Приложение В (рекомендуемое). Методика построения калибровочного графика при определении выделения фенола

Приложение В
(рекомендуемое)

Методика
построения калибровочного графика при определении выделения фенола

B.1 Дополнительная аппаратура и реактивы

- пипетки вместимостью 1 , 5 ;

- колбы мерные вместимостью 25 , 50  и 100 ;

- стандартные образцы состава раствора фенола, 1 .

B.2 Ход определения

B.2.1 Приготовление стандартных растворов:

а) Стандартный раствор А (10 мг фенола в 1 ) готовят из стандартного образца состава раствора фенола. Для этого 1  этого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100  и дополняют объем до метки водой. Раствор перемешивают;

б) стандартный раствор Б (1 мг фенола в 1 ) готовят 10-кратным разбавлением стандартного раствора А. Для этого 5  раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50  и дополняют объем до метки водой. Раствор перемешивают.

B.2.2 Построение калибровочного графика:

Калибровочные растворы фенола готовят в мерных колбах вместимостью 25  по три образца каждого, кроме раствора сравнения в соответствии с таблицей В.1. Добавление растворов фенола и диазотированного п-нитроанилина необходимо проводить в колбы, наполовину заполненные поглотительным раствором.

Таблица В.1 - Растворы для построения калибровочного графика

Наименование раствора	Серия растворов
	1-я	2-я	3-я	Раствор сравнения
Стандартный раствор фенола	1 раствора Б	5  раствора Б	2  раствора А	0
Раствор п-нитроанилина диазотированного,	В каждую колбу по 2
Содержание фенола в каждом растворе серии (С), мкг	1	5	20	0

Объем раствора в каждой колбе дополняют поглотительным раствором до метки, закрывают колбы пробками, содержимое колб перемешивают и выдерживают в течение 20 мин. Продолжительность выдержки для всех проб должна быть одинаковой.

Определяют оптическую плотность растворов (D) с помощью спектрофотометра по инструкции к нему. Измерение оптической плотности проводят при длине волны 494 нм в кюветах с шириной рабочего слоя 50 мм относительно раствора сравнения. За результат измерения принимают среднее арифметическое значение трех последовательных показаний прибора.

В.3 Обработка результатов

По полученным результатам с учетом нулевой точки (начала координат) как экспериментальной точки строят калибровочный график зависимости содержания фенола (С, мкг) в пробе от оптической плотности (D) на миллиметровой бумаге или используют программные средства. Допускается графическое или аналитическое выражение указанной зависимости с обязательным оформлением протокола или записью в журнале о результатах расчетов с указанием даты.

Калибровочный график должны проверять не менее одного раза в месяц. Для проведения оперативной проверки калибровочного графика допускается измерение оптической плотности раствора сравнения относительно воздуха или воды. Значение оптической плотности проверяемого раствора сравнения не должно отличаться от начального его значения более чем на 20%.

Примечание - Калибровочные коэффициенты (график) действительны только для данной партии растворов и для данного оборудования (спектрофотометр, кюветы), на котором проводилось их определение. При замене или ремонте оборудования построение калибровочного графика должно быть повторено.