Приложение III. Анализ концентрации тиоцианата в молоке

Приложение III

Анализ концентрации тиоцианата в молоке

Принцип

Наличие тиоцианата в молоке может быть установлено после извлечения белков с помощью трихлоруксусной кислоты (ТСА) как комплекса железа посредством измерения абсорбции на уровне 460 нм. Минимальный уровень обнаружения при таком методе составляет от 1 до 2 м.д. SCN- .

Реактивные растворы

1. 20% (по весу) трихлоруксусная кислота: 20 гр. TCA растворяют в 100 мл дистиллированной воды и отфильтровывают.

2. Нитрат железа в качестве реагента: 16,0 гр. растворяют в 50 мл 2 M HNO3*, а затем разбавляют дистиллированной воды до 100 мл. Раствор необходимо хранить в прохладном и защищенном от света месте.

_____________________________

* 2M HNO3 получают посредством разбавления 138,5 мл 65% HNO3 до 1000 мл с помощью дистиллированной воды.

Определение уровня концентрации тиоцианата

4,0 мл молока смешивают с 2,0 мл 20%-го раствора TCA. Смесь необходимо хорошо перемешать и оставить как минимум на 30 минут. Затем смесь необходимо отфильтровать с помощью подходящей фильтрованной бумаги (ватман N 40). Затем 1,5 мл чистого отфильтрованного раствора смешивают с 1,5 мл нитрата железа, при этом абсорбция измеряется на уровне 460 нм. В качестве раствора для сравнения используется смесь 1,5 мл раствора нитрата железа и 1,5 мл воды. Измерение необходимо провести в течение 10 минут после добавления раствора нитрата железа, так как окрашенный комплекс не стабилен в течение длительного времени. После этого уровень концентрации тиоцианата определяется посредством сравнения со стандартными растворами, в которых концентрация тиоцианата известна и составляет, например 10, 15, 20 и 30 мкг/мл тиоцианата.