Методические указания МУК 4.1.1745-03 "Измерение массовых концентраций 2-(6-метоксинафтил)пропионовой кислоты (напроксена) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Методические указания МУК 4.1.1745-03
"Измерение массовых концентраций 2-(6-метоксинафтил)пропионовой кислоты (напроксена) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)

Дата введения: с момента утверждения

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на содержание напроксена в диапазоне массовых концентраций от 0,25 до 5,00 .

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула.

2.2. Эмпирическая формула .

2.3. Молекулярная масса 230,28.

2.4. Регистрационный номер CAS 222204-53-1.

2.5. Физико-химические свойства.

Напроксен - кристаллическое вещество белого цвета, растворимо в этиловом спирте, элюенте, малорастворимо в воде. Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Напроксен обладает общетоксическим действием.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны 0,5 . Класс опасности - второй.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений в интервале массовых концентраций напроксена с погрешностью при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовых концентраций напроксена основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора при длине волны 230 нм.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания напроксена в хроматографируемом объеме раствора 0,020 мкг.

Нижний предел измерения концентрации напроксена в воздухе 0,25 (при отборе 160 воздуха).

Метод специфичен в условиях производства готовой лекарственной формы напроксена. Определению не мешают сопутствующие вещества (целлюлоза микрокристаллическая, титана диоксид, поливинилпирролидон низкомолекулярный).

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостный микроколоночный типа "Милихром" со спектрофотометрическим детектором
Хроматографическая колонка стальная КАХ-44-3, 50х2 мм, заполненная сорбентом Сепарон С18, фракция 5 мкм
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е
Пробоотборное устройство ПУ-2Э	ГОСТ Р 51945-02
Фильтродержатель	ТУ 95.72.05-77
Ультразвуковая ванна УВМ-5	ТУ 25-7401.0111-93
Испаритель ротационный вакуумный	ТУ 25-1173.102-84
Набор для фильтрации растворов, производство НПФ "Биохром"
Пинцет медицинский	ГОСТ 21241-89
Колбы мерные, вместимостью 25, 50 и 500	ГОСТ 1770-74Е
Цилиндр мерный, вместимостью 500	ГОСТ 1770-74Е
Колбы остродонные со шлифом, вместимостью 10	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы 50/30	ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 0,2, 1, 2, 5 и 10	ГОСТ 29227-91
Фильтры АФА-ВП-10	ТУ 95-743-80

5.2. Реактивы

Напроксен, N регистрации 002657 от 26.10.92, содержание основного вещества не менее 99,5%
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии	ТУ-6-09-14-2167-84
Калий дигидрофосфат, хч	ГОСТ 4198-75
Кислота ортофосфорная, хч	ГОСТ 6552-58
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных методических указаний.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.

6.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.

8. Условия измерений

8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.

8.2. Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерения

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Стандартный раствор N 1 напроксена в растворе элюента концентрацией 1 готовится растворением 25 мг вещества в мерной колбе вместимостью 25 .

9.1.2. Стандартный раствор N 2 напроксена концентрацией 100 готовится разбавлением 5 стандартного раствора N 1 элюентом в мерной колбе вместимостью 50 . Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.

9.1.3. Раствор дигидрофосфата калия концентрацией 0,02 М готовят растворением 1,36 г указанной соли в 500 дистиллированной воды в колбе данного объема.

9.1.4. Раствор элюента готовят смешиванием с помощью мерного цилиндра 200 0,02 М раствора дигидрофосфата калия и 300 ацетонитрила в мерной колбе вместимостью 500 . Раствор доводят до рН 5 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор фильтруют с помощью набора для фильтрации растворов.

9.2. Подготовка прибора

Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в хроматографируемом объеме пробы, устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят разбавлением стандартного раствора N 2 согласно табл. 1. Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении в холодильнике.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении напроксена

N стандарта	Стандартный раствор напроксена N 2,	Раствор элюента,	Концентрация вещества,	Содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, мкг
1	0	20,0	0	0
2	0,8	19,2	4	0,02
3	1,6	18,4	8	0,04
4	2,4	17,6	12	0,06
5	4,0	16,0	20	0,10
6	10,0	10,0	50	0,25
7	16,0	4,0	80	0,40

Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

состав элюента: ацетонитрил - 0,02 М дигидрофосфат калия, 3:2, рН 5;

скорость потока элюента 100 ;

объем вводимой пробы 5 ;

длина волны спектрофотометрического детектора 230 нм;

время удерживания напроксена 3 мин 30 с.

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 6 растворов разных концентраций и холостой пробы, проводя не менее 5 параллельных определений для каждого раствора, и строят градуировочную зависимость площади пика (в условных единицах) от количества компонента в пробе (мкг).

Проверку градуировочной характеристики проводят при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в неделю.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 аспирируют через фильтр АФА-ВП. Для измерения 1/2 ПДК достаточно отобрать 160 воздуха. Пробы можно хранить в течение 3 суток.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в бюкс и приливают пипеткой 5 раствора элюента. Периодически встряхивая, выдерживают раствор в течение 5 мин и сливают его в другую пробирку. Аналогичным образом проводят повторную экстракцию с фильтра и объединяют растворы. Степень десорбции напроксена с фильтра 98%. Хроматографирование раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого вещества в растворе проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

11. Расчет концентрации

Концентрацию напроксена (С, ) в воздухе вычисляют по формуле:

, где

а - содержание вещества в анализируемом объеме пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

б - объем пробы, взятой для хроматографирования, ;

в - общий объем раствора пробы, ;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, (см. прилож. 1).

12. Оформление результата анализа

Результат количественного анализа представляют в виде () , Р = 0,95, где - характеристика погрешности, .

13. Контроль погрешности методики

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С.

13.1. Оперативный контроль воспроизводимости

Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Анализируют в соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа: партии реактивов, набора мерной посуды и т.д., и получают два результата и анализов. Результаты анализа не должны отличаться друг от друга на величину большую, чем норматив оперативного контроля воспроизводимости D:

При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в месяц.

Таблица 2

Результаты метрологической аттестации методики количественного химического анализа

Диапазон определяемых массовых концентраций напроксена,	Наименование метрологической характеристики
	характеристика погрешности (), , Р = 0,95	норматив оперативного контроля погрешности (К), , Р = 0,90, m = 2	норматив оперативного контроля воспроизводимости, (D) , Р = 0,95, m = 2
От 0,25 до 5,00	0,22С	0,26С	0,17С

13.2. Оперативный контроль точности

Оперативный контроль точности выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Затем к одной пробе, отобранной на фильтр, добавляют анализируемый компонент X из раствора, нанося его на фильтр. Величина добавки должна соответствовать 50-150% от содержания компонента в пробе. Величина не должна выходить за верхнюю границу диапазона измерения. Результаты анализа без добавки и с добавкой получают по возможности в одинаковых условиях, одним аналитиком, с одной партией реактивов, одним набором посуды и т.д. Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем поверки используемых пробоотборников. Расчет норматива оперативного контроля погрешности К проводят по характеристике погрешности методики за вычетом характеристики погрешности пробоотборника. Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия.

Внутренний оперативный контроль точности проводят не реже, чем 1 раз в месяц.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 3 ч.

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации, Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко