Государственный стандарт качества лекарственного средства. Общая фармакопейная статья ОФС 42 - "Определение формальдегида"

Государственный стандарт качества лекарственного средства
Общая фармакопейная статья ОФС 42 -
"Определение формальдегида"

Вводится взамен метода,
изложенного в ФС 42-3874-99

Метод предназначен для определения формальдегида в иммунобиологических лекарственных средствах (ИБЛС). Метод определения формальдегида основан на образовании хиноидного красителя при взаимодействии фуксинсернистого реактива с водорастворимыми альдегидами. Определение формальдегида проводится колориметрическим методом с использованием фуксинсернистой кислоты.

Колориметрический метод

Испытуемый образец сорбированного лекарственного средства центрифугируют при 2000 об/мин в течение 20 мин. В химические пробирки отбирают 0,5 - 2,0 мл надосадочной жидкости сорбированного образца или такое же количество несорбированного образца, доводят объем раствора водой до 5 мл и перемешивают, прибавляют 1 мл раствора фуксинсернистой кислоты и вновь перемешивают. Пробирки закрывают пробками и оставляют на 1 час. Измеряют оптическую плотность при 590 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм по сравнению с контрольным раствором, содержащим 5 мл воды и 1 мл раствора кислоты фуксинсернистой/

Содержание формальдегида в мкг/мл вычисляют по формуле:

, где

а - содержание формальдегида, найденное по калибровочному графику, мкг;

А - количество испытуемого образца, мл.

Содержание формальдегида в ИБЛС не должно превышать 0,02% (200 мкг/мл).

Построение калибровочного графика. К 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 мл стандартного раствора N 2 прибавляют воду до объема 5 мл и перемешивают (содержание формальдегида 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 мкг). Прибавляют 1 мл раствора кислоты фуксинсернистой и вновь перемешивают. Далее анализ проводят, как указано выше. Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс количество мкг формальдегида, а по оси ординат - среднее значение оптической плотности калибровочных растворов.

Примечания

Испытуемый раствор. На анализ отбирают 0,5; 1,0 или 2,0 мл испытуемого образца в зависимости от содержания формальдегида в лекарственном средстве (количество формальдегида в анализируемом образце должно быть в пределах 20 - 80 мкг).

Основной стандартный раствор формальдегида с концентрацией около 4 мг/мл (раствор N 1). 1 мл формалина технического помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают.

Определяют процентное содержание формальдегида в формалине техническом. 5 мл раствора N 1 помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 20 мл 0,05 М раствора йода и 10 мл 1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают и оставляют в темном месте на 10 мин. Затем прибавляют 11 мл 0,5 М раствора серной кислоты. Выделившийся йод титруют 0,05 М раствором натрия тиосульфата. После появления соломенно-желтого окрашивания раствора добавляют индикатор 0,5% раствор крахмала. На титрование контрольного раствора отбирают 5 мл воды и прибавляют реактивы, указанные выше для раствора N 1.

Содержание формальдегида в процентах рассчитывают по формуле:

, где

а - количество 0,05 М раствора натрия тиосульфата, пошедшее на титрование контрольного раствора, мл;

б - количество 0,05 М раствора натрия тиосульфата, пошедшее на титрование раствора N 1, мл;

К - поправка к титру 0,05 М раствора натрия тиосульфата;

5,0 - объем раствора N 1, мл;

100 - разведение формалина технического;

100 - коэффициент пересчета в проценты.

0,001501 - количество формальдегида, соответствующее 1 мл 0,05 М раствора йода, г;

Содержание формальдегида в формалине техническом должно быть в пределах %.

Содержания формальдегида в стандартном растворе N 1 в мг/мл рассчитывают по формуле:

, где

- содержание формальдегида в формалине техническом,%;

100** - пересчет% в г;

100*** - пересчет на 1 мл;

1000 - пересчет в мг.

Раствор хранят при температуре от 2 до 8° С не более 1 месяца.

Стандартный раствор формальдегида 20 мкг/мл (раствор N 2).

Необходимое количество раствора N 1 помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают (если установлено, что концентрация формальдегида в формалине техническом 37%, то для приготовления стандартного раствора формальдегида N 2 отбирают 0,54 мл основного стандартного раствора N 1). Стандартный раствор N 2 используют свежеприготовленным.

Приготовление раствора кислоты фуксинсернистой.

1 г фуксина основного или парафуксина (для фуксинсернистой кислоты) растворяют в 500 мл воды на кипящей водяной бане. Раствор охлаждают до температуры 18 - 20°С, фильтруют в мерную колбу, вместимостью 1000 мл и прибавляют 30 мл 20% раствора калия метабисульфита или 25 мл 20% раствора натрия метабисульфита, через 20 мин к смеси прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и выдерживают не менее суток.

Перед каждым использованием раствор фуксинсернистой кислоты титруют 0,05 М раствором йода (индикатор: 0,5% раствор крахмала). На титрование 3 мл кислоты фуксинсернистой должно расходоваться от 3 до 4 мл раствора йода. Если объем раствора йода, израсходованного на титрование, меньше 3 мл, то к 100 мл приготовленного реактива прибавляют калий (или натрий) метабисульфит из расчета 200 мг на каждый миллилитр разницы между 3 мл и израсходованным объемом раствора йода. Если объем раствора йода, израсходованный на титрование, больше 4 мл, то к 100 мл реактива прибавляют раствор фуксина основного или парафуксина в мл в количестве, рассчитанным по формуле:

, где

V - объем 0,05 М раствора йода, пошедший на титрование 3 мл реактива, мл;

100 - объем фуксинсернистой кислоты, мл;

27 - коэффициент пересчета.

Реактив готов к применению через сутки после приготовления. Реактив должен быть бесцветным, допускается слегка желтоватая окраска. Для осветления раствора допускается применение активированного угля.

Реактив хранят в склянке из темного стекла с притертой пробкой при комнатной температуре в течение 1 года.

Приготовление 0,05 М раствора натрия тиосульфата.

Раствор натрия тиосульфата готовят из стандарт-титра (фиксанала) 0,1H раствора натрия тиосульфата в мерной колбе вместимостью 1000 мл. Раствор хранят в таре из темного стекла с притертой пробкой при температуре 18 - 30°С в течение 3 месяцев.

Приготовление 20% раствора натрия (калия) метабисульфита.

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 20 г натрия (калия) метабисульфита, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор готовят в день проведения анализа. Реактив хранят в склянке из темного стекла с притертой пробкой при комнатной температуре в течение 6 мес.