Приложение 9. Рецепты основных питательных средств для санитарно-бактериологического анализа сточных вод

Приложение 9

Рецепты основных питательных средств для санитарно-бактериологического анализа сточных вод

1. Селенитовая среда

Однозамещенный кислый селенистокислый натрий (без теллурита)	4,0 г
Пептон (производство ЧССР, ВНР или ГДР)	5,0 г
Натрий фосфорнокислый двузамещенный (безводный)	7,0 г
Натрий фосфорнокислый однозамещенный (безводный)	3,0 г
Лактоза	4,0 г
Вода дистиллированная	1000 мл

К дистиллированной воде добавляют фосфаты, пептон и лактозу, растворяют их и стерилизуют при 112°С в течение 30 мин. Отдельно в стерильной дистиллированной воде готовят 10%-ный раствор кислого селенистокислого натрия, который добавляют к среде перед употреблением из расчета 0,4 мл на 10 мл среды. Готовая среда должна иметь рН 6,8-7,1.

2. Магниевая среда

I

Пептон	4,2 г
Хлористый натрий	7,0 г
Калий фосфорнокислый однозамещенный (безводный)	1,5 г
Дрожжевой экстракт	20,0 г
Вода дистиллированная	890 мл

Растворяют эти вещества при кипячении, затем добавляют растворы - II и III.

II

Хлористый магний кристаллический	36,0 г
Вода дистиллированная	90,0 мл

III

0,1%-ный водный раствор бриллиантового зеленого

5,0 мл

Магниевую среду разливают в колбы и стерилизуют при 112°С в течение 20 мин.

3. Трехсахарный агар с мочевиной

На 100 мл питательного агара (рН 7,2-7,4) берут:

лактозы	1,0 г
сахарозы	1,0 г
глюкозы	0,1 г
мочевины	1,0 г
соли Мора	0,02 г
гипосульфита	0,63 г
фенолового красного (фенолрота)	0,4-0,6 мл

Все ингредиенты, кроме фенолрота, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды (10 мл) на водяной бане и вносят в расплавленный агар, фильтруют через марлю и доводят до рН 7,2-7,4. Затем добавляют фенолрот и разливают в пробирки по 5-6 мл. Стерилизуют в прогретом автоклаве при 0,5 атм в течение 20 мин.

4. Агар Чапмена

МПА	100 мл
Хлористый натрий	8,0 г
Маннит	1,0 г
Фенольный красный	0,0025 г

Среду разливают в колбы и стерилизуют при 0,5 атм в течение 20 мин.

5. Глюкозо-пептонная среда

Среду готовят двух видов: нормальную и концентрированную. Среда нормальной концентрации содержит:

пептон	10,0 г
хлористый натрий	5,0 г
глюкозу	5,0 г
дистиллированную воду	1000 мл

После растворения указанных ингредиентов прибавляют индикатор (2 мл 1,6%-ного спиртового раствора бромтимолового синего или 10 мл индикатора Андраде), устанавливают рН 7,4-7,6 и разливают среду по 10 мл в пробирки с поплавками, стерилизуют в автоклаве при 11,2°С (0,5 ) в течение 12 мин.

При приготовлении концентрированной среды количество всех ингредиентов, кроме воды, увеличивают в 10 раз.

6. Среда Эндо

Готовят из сухого препарата по рецепту на этикетке.

7. Полужидкая среда с индикатором ВР и глюкозой

Готовят по рецепту на этикетке. Срок хранения - не более 7 суток.

8. Приготовление реактива для определения оксидазной активности бактерий

30-40 мг растворяют в 2,5 мл ректифицированного этилового спирта, добавляют 7,5 мл дистиллированной воды и 40-60 мг . Раствор готовят непосредственно перед определением.