Методические указания на спектрофотометрическое определение ампициллина в воздухе (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 5 августа 1976 г. N 1480-76)

II. Реактивы и аппаратура

5. Применяемые реактивы и растворы.

Медь сернокислая , ГОСТ 41 65-68, х.ч.

Готовят растворением 0,982 г в воде в мерной колбе на 250 мл. Раствор содержит 1 мг/мл меди.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный, 0,2 М раствор.

Кислота лимонная, ГОСТ 3652-69, х.ч.

Кислота лимонная, 0,1 М раствор.

Фосфатная буферная смесь рН 5,2 (готовят смешивая 464 мл 0,1 М раствора лимонной кислоты и 536 мл 0,2 М ).

Раствор сернокислой меди в буферной смеси готовят разведением 1,5 мл основного раствора сернокислой меди буферной смесью в мерной колбе на 1000 мл. Раствор содержит 15 мкг/мл меди.

Стандартный раствор N 1 ампициллина, содержащий 100 мг/мл, готовят из стандартного образца ампициллина с содержанием 835 мкг химически чистого ампициллина в 1 мг стандартного препарата растворением в буферном растворе сульфата меди. Раствор устойчив 2-3 дня.

Стандартный раствор N 2 ампициллина, содержащий 10 мкг/мл, готовят разведением раствора N 1 в буферном растворе сульфата меди. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

6. Применяемые посуда и приборы.

Фильтры аэрозольные АФА-В-10 и АФА-В-20.

Спектрофотометр.

Аспирационное устройство.

Водяная баня.

Контактный термометр.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-59, емкостью 50, 100, 250, 500 и 1000 мл.

Пробирки градуированные, емкостью 5 мл. Химические стаканы емкостью 50 мл.

Пипетки градуированные, ГОСТ 1770-59, емкостью 1, 2, 5 мл с делениями 0,01 и 0,05 мл.

Пипетки Мора емкостью 10 и 15 мл.

Штатив для пробирок.

III. Отбор пробы воздуха

7. Поглощение ампициллина из воздуха производят на фильтры АФА-В-18 со скоростью 15-20 л/мин. Для определения 1/2 ПДК необходимо отобрать 200 л воздуха.

IV. Описание определения

8. Фильтр с пробой при помощи пинцета помещают в стакан, заливают 10 мл сернокислой меди в буферной смеси, расправляют его и, периодически помешивая, оставляют на 40 мин для растворения, затем отжимают фильтр стеклянной палочкой и раствор фильтруют.

Для анализа в пробирки с притертой пробкой отбирают 5,0 мл раствора, пробирки помещают в водяную баню и при 75°С нагревают 30 мин, затем быстро охлаждают до комнатной температуры (при необходимости доводят до 5,0 мл водой) и хорошо перемешивают.

Оптическую плотность определяют при 320 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Контролем служит раствор, полученный при обработке чистого фильтра буферным раствором сернокислой меди рН 5,2 без нагревания. Оптическая плотность растворов устойчива 1 ч.

Содержание ампициллина в анализируемом объеме вычисляют по заранее построенному калибровочному графику. Шкалы стандартов с содержанием 5-125 мкг ампициллина в анализируемом объеме пробы готовят согласно табл. 29.

Таблица 29 #

Шкала стандартов

Номер стандарта	Содержание ампициллина, мкг	Стандартный раствор N 1, мл	Стандартный раствор N 2, мл	Раствор сернокислой меди в буферной смеси, мл
1	0	-	0	5,0
2	5	-	0,5	4,5
3	10	-	1,0	4,0
4	25	0,25	-	4,75
5	50	0,5	-	4,5
6	75	0,75	-	4,25
7	100	1,0	-	4,0
8	125	1,25	-	3,75

Приготовление стандартной шкалы заканчивают, как указано выше, нагревают при 75°С в течение 30 мин и после охлаждения проводят измерение оптической плотности растворов.

Концентрацию ампициллина в воздуха Х вычисляют по формуле

,

где G - количество ампициллина, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

V - объем пробы, взятый для анализа, мл;

- общий объем пробы, мл;

- объем воздуха, взятый для анализа и приведенный к нормальным условиям (см. приложение 1), л.

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И. Заиченко