Методические указания по определению фосэтилалюминия в плодах и растениях огурца и почве газожидкостной хроматографией (утв. Министерством здравоохранения СССР 29 июля 1991 г. N 6237-91)

1. Краткая характеристика препарата.

Фосэтилалюминий - трис (этилфосфит) алюминия является действующим веществом фунгицидов "Альетт" ф. Рон-Пуленк, Франция. Эфаль М, НПО "Каустик". Алюфит, НПО "Каустик".

Структурная формула:

Эмпирическая формула:

Молекулярная масса: 354,0

Белое кристаллическое вещество, плавящееся с разложением. Растворимость в воде (20°С) 120 г/л, в ацетонитриле и метилцеллозольве 0,08 г/л. Медленно разлагается в водном растворе: период полуразложения при 20°С (1 г/л) > 100 дней. Окислители быстро инактивируют препарат, превращая его в производные фосфорной кислоты.

Выпускается в виде 80%-ного с.п., а также в смесях с другими пестицидами. Применяется как системный фунгицид для защиты хмеля и табака от ложной мучнистой росы (2-3 г/га), на виноградниках против милдью (3 кг/га), а также на фруктовых деревьях в комбинации с каптаном или фолпеном.

для крыс 5800 мг/кг. Мало токсичен для пчел и других полезных насекомых. МДУ не установлен.

2. Методика газохроматографического определения фосэтилалюминия в плодах и растениях огурца и почве.

2.1. Основные положения.

2.1.1. Принцип метода.

Метод основан на извлечении фосэтилалюминия из плодов и растений огурца гомогенизацией с 1%-ной серной кислотой, из почвы экстракцией 1%-ным раствором серной кислоты, центрифугировании фильтрата, метилировании фосэтилалюминия диазометаном и определении метилового эфира этилфосфористой кислоты на газовом хроматографе с термоионным детектором.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Минимально детектируемое количество 0,05 нг, линейный диапазон детектирования 0,05-5 нг. Другие метрологические характеристики приведены в таблице:

Объект анализа	Предел обнаружения, мг/кг	Внесено препарата в пробу, мг/кг	Среднее значение степени определ., %	Стандартное отклонение, %	Относит. стандартное откл., %	Доверительный интервал среднего при Р = 0,95; n = 5
Огурцы плоды	0,1	0,25 1,0	65,5 68,3	6,1 6,5	9,3 9,5	7,5 8,0
Растения	0,25	1,0 4,0	73,5 74,9	4,9 4,3	6,6 5,7	6,1 5,3
Почва	0,25	0,5	88,1	4,9	5,6	6,1

2.1.3. Избирательность метода.

Пестициды, применяемые совместно с фосэтилалюминием, определению не мешают.

2.2. Реактивы и растворы.

Соляная кислота, ч., ГОСТ 3118-67.

Серная кислота, ч., ГОСТ 4204-66.

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79.

Метиламин, 24%-ный водный раствор, МРТУ 6-09-1385-67.

Мочевина, ч.д.а., ГОСТ 6691-67.

Нитрит натрия, ч.д.а., ГОСТ 4168-66.

Диэтиловый эфир, ч., ТУ 6-09-870-78, абсолютированный.

Гидроксид натрия, ч.д.а., ГОСТ 4203-65.

Хроматон N-AW (0,110-0,125) + 15% карбовакс 20М.

Азот, ч., ГОСТ 9293-74.

Стандартные растворы фосэтилалюминия, основной: 100 мкг/мл; рабочие 1,0; 5,0; 10,0 мкг/мл. Срок хранения в холодильнике основного стандарта 1 месяц, рабочих - 1 неделя.

2.3. Приборы, аппаратура, посуда.

Газовый хроматограф "Цвет-106" или аналогичный с термоионным детектором.

Механический встряхиватель ТУ-64-1-1081-73.

Размельчитель тканей РТ-1; ТУ 64-1-1505-79.

Центрифуга ЦЛС-3, ТУ-5-375-4170-73.

Колба круглодонная ККШ-500; ГОСТ 9737-70.

ГАРАНТ:

Межгосударственным Советом по стандартизации, метрологии и сертификации 21 октября 1993 г. взамен ГОСТ 9737-70 с 1 января 1995 г. принят ГОСТ 9737-93

Воронки химические 70 мм, ГОСТ 9775-77.

Колбы круглодонные ККШ-50, ГОСТ 9737-70.

Пипетки, ГОСТ 20292-77 емк. 5 и 1 мл.

Баня водяная, ТУ 46-22-608-75, или ротационый испаритель ИР-1М.

Стакан химический емк. 3 л.

Холодильник ТИП ХПТ-КШ, ГОСТ 1770-64.

Холодильник обратный, ГОСТ 9499-70.

Термометр ТЛ-2, ГОСТ 275-73

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Получение нитрозометилмочевины.

В 1 л колбу приливают 200 г (1,5 м) 24%-ного водного раствора метиламина и добавляют концентрированную соляную кислоту до кислой (рН - 1-2) реакции среды (около 150 мл). В колбу добавляют до объема 500 мл дистиллированной воды и 300 г (5 м) мочевины. Полученный раствор осторожно кипятят с обратным холодильником при умеренном нагреве в течение 3-х часов. Усиливают нагрев и кипятят еще 15 минут. Раствор охлаждают до комнатной температуры и растворяют в нем 110 г (1,5 м) нитрита натрия. Охлаждают раствор до 0°С в смеси лед-хлорид натрия.

B 3-x литровом стакане готовят смесь из 600 г льда и 100 г (1 м) концентрированной серной кислоты. К раствору при охлаждении стакана в смеси лед-хлорид натрия медленно приливают холодный раствор метилмочевины и при перемешивании содержимого механической мешалкой. Нитрозометилмочевина всплывает на поверхность в виде кристаллов. Кристаллы отфильтровывают на воронке Бюхнера под вакуумом. Затем размешивают их с 50 мл холодной воды до образования пасты и снова отфильтровывают. Сушат нитрозометилмочевину в вакуумном эксикаторе до постоянного веса. Выход 105-115 г (66-72%). Хранить нитрозометилмочевину следует в темной склянке в холодильнике, т.к. под действием тепла и света, она может взрываться. Вещество ядовито! Избегать попадания на кожу. Испытание на чистоту: 0,5 г нитрозометилмочевины растворить в 5 мл метанола. Вещество должно раствориться без осадка. Если остается осадок, вещество дополнительно промыть холодной водой и высушить как указано выше.

2.4.2. Получение диазометана.

В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещают 30 мл 50%-ного водного раствора гидроксида калия и 100 мл абсолютированного серного эфира. Смесь охлаждает льдом до 5°С, после чего при взбалтывании через химическую воронку небольшими порциями добавляют 10,3 г (0,1 м) нитрозометилмочевины. Колбу соединяют с холодильником и стеклянным алонжем, конец которого погружают в приемную колбу с 40 мл диэтилового эфира. Приемную колбу погружают в ёмкость со смесью соли и льда. Реакционную колбу нагревают в водяной бане до 40°С и перегоняют образующийся диазометан совместно с серным эфиром. Отгонку прекращают как только дистиллят станет бесцветным. Нельзя отгонять весь эфир, так как оставшиеся на дне колбы перекисные соединения взрывоопасны. Раствор диазометана хранят в колбе с притертой пробкой в холодильнике не более пяти дней.

2.4.3. Приготовление стандартов.

В пробирки или грушевидные колбы вносят 0,1; 0,2; 0,5 мл стандартного раствора с концентрацией 1 мкг/мл, добавляют по 2-3 мл ацетона, осушают на водяной бане током сухого воздуха досуха. После охлаждения пробирок до комнатной температуры, приливают к сухому остатку по 3 мл эфирного раствора диазометана и закрывают притертыми пробками, через 15 минут избыток диазометана нейтрализуют, прибавляя в пробирку по каплям муравьиную кислоту. Концентрации стандартных растворов соответствуют 0,1; 0,2; 0,5 мкг/мл. Хроматографируют 3 мкл раствора. Метилирование стандартов проводят в день анализа.

2.4.4. Отбор проб.

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР 21 августа 1979 г. N 2051-79.

2.4.5. Подготовка проб к анализу.

Лабораторную пробу плодов или растений огурца измельчают ножом, перемеривают и отбирают навески: плодов 100 г., растений 50 г. Почву растирают в ступке, просеивают, и отбирают навеску 25 г.

2.5. Проведение определения.

2.5.1. Экстракция.

Аналитическую пробу помещают в стакан гомогенизатора или измельчителя тканей, прибавляют 50 мл 1%-ного раствора серной кислоты для плодов и 100 мл этого экстрагента для растений, смесь гомогенизируют в течение 10 минут. Гомогенизат фильтруют через ватный фильтр, промывают фильтр 30 мл 1%-ной , отбирают 10 мл фильтрата в центрифужную пробирку и центрифугируют 15 минут при 5 тыс. об./мин. (R = 10 см). Навеску почвы помещают в коническую колбу, приливают 50 мл 1%-ного раствора серной кислоты и фосэтилалюминий экстрагируют на механическом встряхивателе в течение 1 часа. Содержимое колбы фильтруют через ватный фильтр и 10 мл фильтрата центрифугируют.

В круглодонные колбы емкостью 50 мл отбирают пипеткой из центрифужных пробирок по 0,5 мл экстракта, прибавляют 2-3 мл ацетона и отдувают воздухом воду и ацетон при нагревании на водяной бане. К сухому остатку после охлаждения до комнатной температуры прибавляют 3 мл эфирного раствора диазометана и колбу закрывают пробкой. Колбу периодически встряхивают. Через 15 минут в колбу по каплям добавляют муравьиную кислоту для нейтрализации избытка диазометана (до обесцвечивания желтой окраски). В хроматограф вводят 3 мкл раствора.

2.5.2. Условия хроматографирования.

Колонка стеклянная 1 м х 3 мм, заполнена хроматоном N-AW 0,100-0,125 мм с 15% карбовакса 20 М. Температура термостата колонок 150°С, испарителя 160°С. Расход газа-носителя 40 мл/мин (азот), воздуха 300 мл/мин, водорода - 20 мл/мин. Время удерживания метилэтилфосфита - 3,8 мин.

2.6. Обработка результатов.

Содержание фосэтилалюминия в анализируемой пробе расчитывают# по формуле:

, где

Нх - высота пика рабочей пробы, мм;

Нст - высота пика стандарта, мм;

Сст - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

Уст - объем стандартного раствора, вводимого в испаритель, мкг;

Ух - объем экстракта, вводимого в испаритель, мкг;

Ук - конечный объем метилированного экстракта, мл;

Ун - начальный объем полученного экстракта (гомогенизата);

Уа - объем экстракта, взятого для метилирования;

a - степень определения.

3. Требования техники безопасности.

Соблюдать требования техники безопасности, принятые для работы с пестицидами, ЛВЖ и взрывоопасными веществами.