Приложение 1. Рецепты красок

Приложение 1

Рецепты красок

1. Щелочной метиленовый синий Леффлера.

Дистиллированная вода	99 мл
1% раствор гидроксида калия (КОН)	1 мл
10% спиртовой раствор метиленового синего	30 мл
Смешать. Окрашивать в течение 1-2 мин.

2. Уксуснокислый толуидиновый синий.

Толуидиновый синий	0,5 г
Ледяная уксусная кислота	2 мл
96% этиловый спирт	5 мл
Дистиллированная вода	100 мл
Смешать. Окрашивать в течение 3-5 мин.

3. Кристаллический фиолетовый.

Кристаллический фиолетовый	0,25 г
5% раствор уксусной кислоты	100 мл
Смешать. Профильтровать. Окрашивать в течение 5-7 мин

4. Окраска по Граму.

Имеется коммерческий набор окраски по Граму.

В лабораторных условиях для выполнения окраски по Граму готовят следующие растворы:

Карболовый раствор генцианового фиолетового или кристаллического фиолетового: 1) красителя 1 г, 96% спирта 10 мл, кристаллической карболовой кислоты 2 г, дистиллированной воды 100 мл (растирают в ступке краситель с карболовой кислотой до консистенции кашицы, прибавляют небольшими порциями спирт и окончательно разводят водой, сливают в бутыль, оставляют на сутки, затем фильтруют) или

2) насыщенного (4,8%) спиртового раствора красителя 10 мл, 2% карболовой воды 100 мл.

Раствор Люголя (в модификации Грама): йодида калия 2 г, дистиллированной воды 10 мл, йода кристаллического 1 г. Смесь хорошо укупоривают, оставляют на сутки, после чего добавляют дистиллированной воды 300 мл.

Методика окраски по Граму. На фиксированный мазок накладывают кусочек фильтровальной бумаги и на нее наливают карболовый раствор генцианового фиолетового на - 1 мин. Сливают краситель и, не смывая, наливают раствор Люголя на 1 мин. Сливают раствор Люголя и прополаскивают препарат в 95% спирте в течение - мин, пока не перестанет отходить краситель. Промывают водой. Дополнительно окрашивают разведенным фуксином в течение - 1 мин. Краситель сливают, препарат промывают и высушивают.

5. Окраска по Нейссеру

Для выявления зерен волютина используют эту окраску. Фиксированный мазок выдерживают по 1 мин в растворе метиленового синего и в растворе Люголя. Промывают водой. Докрашивают раствором хризоидина (или везувина, или бисмарк-браун) 1-3 мин. Промывают водой. Тела бактерий окрашиваются в нежно-желтый цвет, зерна волютина - в темно-коричневый с синим оттенком.