентраций 0,05-0,50 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула.

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 302,76.

2.4. Регистрационный номер CAS 52055-23-9.

2.5. Физико-химические свойства.

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорид - кристаллический порошок желтоватого цвета с температурой плавления 252-253°С. Нерастворим в хлороформе, плохо растворим в этиловом спирте, воде, растворим в 0,5 н водном растворе ледяной уксусной кислоты при температуре 40-50°С.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорид - промежуточный продукт синтеза серотонина адипината, оказывает выраженное раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки, обладает общетоксическим действием.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в воздухе рабочей зоны 0,1 .

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида с погрешностью, не превышающей %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в 0,5 н водном растворе ледяной уксусной кислоты поглощать свет в ультрафиолетовой области спектра.

Измерение проводят при длине волны 277 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в анализируемом объеме пробы - 70 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в воздухе - 0,05 (при отборе 1 400 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства субстанции серотонина адипината.

Определению не мешают пары этилового спирта, соляной кислоты и аэрозоль 2,3,4,9-тетрагидро-6-(фенилметокси)-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-она.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы, растворы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Спектрофотометр Specord М-40, Carl Zeiss
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е

ГАРАНТ:

См. ГОСТ Р 53228-2008 "Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания", утвержденный приказом Ростехрегулирования от 25 декабря 2008 г. N 739-ст

Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 НПФ "НОРД-ЭКОЛОГИЯ ХИМАВТОМАТИКА"	ТУ ЕВКН 4.471.000
Фильтры АФА-ХА-20 с фильтродержателем	ТУ 52-01-367-80
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100, 1 000	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10, 20	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические с пришлифованными крышками, вместимостью 25	ГОСТ 25336-82Е
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Баня водяная	ТУ 64-1-425-72
Воронки химические, диаметром 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Фильтры бумажные обеззоленные "белая лента", диаметром 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Кюветы с толщиной оптического слоя 10 мм
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 500, 1 000	ГОСТ 25336-82Е
Дистиллятор	ТУ 61-1-7210-79

5.2. Реактивы, растворы

5-(Фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорид с содержанием основного вещества не менее 99,0% в пересчете на сухое вещество	МРТУ-42 N 3851-70
Кислота ледяная уксусная, хч 0,5 н водный раствор	ГОСТ 61-75
Дистиллированная вода	ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками и квалификацией, не хуже приведенных в разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При работе с горючими и вредными веществами должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение и имеющие навыки работы на спектрофотометре.

8. Условия измерений

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, подготовку спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида с концентрацией 500 готовят растворением 0,05 г вещества в 0,5 н водном растворе ледяной уксусной кислоты при нагревании на водяной бане при температуре 40-50°С в течение 15 мин в мерной колбе вместимостью 100 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор N 1 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида с концентрацией 200 готовят разведением 10 основного стандартного раствора 0,5 н водным раствором ледяной уксусной кислоты в мерной колбе вместимостью 25 . Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.3. Стандартный раствор N 2 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида с концентрацией 100 готовят разведением 25 основного стандартного раствора 0,5 н водным раствором ледяной уксусной кислоты в мерной колбе вместимостью 50 . Раствор используют свежеприготовленным.

9.1.4. Приготовление 0,5 н водного раствора ледяной уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1 000 приливают 800 дистиллированной воды, добавляют 29,0 концентрированной ледяной уксусной кислоты (плотность 1,05), доводят объём раствора дистиллированной водой до 1 000 и перемешивают. Раствор устойчив 30 суток.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности растворов от массы 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида, устанавливают по шести сериям растворов из пяти параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида

Номер стандарта	Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида N 1,	Стандартный раствор 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида N 2,	0,5 н водный раствор ледяной уксусной кислоты,	Содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в градуировочном растворе, мкг
1	0,0	0,0	10,0	0,0
2	0,0	0,7	9,3	70,0
3	1,0	0,0	9,0	200,0
4	1,5	0,0	8,5	300,0
5	2,0	0,0	8,0	400,0
6	3,0	0,0	7,0	600,0
7	3,5	0,0	6,5	700,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение часа.

Подготовленные градуировочные растворы перемешивают и через 20 мин измеряют оптическую плотность растворов в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 277 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества.

Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им содержания 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в градуировочном растворе (мкг).

Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактивов, оборудования и после ремонта прибора.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объёмным расходом 200 аспирируют через фильтр АФА-ХА-20, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ОБУВ 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида следует отобрать 1 400 воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение трех суток в бюксах с пришлифованными крышками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в мерную пробирку вместимостью 20 , приливают 5 0,5 н водного раствора ледяной уксусной кислоты, помещают на водяную баню при температуре воды 40-50°С и оставляют на 15 мин, периодически перемешивая для лучшего растворения 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида. Затем фильтр тщательно отжимают, повторно обрабатывают 5 0,5 н водного раствора ледяной уксусной кислоты, помещают на водяную баню при температуре воды 40-50°С и оставляют на 15 мин, периодически перемешивая. Фильтр снова тщательно отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр "белая лента" в мерную пробирку вместимостью 10 и доводят 0,5 н водным раствором ледяной уксусной кислоты до 10 . Степень десорбции 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида с фильтра 98%.

Оптическую плотность анализируемого раствора пробы измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 277 нм по отношению к раствору сравнения, который готовят одновременно и аналогично пробам, используя чистый фильтр.

Количественное определение содержания 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида (мкг) в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в 0,5 н водном растворе ледяной уксусной кислоты веществ, которые участвуют в синтезе 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида.

11. Вычисление результатов измерения

Массовую концентрацию 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

V - объём воздуха, отобранного для анализа () и приведенного к стандартным условиям (см. прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде: , , Р = 0,95. Значение = 0,0020 + 0,19С, , где - характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Диапазон определяемых массовых концентраций 5-(фенилметокси)-1Н-индол-3-этанамина моногидрохлорида,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности, , , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности, К, , (Р = 0,90, m = 3)	норматив оперативного контроля воспроизводимости, D, , (Р = 0,95, m = 2)
0,05-0,50	0,0020 + 0,19С	0,003 + 0,20С	0,007 + 0,26С

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - . Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, - . Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы () - общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения - и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - . Результаты анализа исходной рабочей пробы - , рабочей пробы, разбавленной в два раза, - и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

- результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

Х - величина добавки анализируемого компонента;

К - норматив оперативного контроля погрешности

K = 0,003 + 0,20С ().

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны.

Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

, где

- результат анализа рабочей пробы;

- результат анализа этой же пробы, полученный в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и других партий реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы

D = 0,007 + 0,26С ().

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 1 ч 30 мин.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко