Глава III. Методы выявления липофильного токсина

Глава III
Методы выявления липофильного токсина

А. Методы химического анализа

(1) Метод EU-RL LC-MS/MS является эталонным методом для выявления морских токсинов в соответствии с Главой V (2) (c), (d) и (е) Раздела VII Приложения III к Регламенту (ЕС) 853/2004. В соответствии с указанным методом определяется как минимум уровень следующих веществ:

- токсины группы окадаиковой кислоты OA, DTX1, DTX2, DTX3 и их сложные эфиры;

- токсины группы пектенотоксинов: PTX1 и PTX2;

- токсины группы есотоксинов: YTX, 45 OH YTX, homo YTX, и 45 OH homo YTX;

- токсины группы азаспирокислот: AZA1, AZA2 и AZA3.

(2) Общий эквивалентный показатель токсичности рассчитывается с использованием факторов эквивалентной токсичности (TEF) в соответствии с рекомендациями Европейского агентства по безопасности пищевых продуктов (EFSA).

(3) При открытии новых аналогов, имеющих значение для общественного здравоохранения, они должны быть включены в анализ. Общий эквивалентный показатель токсичности рассчитывается с использованием факторов эквивалентной токсичности (TEF) в соответствии с рекомендациями Европейского агентства по безопасности пищевых продуктов (EFSA).

(4) Другие методы, такие как метод жидкостной хроматографии (LC), масс-спектрометрии (MS), высокоразрешающей жидкостной хроматографии (HPLC) с надлежащим определением, метод иммунологического анализа, функционального анализа, например, фосфатазной ингибиции, могут использоваться как альтернативные или дополнительные к методам EU-RL LC-MS/MS при условии, что:

(а) эти методы по отдельности или вместе позволяют обнаружить по крайней мере аналоги в соответствии с пунктом А(1) настоящей Главы, более точные критерии будут определены по мере необходимости;

(b) эти методы соответствуют критериям, установленным Поверочной лабораторией Сообщества (EU-RL). Такие методы должны быть подтверждены лабораторными испытаниями и проверены в соответствии с общепризнанной схемой проверки эффективности. Поверочная лаборатория Сообщества (EU-RL) принимает меры для поддержки проведения лабораторных испытаний с целью подтверждения эффективности метода и формальной стандартизации;

(с) применение этих методов обеспечивает эквивалентный уровень защиты общественного здоровья.

В. Биологические пробы

(1) С целью обеспечения адаптации государствами-членами ЕС методов анализа к методу LC-MS/MS в соответствии с пунктом А(1) настоящей Главы, до 31 декабря 2014 г. разрешается продолжать применение серии процедур биопроб на мышах, различающихся по размеру пробы (гепатопанкреас или целая туша) и по типам растворителей, использующихся для экстракции и очистки при выявлении морских токсинов в соответствии с Главой V(2) (c) и (е) Раздела VII Приложения III к Регламенту (ЕС)853/2004.

(2) Чувствительность и селективность зависят от выбора растворителей, использующихся для экстракции и очистки, что необходимо учитывать при выборе метода с целью охвата всего спектра токсинов.

(3) Для выявления окадаиковой кислоты, динофитовых токсинов, азаспирокислоты, пектенотоксинов и есотоксинов может проводиться одна биопроба с экстракцией ацетоном. Эта проба может дополняться при необходимости методом разделения жидкостей с использованием этилацетата/воды или дихлорметана/воды для исключения потенциальной интерференции.

(4) Для каждого теста используются три мыши. Если две из трех мышей умрут в течение 24 часов после введения пробы из расчета 5 г/гепатопанкреас или 25 г/целая туша, это будет считаться подтверждением наличия одного или нескольких токсинов, указанных в Главе V (2) (c), (d) и (е) Раздела VII Приложения III к Регламенту (ЕС) 853/2004, в объеме, превышающем установленные лимиты.

(5) Биопроба на мышах с экстракцией ацетона с распределением жидкости с помощью диэтилэфира может использоваться для выявления окадаиковой кислоты, динофитовых токсинов, азаспирокислоты, пектенотоксинов, но не есотоксинов, так как последние могут утрачиваться в процессе распределения. Для каждого теста используются три мыши. Если две из трех мышей умрут в течение 24 часов после введения пробы из расчета 5 г/гепатопанкреас или 25 г/целая туша, это будет считаться подтверждением наличия окадаиковой кислоты, динофитовых токсинов, азаспирокислот, пектенотоксинов в объеме, превышающем установленные лимиты в Главе V (2) (c), (d) и (е) Раздела VII Приложения III к Регламенту (ЕС) 853/2004.

(6) Метод биопроб на крысах может использоваться для выявления окадаиковой кислоты, динофитовых токсинов, азаспирокислот. Для каждой пробы используются три крысы. Реакция диареи у любой крысы считается подтверждением наличия окадаиковой кислоты, динофитовых токсинов и азаспирокислот в объеме, превышающем установленные лимиты в Главе V (2) (c), (d) и (е) Раздела VII Приложения III к Регламенту (ЕС) 853/2004.

С. По истечении периода, установленного в пункте В(1) настоящей Главы, метод биопроб на мышах может использоваться только в рамках периодического мониторинга зон производства и хранения для выявления новых или неизвестных морских токсинов на основании национальных программ контроля, разработанных государствами-членами ЕС.

______________________________

* ОЖ N L 358, 18.12.1986, стр. 1.