Методические указания на фотометрическое определение бензилпенициллина в воздухе (утв. Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 18 марта 1981 г. N 2307-81)

М.в. 334,38

Бензилпенициллин представляет собой аморфный или кристаллический порошок, белого цвета с т.пл. 216°С, хорошо растворимый в воде, ацетоне, этаноле; плохо - в бензоле, четыреххлористом углероде, диоксане.

II. Реактивы и аппаратура

8. Применяемые реактивы и растворы.

Бензилпенициллин, х.ч.

Стандартный раствор бензилпенициллина N 1 с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением стандартного образца бензилпенициллина в буферном растворе сернокислой меди. Раствор готовят непосредственно перед употреблением.

Стандартный раствор N 2 с содержанием 10 мкг/мл готовят разведением стандартного раствора N 1 в буферном растворе сернокислой меди. Готовят перед употреблением.

Медь сернокислая, х.ч., ГОСТ 4165-68, основной раствор с содержанием 5 мг/мл готовят растворением в воде. Раствор годен длительное время.

Натрий фосфорно-кислый двузамещенный, х.ч., ГОСТ 4172-66, 0,2 N раствор в воде.

Кислота лимонная, х.ч., ГОСТ 3652-69, 0,1 м раствор в воде.

Фосфат-цитратная буферная смесь, рН , готовят смешением 507 мл 0,1 м раствора лимонной кислоты и 493 мл 0,2 м раствора двузамещенного фосфорно-кислого натрия.

Раствор сернокислой меди в буферной смеси готовят разведением 2,5 мл основного раствора сернокислой меди буферной смесью в мерной колбе на 250 мл. Готовят непосредственно перед употреблением.

9. Применяемые посуда и приборы.

Аспирационное устройство.

Фильтродержатель.

Фильтры АФА-ВП-10.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 25, 50, 100, 250 и 1000 мл.

Пробирки градуированные, ГОСТ 1770-74, на 5 мл с притертыми пробками.

Пипетки градуированные, ГОСТ 20292-74, на 1,2 и 5 мл с делениями на 0,01 в 0,05 мл.

Пипетки Мopa на 10 мл.

Воронки с пористой пластинкой N 2 или N 3.

Водяная баня.

Штатив для пробирок.

Спектрофотометр.

III. Отбор пробы воздуха

10. Воздух со скоростью 15-20 л/мин протягивают через фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 предельно допустимой концентрации следует отобрать 400 л воздуха.

IV. Описание определения

11. Фильтр с пробой помещают в стакан, заливают 10 мл раствора сернокислой меди в буферной смеси; расплавляют его и, периодически помешивая, оставляют на 10-15 минут. Затем раствор фильтруют через воронку с пористой пластинкой.

Для анализа в пробирки с притертыми пробками отбирают 5 мл раствора антибиотика и помещают в кипящую водяную баню на 15 минут, затем быстро охлаждают до комнатной температуры (при необходимости доводят до 5 мл водой) и хорошо перемешивают.

Пробы фотометрируют на спектрофотометре в кюветах с толщиной слоя 10 мм при 322 нм с использованием водородной лампы по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробам.

Содержание бензилпенициллина в анализируемом объеме определяют по предварительно построенному калибровочному графику, для построения которого готовят шкалу стандартов согласно таблице 3.

Таблица 3

Шкала стандартов

Номер стандарта	1	2	3	4	5	6
Стандартный раствор N 1, мл.	-	-	-	1,0	1,5	2,0
Стандартный раствор N 2, мл	-	1,0	5,0
Раствор сернокислой меди в буферной смеси, мл	5,0	4,0	0,0	4,0	3,5	3,0
Содержание бензилпенициллина, мкг	0	10	50	100	150	200

Все пробирки шкалы обрабатывают аналогично пробам.

Оптическая плотность растворов устойчива 2 часа.

Концентрацию бензилпенициллина в воздуха (X) вычисляют по формуле:

, где

- количество бензилпенициллина, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;

V - объем пробы, взятый для анализа, мл;

- общий объем пробы, мл;

- объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям по формуле (см. приложение 1).

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И. Заиченко