Методические указания МУК 4.1.1749-03
"Измерение массовых концентраций 1,2,3,6-тетрагидро-2,6-диоксипиримидин-4-карбоната калия (оротата калия) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии"
(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)
Дата введения: с момента утверждения
1. Область применения
Настоящие методические указания устанавливают количественный хроматографический анализ воздуха рабочей зоны на содержание 1,2,3,6-тетрагидро-2,6-диоксипиримидин-4-карбоната калия (оротата калия) в диапазоне массовых концентраций от 0,5 до 10,0 .
2. Характеристика вещества
2.1. Структурная формула.
2.2. Эмпирическая формула .
2.3. Молекулярная масса 194,19.
2.4. Регистрационный номер CAS 24598-73-0.
2.5. Физико-химические свойства.
Оротат калия - кристаллическое вещество белого цвета, 350°С, малорастворим в воде, растворим в элюенте, растворе гидроксида натрия, нерастворим в этиловом спирте и других органических растворителях.
Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.
2.6. Токсикологическая характеристика.
Оротат калия обладает общетоксическим действием.
Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны 1,0 .
3. Погрешность измерений
Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций оротата калия с погрешностью не более % в диапазоне массовых концентраций от 0,5 до 1,0 и с погрешностью не более % в диапазоне массовых концентраций от 1 до 10 при доверительной вероятности 0,95.
4. Метод измерений
Измерения массовой концентрации оротата калия основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора при длине волны 278 нм.
Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания оротата калия в хроматографируемом объеме раствора 0,020 мкг.
Нижний предел измерения концентрации оротата калия в воздухе 0,5 (при отборе 100 воздуха).
Метод специфичен в условиях производства готовой лекарственной формы оротата калия. Определению не мешают пиримидин, KCl, этиловый спирт.
5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы
5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы
Хроматограф жидкостный микроколоночный типа "Милихром" со спектрофотометрическим детектором |
|
Хроматографическая колонка стальная КАХ-44-3, 50х2 мм, заполненная сорбентом |
|
Сепарон С18, фракция 5 мкм |
|
Весы аналитические ВЛА 200 |
ГОСТ 24104-88Е |
Пробоотборное устройство ПУ-2Э |
ГОСТ Р 51945-02 |
Фильтродержатель |
ТУ 95.72.05-77 |
Пинцет медицинский |
|
Набор для фильтрации растворов, производство НПФ "Биохром" |
|
Набор для фильтрации проб МНФ-13, производство НПФ "Биохром" |
|
Ультразвуковая ванна УВМ-5 |
ТУ 25-7401.0111-93 |
Колбы мерные, вместимостью 100 и 500 |
|
Пипетки, вместимостью 0,2, 1, 2, 5 и 10 |
|
Шприцы медицинские, вместимостью 10 |
|
Цилиндр мерный, вместимостью 500 |
|
Бюксы 50/30 |
|
Фильтры АФА-ВП-10 |
ТУ 95-743-80 |
5.2. Реактивы
Оротат калия, ФС 42-938-93, содержание основного вещества не менее 99% |
|
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии |
ТУ-6-09-14-2167-84 |
Калий дигидрофосфат, хч |
|
Кислота ортофосфорная, хч |
ГОСТ 6552-58 |
Вода дистиллированная |
Допускается применение иных средств измерения, вспомогательных устройств, реактивов и материалов, обеспечивающих показатели точности, установленные для данных методических указаний.
6. Требования безопасности
6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.
6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-76.
6.3. При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.
7. Требования к квалификации оператора
К выполнению измерений и обработке результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе.
8. Условия измерений
8.1. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха ()°С, атмосферном давлении 84-106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80%.
8.2. Измерения на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
9. Подготовка к выполнению измерения
9.1. Приготовление растворов
9.1.1. Стандартный раствор N 1 оротата калия в растворе элюента концентрацией 500 готовится растворением 25 мг вещества в мерной колбе вместимостью 50 .
9.1.2. Стандартный раствор N 2 оротата калия в растворе элюента концентрацией 100 готовится разбавлением элюентом 10 стандартного раствора N 1 в мерной колбе вместимостью 50 . Растворы устойчивы в течение двух недель при хранении в холодильнике
9.1.3. Раствор дигидрофосфата калия концентрацией 0,02 М готовят растворением 1,36 г указанной соли в 500 дистиллированной воды в колбе данного объема
9.1.4. Раствор элюента готовят смешиванием с помощью мерного цилиндра 490 0,02 М раствора дигидрофосфата калия и 10 ацетонитрила в мерной колбе вместимостью 500 . Раствор доводят до рН 4 ортофосфорной кислотой. Непосредственно перед измерением раствор фильтруют с помощью набора для фильтрации растворов.
9.2. Подготовка прибора
Общую подготовку прибора осуществляют согласно инструкции по эксплуатации.
9.3. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины хроматографического сигнала от массы анализируемого вещества в хроматографируемом объеме пробы, устанавливают по методу абсолютной градуировки с использованием серии градуировочных растворов, которые готовят разбавлением стандартного раствора N 1 согласно табл. 1.
Таблица 1
Растворы для установления градуировочной характеристики при определении оротата калия
N |
Стандартный раствор калия, оротата N 2, |
Раствор элюента, |
Концентрация вещества, |
Содержание вещества в хроматографируемом объеме пробы, мкг |
1 |
0 |
20,0 |
0 |
0 |
2 |
1,0 |
19,0 |
5 |
0,02 |
3 |
2,0 |
18,0 |
10 |
0,04 |
4 |
3,0 |
17,0 |
15 |
0,06 |
5 |
5,0 |
15,0 |
25 |
0,10 |
6 |
10,0 |
10,0 |
50 |
0,20 |
7 |
20,0 |
0 |
100 |
0,40 |
Растворы помещают в пробоотборное устройство хроматографа
Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:
состав элюента: ацетонитрил-0,02 М дигидрофосфат калия, 2:98, рН 4;
скорость потока элюента 100 ;
объем вводимой пробы 4 ;
длина волны спектрофотометрического детектора 278 нм;
время удерживания оротата калия 2 мин.
На полученной хроматограмме измеряют площади пиков с помощью интегратора хроматографа (в условных единицах) при анализе 6 растворов разных концентраций и растворителя, проводя не менее 5 параллельных определений для каждого раствора и холостой пробы, и строят градуировочную зависимость площади пика от количества компонента в пробе (мкг).
Проверку градуировочной характеристики проводят при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в неделю.
9.4. Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 10 аспирируют через фильтр АФА-ВП. Для измерения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 100 воздуха. Пробы можно хранить в течение суток.
10. Выполнение измерения
Фильтр с отобранной пробой помещают с помощью пинцета в бюкс с пришлифованной крышкой и приливают пипеткой 5 раствора элюента. Помещают бюкс в ультразвуковую ванну на 5 мин. Отбирают раствор медицинским шприцем и фильтруют в пробирку с пришлифованной пробкой, используя набор для фильтрации проб. Повторяют экстракцию и фильтрование в ту же пробирку. Степень десорбции с фильтра 87% Хроматографирование раствора пробы проводят в тех же условиях, что и хроматографирование градуировочных растворов. Количественное определение содержания анализируемого вещества в растворе проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.
11. Расчет концентрации
Массовую концентрацию оротата калия (С, ) в воздухе вычисляют по формуле
, где
а - содержание вещества в анализируемом объеме пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг,
б - объем пробы, взятой для хроматографирования, ;
в - общий объем раствора пробы, ,
V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, (см. прилож. 1)
12. Оформление результата анализа
Результат количественного анализа представляют в виде () , Р = 0,95, где - характеристика погрешности, .
13. Контроль погрешности методики
13.1. Метрологическая аттестация методики
Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2 в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе С. Концентрацию рассчитывают как среднеарифметическую результатов параллельных определений
Таблица 2
Результаты метрологической аттестации методики количественного химического анализа
Диапазон определяемых массовых концентраций оротата калия, |
Наименование метрологической характеристики |
||
характеристика погрешности (), ; Р = 0,95 |
норматив оперативного контроля точности (К), ; Р = 0,90, m = 2 |
норматив оперативного контроля воспроизводимости (D), ; Р = 0,95, m = 2 |
|
От 0,5 до 10,0 |
0,18С + 0,020 |
0,16С + 0,029 |
0,10С + 0,054 |
13.2. Оперативный контроль воспроизводимости
Оперативный контроль воспроизводимости выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Анализируют в соответствии с прописью методики, привлекая различных исполнителей и максимально варьируя условия проведения анализа; партии реактивов, наборы мерной посуды и т.д., и получают два результата и анализов. Результаты анализа не должны отличаться друг от друга на величину большую, чем норматив оперативного контроля воспроизводимости D:
При превышении расхождения между двумя результатами норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
Внутренний оперативный контроль воспроизводимости проводят не реже, чем 1 раз в месяц.
13.3. Оперативный контроль точности
Оперативный контроль точности выполняют в одной серии с анализом рабочих проб. Отбирают реальные пробы воздуха рабочей зоны из одного традиционного места отбора двумя пробоотборниками одновременно. Затем к одной пробе, отобранной на фильтр, добавляют анализируемый компонент из раствора, нанося его на фильтр. Величина добавки должна соответствовать 50-150% от содержания компонента в пробе. Величина не должна выходить за верхнюю границу диапазона измерения. Результаты анализа без добавки и с добавкой получают по возможности в одинаковых условиях: одним аналитиком, с одной партией реактивов, одним набором посуды и т.д. Погрешность процедуры отбора проб контролируют путем поверки используемых пробоотборников. Расчет норматива оперативного контроля погрешности К проводят по характеристике погрешности методики за вычетом характеристики погрешности пробоотборника. Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:
Внутренний оперативный контроль точности проводят не реже, чем 1 раз в месяц.
14. Нормы затрат времени на анализ
Для проведения серии анализов из 6 проб при последовательном отборе проб воздуха требуется 2 ч.
Главный государственный санитарный |
Г.Г. Онищенко |
Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.
Утверждены методические указания по измерению массовых концентраций оротата калия в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (МУК 4.1.1749-03).
Измерения основаны на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектора при длине волны 278 нм.
Приведены физико-химические свойства и токсикологическая характеристика оротата калия.
Перечислены средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы. Установлены требования безопасности и требования к квалификации операторов. Определены условия измерений, их проведение, обработка результатов анализа.
Методические указания МУК 4.1.1749-03 "Измерение массовых концентраций 1,2,3,6-тетрагидро-2,6-диоксипиримидин-4-карбоната калия (оротата калия) в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29 июня 2003 г.)
Текст методических указаний официально опубликован не был
Дата введения: с момента утверждения
Методические указания разработаны Российским государственным медицинским университетом (Гугля Е.Б., Бидевкина М.В.)