Государственный стандарт качества лекарственного средства. Общая фармакопейная статья ОФС 42 "Аллергены"

Государственный стандарт качества лекарственного средства
Общая фармакопейная статья ОФС 42
"Аллергены"

Вводится впервые

Аллергены - лекарственные препараты представляют собой водно-солевые экстракты белково-полисахаридных комплексов, выделенных из широкого круга веществ - источников природных аллергенов, которые являются веществами вызывающими или провоцирующими аллергические заболевания (гиперчувствительность). Аллергены предназначаются для диагностики и лечения аллергических заболеваний, опосредованных соответствующими природными аллергенами.

Классификация

Аллергены классифицируют на пыльцевые, бытовые, эпидермальные, пищевые, лекарственные, промышленные, аллергены насекомых, аллергены грибов, аллергены условно-патогенных бактерий, вирусные, гельминтные, протозойные, т.е. в соответствии с названием экстрагирующего сырья. Наименования аллергенов указываются в частных ФС.

Аллергены, обработанные формальдегидом, называются аллергоидами. Аллергоиды, конъюгтрованные с полиоксидонием, называются аллерготропинами.

Аллергены и аллергоиды производят в виде монопрепаратов, содержащих экстракт из сырья одного вида, а также в виде микст-препаратов, содержащих экстракты из нескольких видов сырья.

Аллергены, аллергоиды стандартизуют по содержанию единиц белкового азота в 1 мл препарата. PNU- protein nitrogen unit - международная единица, принятая для выражения концентрации белкового азота в аллергенах, равная 0,00001 мг белкового азота. Конкретная концентрация белкового азота - PNU/мл каждого наименования препарата указана в частных ФС.

В качестве консерванта в состав аллергенов входит фенол (0,2 - 0,4%), формальдегид (не более 0,014%), глицерин (50% или 5%), или фенол и человеческий альбумин в качестве стабилизатора (0,03% раствор человеческого альбумина в физиологическом растворе, содержащий 0,4% фенола).

Аллергены выпускают в виде растворов, суспензий, лиофилизатов, таблеток, глазных капель, капель для приема внутрь. Аллергены предназначены для парентерального, бронхиального, конъюктивального, перорального, сублингвального введения.

Для диагностического использования применяют немодифицированные водно-солевые растворы для накожного и внутрикожного тестирования у чувствительных к данному аллергену пациентов. Для провокационных тестов назальным, глазным или бронхиальным способом аллергены могут быть приготовлены разведением готовых форм аллергенов до минимальных концентраций непосредственно перед использованием.

Для иммунотерапии применяют водно-солевые растворы аллергенов, или аллергены, видоизмененных химически (обработка формальдегидом или карбомилирование) - аллергоиды или аллергоиды конъюгированные с синтетическим высоко молекулярным гетерополимерным иммуностимулятором полиоксидонием - аллерготропины или немодифицированные аллергенные экстракты, адсорбированные на различных носителях (алюминия гидроксид, кальция фосфат или тирозин).

Особенности производства

Методы производства должны обеспечивать безопасность, эффективность и стабильность аллергенов. Аллергены получают из экстрактов сырьевых материалов натурального происхождения (пыльцы растений, микрофлоры жилых и служебных помещений, шерсти животных, пищевых продуктов и др.). Они могут быть подвергнуты модификации, или снижению аллергенной активности, или оставаться немодифицированными.

Характеристика исходных материалов

Исходными материалами для приготовления аллергенов чаще всего являются пыльца растений, плесневые грибы, клещи, эпителий животных, пищевые продукты. Условия сбора, предварительная обработка, условия хранения исходных материалов должны обеспечивать постоянный качественный и количественный состав и стандартность в максимально возможной степени.

Пыльца

Сырьем для изготовления пыльцевых аллергенов и аллергоидов является растительная пыльца, представляющая собой порошкообразную массу от светло-желтого до интенсивно желтого цвета.

Сбор пыльцы проводят в период цветения. Созревание пыльцы обеспечивают в определенных условиях (поллинариях), высушивают до остаточной влажности %. Пыльцу каждого вида растений характеризуют по морфологическим признакам (диаметр пыльцевого зерна, структура экзимы, форма пыльцевого зерна) определяют визуально микроскопически. Примесь других видов пыльцы допускается не более 1%.

При изготовлении одной серии препарата допускается использование пыльцы, собранной в течение двух-трех календарных лет, в связи с различными климатическими и гидрологическими условиями созревания пыльцы.

Пыльцевые аллергены могут содержать не более 1% спор грибов (определяется микроскопически).

Пыльца не должна содержать пестицидов и остаточных органических растворителей.

Содержание тяжелых металлов в сульфатной золе из 1 г пыльцы (точная навеска) не более 0,001%.

Растительная пыльца должна выдерживать требования по микробиологической чистоте (ОФС "Микробиологическая чистота"). Пыльца хранится в герметично закрытых стеклянных емкостях с притертыми пробками, завальцованными парафином отдельно для каждого вида пыльцы. Срок хранения пыльцы не более 10 лет.

Микрофлора жилых и служебных помещений

Сырье - домашняя пыль, библиотечная пыль, перо подушек, используемое для изготовления бытовых аллергенов, собирают отдельно для каждого наименования аллергена. Пыль собирают путем сбора бытовым пылесосом с верхних поверхностей предметов, мебели, постели, (запрещается собирать пыль с пола и ковров) в квартирах больных, имеющих установленную аллергологической службой аллергию к данному сырью. Домашняя пыль, перо подушек, библиотечная пыль не должна содержать посторонних включений: мусора, насекомых, растительных включений. Выше перечисленное сырье хранится в герметично закрытых стеклянных банках или полиэтиленовых пакетах в сухом помещении при температуре от 15 до 25°С в течение года. Домашняя пыль должна выдерживать требования по микробиологической частоте (ОФС "Микробиологическая чистота").

Клещи домашней пыли D. рteronyssinus, D. farinae культивируют в течение трех-четырех месяцев в среде (домашняя пыль) при определенных заданных условиях - температуры, влажности, ежедневной аэрации, контроля видовой специфичности и отделения клещей от среды культивирования, гомогенизации для последующего выполнения операционных процессов.

Вид клеща удостоверяется паспортом подлинности (отсутствием клещей другого вида) в котором указывается вид сырья, сроки культивирования, контроль сырья. Сырье храниться в герметично закрытых стеклянных банках или полиэтиленовых пакетах при температуре от 2 до 10°С.

Сырьем для изготовления аллергена из дафний должны служить пресноводные рачки дафнии магна (Daphnia magna). Сырье должно выдерживать требования по микробиологической чистоте (ОФС "Микробиологическая чистота").

Сырьем для изготовления эпидермальных аллергенов шерсть животных (кошки, собаки, овцы, кролика, морской свинки), перхоть лошади, волос человека. Виды используемых животных должны быть утверждены соответствующими компетентными органами. Животные должны быть абсолютно здоровыми и свободными от инфекционных агентов, перечисленных в утвержденном перечне заболеваний, в том числе, возбудителей заболеваний, специфичных для мест разведений животных, а также гельминтов. Животные перед забором у них материала должны пройти карантин. Сырье не должно содержать посторонних включений: мусора, насекомых, растительных включений, шерсти других животных. Сырье храниться в герметично закрытых стеклянных банках или в полиэтиленовых пакетах при температуре от 2 до 10°С.

Пищевые продукты, используемые для изготовления аллергенов, должны соответствовать определенным качествам и требованиям, изложенным в частных ФС. Сырье получают из хозяйств, в которых не зарегистрированы вирусные, бактериальные, прионовые и другие заболевания, пирогенные для человека. Сырье хранится в полиэтиленовых пакетах в холодильнике при температуре минус 10-15°С. Срок хранения 1 год.

Бактериальные аллергены представляют собой белковую фракцию супернатанта бульонных культур микроорганизмов, полученную путем кислотного осаждения с последующим растворением осадка в солевом буферном растворе.

Грибковые аллергены представляют собой водно-солевые растворы гликопротеидов, полученные из высушенного и обезжиренного мицелия гриба с последующим экстрагированием солевым раствором и спиртовым фракционированием. Содержание биологически активных примесей, таких как микотоксины в плесневых грибах, должно быть минимизировано.

Описание схемы получения (производственный процесс)

Аллергены получают путем экстракции исходного сырья с использованием методов, направленных на сохранение биологических свойств аллергенных компонентов.

Производственный процесс включает в себя различные стадии.

Аллергенные экстракты получают путем предварительной обработки сырья (высушивание, обезжиривание) и извлечением белково-полисахаридных комплексов путем водно-солевой экстракцией.

Промежуточный аллергенный продукт (стабильный маточный раствор аллергена) получают по следующей схеме: диализ, концентрирование, центрифугирование, стерилизующая фильтрация обеспечивающая получение продукта свободного от контаминации, которая может повлиять на его безопасность и качество.

Контрольные испытания полуфабрикатов

Полуфабрикат - маточный раствор аллергена должен удовлетворять следующим требованиям: по физическим свойствам, стерильности, значению рН, содержанию фенола, содержанию белкового азота, биологической (специфической) активности. Стабильные маточные растворы в дальнейшем не обрабатываются, готовы для разведения или розлива в окончательные ёмкости.

Получение готового продукта

Полуфабрикат (маточный раствор) разводят до конечных концентраций белкового азота (PNU/мл), установленных для каждого наименования готового препарата, который разливают и укупоривают, обеспечивая стерильность и сохранение активности и физико-химических свойств препарата на протяжении срока годности (2 года).

Наличие на производстве стандартного препарата предприятия (СПП) который используется для контроля серий препарата, позволит обеспечить стабильный выпуск стандартизованных препаратов. Охарактеризованный СПП может использоваться в качестве стандартного образца при контроле серий промежуточных аллергенных продуктов (маточный раствор) и при контроле серии конечных препаратов аллергенов.

Характеристика СПП

СПП должен быть охарактеризован по следующим показателям: содержание белка, белкового профиля с использованием методов - изоэлектрического фокусирования, электрофореза в полиакриламидном геле, иммуноэлектрофореза или молекулярного-массового распределения. Аллергенные компоненты могут быть определены методами: иммуноблотингом или перекрестным радио-иммуноэлектрофорезом. Характеристика аллергенных компонентов может включать идентификацию специфических аллергенов, основанную на серологических или других методах с использованием пула сывороток или индивидуальных сывороток от пациентов с аллергией или аллергенспецифических поликлональных, или моноклональных антител.

Биологическую активность СПП устанавливают in vivo - методом кожного тестирования и выражают в единицах биологической активности. Для некоторых экстрактов активность может быть установлена иммунологическим анализом, основанным на подавлении связывающей способности специфических иммуноглобулинов Е антител или количественными методами для отдельного главного компонента.

Подлинность

Подлинность подтверждается в промежуточной или необходимой стадии в сравнении с СПП с использованием белкового профиля и подходящих методов (изоэлектрического фокусирования, электрофореза в полиакриламидном геле с натрия додецилсульфатом или иммуноэлектрофореза).

В процессе производства аллергенов необходима стандартизация всех операций производства начиная с получения сырьевых материалов, заканчивая получением конечного продукта (GMP - технология согласно международным регламентирующим документам).

Испытания готового продукта

Описание. Приводится описание физических свойств соответствующей лекарственной формы лекарственного средства, испытание проводят визуально.

Подлинность. Подлинность определяется методами, позволяющим идентифицировать препарат по специфичности (кожное тестирование с аллергеном) и/ или иммуноферментным анализом (ИФА).

Характеристика методов определения "Специфической активности" в тесте in vivo - это метод кожного тестирования (прик-тест, скарификация, внутрикожные пробы) аллергенов, аллергоидов (водно-солевых растворов), полученных из материалов природного происхождения, вызывающих развитие аллергического заболевания. В основе метода лежит выявление специфической реакции кожи у лиц чувствительных к соответствующему (тестируемому) аллергену, аллергоиду соотнесенной с кожной реакцией на гистамин.

Специфическая активность (кожное тестирование).

Аллерген должен вызывать положительную кожную реакцию (волдырь, гиперемия) у 3 из 5 пациентов чувствительных к соответствующему и аллергену и не вызывать у лиц контрольной группы. Указывают способ введения, время наблюдения, степень выраженности кожной реакции (размеры волдыря гиперемию).

Остаточная аллергенность для аллергоидов (кожное тестирование)

Аллергоид должен обладать сниженной аллергенной активностью и вызывать у пациентов чувствительных к соответствующему аллергену, кожные реакции, выраженность которых в 1,5 и более раза меньше по размеру волдыря, чем на аллерген при одномоментной постановке. Остаточную аллергенность аллергоида подтверждают при оценки специфической активности аллергоидов у пациентов с высокой чувствительностью к соответствующему аллергену.

Методы испытаний

Прозрачность. Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор (если нет других указаний в частной фармакопейной статье), указывают методы определения. Определение проводят в соответствии с ОФС "Прозрачность и степень мутности жидкостей".

Растворимость для аллерготропинов. Не более 20 мин, если в частной фармакопейной статье нет других указаний.

Приводят описание методики с указанием времени растворения восстановленного раствора. Время растворения указывается в частных фармакопейных статьях.

рН. От 6,75 до 7,25 (если в частной фармакопейной статье нет других указаний).

Испытание проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС "Ионометрия". Указывается допустимый интервал значений рН (в случае определения рН после растворения, следует указать растворитель и его объем).

Механические включения. Указывают требования и методы определения отсутствия механических включений в частной фармакопейной статье.

Извлекаемый объем. Извлекаемый объем должен соответствовать требованиям, указанным в частных фармакопейных статьях и должен быть не менее номинального. Определение проводят по ОФС "Извлекаемый объем для лекарственных форм для парентерального применения".

Белковый азот. Нормативные требования указывают в частной фармакопейной статье. Указывают допустимые колебания белкового азота и метод определения в частной фармакопейной статье. Определение проводят колориметрическим методом с реактивом Несслера по ОФС "Определение белка".

Фенол. От 0,2% до 0,4% определение проводят спектрофотометрическим методом по ОФС "Определение фенола".

Пирогенность. Лекарственное средство должно быть апирогенным. Определение проводят в соответствии с ОФС "Пирогенность". Указывают допустимые пределы изменений температуры у животных, тест-дозу.

Если в частной фармакопейной статье не указано иначе:

- для аллерготропинов: тест доза 100 PNU/мл на 1 кг массы кролика.

- для аллерготропинов: тест доза 100 PNU/мл на 1 кг массы кролика

Стерильность. Аллергены, аллергоиды, аллерготропины должны быть стерильными. Определение проводят в соответствии с ОФС "Стерильность", метод прямого посева.

Аномальная токсичность. Лекарственное средство должно быть не токсичным. Определение проводят в соответствии с ОФС "Аномальная токсичность". Указывают тест-дозы, способ введения и время наблюдения.

Подлинность полиоксидония для аллерготропинов. Метод спектроскопии указывают в частных фармакопейных статьях, максимум поглощения должен иметь при  нм.

Подлинность по аллергоиду для аллерготропинов. Метод ИФА по цветному окрашиванию, указывают в частных фармакопейных статьях.

Количественное определение полиоксидония для аллерготропинов.

Метод фотометрический. В одном флаконе не менее 0,0056 г и не более 0,0069  г, указывают в частных фармакопейных статьях.

Иммуногенная активность для аллерготропинов. Препарат должен вызывать 4-х кратный прирост титров IgG антител у сенсибилизированных морских свинок (метод ИФА), указывают в частных фармакопейных статьях.

Комплектация

Аллергены, аллергоиды, аллерготропины выпускаются в комплекте с тест-контрольной и разводящей жидкостью.

Аллергены для диагностики комплектуют с тест-контрольной жидкостью.

Аллергены для диагностики и лечения комплектуют с тест-контрольной и разводящей жидкостью.

Аллергоиды, аллерготропины для лечения комплектуют с разводящей жидкостью.

Тест-контрольная жидкость - фосфатно-солевой буферный раствор, рН от 6,75 до 7,25.

Указаны следующие подразделы: "Состав", "Описание", "Прозрачность", "Цветность", "рН", "Механические включения", "Извлекаемый объём", "Стерильность", "Аномальная токсичность", "Фенол". Выше перечисленные разделы и указанные в них требования должны соответствовать требованиям основного препарата, частная ФС.

Назначение - отрицательный контроль при постановке кожных проб. Выпускают в комплекте с аллергенами, предназначенным как для диагностики (эпидермальные, пищевые аллергены), так и для диагностики и лечения (пыльцевые, бытовые аллергены).

Разводящая жидкость - фосфатно-солевой буферный раствор, рН от 6,75 до 7,25.

Указаны следующие подразделы: "Состав", "Фенол", "Описание", "Подлинность" (должна давать характерные реакции на фосфаты и хлориды, определение проводят аргентометрическим методом), "Прозрачность", "Цветность", " рН", "Тяжелые металлы" (не более 0,0005%, определение проводят с растворами сульфидом натрия или сероводородом), "Механические включения", "Извлекаемый объем", "Стерильность", "Аномальная токсичность", "Пирогенность", "Фенол", частная ФС.

Назначение - для разведения аллергенов, при проведении специфической иммунотерапии (бытовые аллергены).

Разводящая жидкость для аллергена - фосфатный буферный раствор рН от 6,8 до 7,2.

Указаны следующие подразделы: "Состав", "Описание", "Стерильность", "Аномальная токсичность", "Фенол", "Механические включения", "Извлекаемый объём", которые должны соответствовать основному препарату, частная ФС.

Назначение - для разведения пыльцевых аллергенов при проведении специфической иммунотерапии.

Разводящая жидкость для аллергоида - 0,1 М фосфатный буфер рН от 7,3 до 7,7.

Указаны следующие подразделы: "Номинальный объём", "Стерильность", "Аномальная токсичность", "Механические включения" - данные требования должны соответствовать основному препарату, частная ФС.

Назначение - разведение аллергоидов при проведении специфической иммунотерапии поллинозов, отрицательный контроль при кожном тестировании.

Упаковка и маркировка. В соответствии с ОФС "Иммунобиологические лекарственные средства", на пачке указывают "Для лечебно - профилактических учреждений".

Транспортирование и хранение. В защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С (если в частной фармакопейной статье нет других указаний). Жидкие лекарственные средства не допускается замораживать.