Приложение С (обязательное). Использование естественно контаминированных образцов и приготовление искусственно контаминированных образцов для исследований по валидации

Приложение С
(обязательное)

Использование
естественно контаминированных образцов и приготовление искусственно контаминированных образцов для исследований по валидации

Необходимо проводить выбор типа пищевого продукта в категории так, чтобы увеличить долю естественно контаминированных образцов. В случае, если доступно лишь ограниченное число естественно контаминированных образцов, можно воспользоваться вторым вариантом, представленным ниже, для увеличения числа образцов. Третий вариант должен использоваться только в хорошо обоснованных случаях. Можно также использовать стандартные материалы, содержащие микроорганизмы, подвергнутые стрессу, предпочтительно с вполне определенными уровнями целевого аналита (микроорганизмов) и указанным сроком хранения.

1-й вариант	Естественно контаминированные образцы Используют образцы, собранные из продуктов, которые поточно анализирует лаборатория-организатор или другие лаборатории. Хранение должно минимизировать микробиологические изменения и уменьшить микробный стресс. Контаминация (качественная или количественная сообразно обстоятельствам) должна быть подтверждена немедленно перед исследованием.
2-й вариант	Контаминирование смесью Засевают жидкие и полутвердые испытываемые продукты путем разбавления естественно контаминированным образцом сходного типа. Фоновая микрофлора в "разбавленном продукте" должна быть сходного типа в состоянии стресса, подобным тому, что присутствует в естественно контаминированных продуктах.
3-й вариант	Образцы с добавлением известного количества определяемого вещества Если референтный материал*1) доступен, то его используют для проведения засевания. Если референтный материал отсутствует, то используемые штаммы изолируют от продукта того же типа. Определяют протокол создания стресса целевого микроорганизма, и во время засева должен наблюдаться стресс. Уровень микрофлоры должен быть представительным для контаминации, которая происходит в этом продукте естественным образом.
4-й вариант	Референтные материалы Референтные материалы, такие как сертифицированный референтный материал, содержащие подходящие и вполне определенные уровни целевого аналита (микроорганизмов) в стабильном стрессовом состоянии, можно использовать для внесения посевного материала в испытываемые образцы для анализа как качественными, так и количественными методами. Для качественных исследований их использование должно быть ограничено, когда в качестве референтных материалов доступны только несколько штаммов или серологических типов целевого аналита пищевого происхождения.

*1) Испытывают 10 реплик на каждом из трех - четырех уровнях контаминации.