Государственный стандарт качества лекарственного средства. Фармакопейная статья "Анатоксин дифтерийный адсорбированный с уменьшенным содержанием антигена (АД-М-анатоксин)"

Государственный стандарт качества лекарственного средства
Фармакопейная статья
"Анатоксин дифтерийный адсорбированный с уменьшенным содержанием антигена (АД-М-анатоксин)"

Вводится впервые

Анатоксин дифтерийный адсорбированный с уменьшенным содержанием антигена (АД-М-анатоксин) представляет собой обезвреженный формальдегидом и теплом дифтерийный токсин, очищенный и адсорбированный на алюминия гидроксиде или другом, разрешенном к применению, минеральном сорбенте, предназначенный для профилактики дифтерии.

Производство

Дифтерийный анатоксин представляет собой токсин Corynebacterium diphtheriae, обезвреженный и очищенный способом, гарантирующим полную стабильную детоксикацию при сохранении антигенной активности.

Для получения дифтерийного токсина используют токсигенный штамм Corynebacterium diphtheriae, полученный и депонированный в официальной коллекции. Микробные клетки культивируют на жидких питательных средах, обеспечивающих высокую продукцию дифтерийного токсина. Методы культивирования должны гарантировать сохранение свойств штамма и предотвращать его контаминацию. Токсинсодержащую культуральную жидкость, освобожденную от микробных клеток и продуктов их распада, проверяют на стерильность, рН и содержание токсина. Для производства дифтерийного анатоксина используют культуральную среду с активностью токсина не менее 80 Lf в 1 мл. Детоксикация дифтерийного токсина и очистка дифтерийного анатоксина (кислотно-солевое осаждение, мембранная фильтрация) должны обеспечивать сохранение антигенной активности анатоксина и гарантировать его безопасность: отсутствие остаточной токсичности и реверсии токсических свойств. Для характеристики очищенного дифтерийного анатоксина определяют его рН, специфическую (антигенную) активность, содержание общего и белкового азота, антигенную чистоту (удельную активность).

Для производства АД-М-анатоксина можно использовать только стерильный и безопасный дифтерийный анатоксин, с активностью не менее 1500 Lf на мг белкового азота.

Показатели, которые влияют на качество, но не могут быть определены в конечном продукте, должны быть проверены на промежуточных стадиях производства, что должно быть отражено в частной статье.

Прививочная доза (0,5 мл) содержит 5 Lf дифтерийного анатоксина. В состав лекарственного средства может входить антимикробный консервант.

Испытания

Описание.

АД-М-анатоксин представляет собой мутную жидкость белого или белого с сероватым оттенком цвета. При отстаивании разделяется на рыхлый осадок белого или белого с сероватым оттенком цвета, легко диспергируемый при встряхивании и прозрачную надосадочную жидкость.

Подлинность.

Должен обладать специфической (иммуногенной) активностью, обеспечивая защиту от действия дифтерийного токсина. (См. раздел "Специфическая активность"). В частных фармакопейных статьях могут быть указаны альтернативные методы, подтверждающие наличие в лекарственном средстве дифтерийного анатоксина, обладающего антигенной активностью.

рН

От 6,4 до 7,3, если нет других указаний в частной фармакопейной статье. Испытание проводят потенциометрическим методом с неразведенным АД-М-анатоксином в соответствии с ОФС "Ионометрия".

Механические включения.

Видимые механические включения должны отсутствовать. Определение проводят в соответствии с ОФС "Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах".

Стерильность.

Должен быть стерильным. Испытания проводят методами прямого посева или мембранной фильтрации в соответствии с ОФС "Стерильность".

Аномальная токсичность.

Должен быть нетоксичным. Контроль проводят в соответствии с ОФС "Аномальная токсичность". Белым мышам массой тела 14 - 16 г препарат вводят внутрибрюшинно по 1 мл, морским свинкам массой тела 250-350 г - подкожно по 5,0 мл (по 2,5 мл в оба бока). За животными наблюдают 7 суток. В течение указанного времени не должно быть гибели животных и потери массы тела.

Специфическая безопасность.

Должен быть безопасным при подкожном введении 5 морским свинкам массой  г 10 прививочных доз для человека (по 2,5 мл в оба бока). Через 30 дней все животные должны остаться живыми без потери массы тела.

Специфическая (иммуногенная) активность.

Должен обладать иммуногенной активностью. Показатель выживаемости иммунизированных животных должен быть не менее 100% при заражении летальной дозой дифтерийного токсина.

Материалы и животные:

- испытуемый образец лекарственного средства

- дифтерийный токсин с предварительно установленной дозой Dlm (минимальная доза токсина, вызывающая гибель животных в течение 4 сут).

- морские свинки массой тела  г

Проведение испытания.

Неразведенное лекарственное средство вводят четырем морским свинкам массой  г однократно под кожу бока в дозе 0,6 мл. Через 30 сут определяют резистентность иммунизированных свинок к дифтерийному токсину, который вводят животным в дозе не менее 100 Dlm подкожно в бок в объеме 1 мл. За животными наблюдают 4 сут, в течение которых все морские свинки должны остаться живыми. Испытание сопровождают контролем 1 Dlm дифтерийного токсина на трех морских свинках из той же партии. Контрольные животные (не менее 2) должны погибнуть в течение 4 сут.

Полнота сорбции.

В 1 мл надосадочной жидкости содержание неадсорбированного дифтерийного анатоксина не должно превышать 1 Lf, если нет других указаний в частной фармакопейной статье.

Полноту сорбции определяют путем индикации неадсорбированного дифтерийного и столбнячного анатоксинов в надосадочной жидкости АД-М-анатоксина. Определение содержания неадсорбированного дифтерийного анатоксина в надосадочной жидкости проводят в соответствии с ОФС "Определение концентрации анатоксинов/токсинов в реакции флокуляции", если нет других указаний в частных фармакопейных статьях.

Формальдегид.

Не более 100 мкг/мл. Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение формальдегида".

Производственные штаммы микроорганизмов.

Раздел должен содержать следующую информацию: наименование штаммов; место их депонирования; допустимое количество пассажей (при необходимости) и методику их проведения с указанием условий культивирования; при необходимости дополнительные к паспортным данным требования к характеристикам штаммов.

Консерванты.

В качестве консерванта используют тиомерсал (мертиолят). Определение проводят в соответствии с ОФС "Определение тиомерсала". Концентрация консерванта не должна быть ниже минимально эффективной и не превышать указанную на упаковке более чем на 15% .

Сорбенты.

Алюминия гидроксид. Не более 1,1 мг/мл алюминия (Аl+3), если в частной статье нет иных указаний. Определение проводят комплексонометрическим методом в соответствии с ОФС "Комплексонометрическое титрование. Определение ионов алюминия в сорбированных иммунобиологических препаратах".

Извлекаемый объем.

Не менее номинального. Определение проводят в соответствии с ОФС "Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения".

Упаковка и маркировка.

В соответствии с ОФС "Иммунобиологические лекарственные препараты (средства). На первичную упаковку наносят дополнительное указание "Встряхивать!". На вторичную упаковку наносят дополнительные указания "Перед употреблением встряхивать", "Замораживание не допускается".

Транспортирование и хранение.

Транспортирование и хранения при температуре от 2 до 8°С.