Приложение 5. Приготовление рабочих растворов для проведения исследований методом MALDI-ToF масс-спектрометрии

Приложение 5

Приготовление рабочих растворов для проведения исследований методом MALDI-ToF масс-спектрометрии

1) Приготовление 70%-го этанола (100 мл):

- Отмерить 27 мл деионизованной воды с помощью 100-миллиметрового градуированного цилиндра;

- Воду налить в мерный стакан;

- Отмерить 73 мл 96%-го этанола с помощью 100-миллиметрового градуированного цилиндра;

- Спирт налить в мерный стакан с 27 мл воды;

- Тщательно перемешать.

2) Приготовление 70%-го раствора муравьиной кислоты (FA) (100 мл):

- Внести 30 мкл деионизованной воды в 1,5-миллиметровую микропробирку;

- Осторожно добавить 70 мкл 100%-го FA;

- Тщательно перемешать на микроцентрифуге-вортексе;

- Раствор готов для использования.

3) Приготовление раствора матрицы.

Для приготовления раствора матрицы (-Циано-4-гидроксикоричная кислота) удобно использовать сухую порционную матрицу. Рекомендуется готовить матрицу в день проведения масс-спектрометрического исследования.

Для приготовления раствора:

- Внести 475 мкл ультрачистой деионизованной воды, 25 мкл 100%-го TFA и 500 мкл ацетонитрила в микропробирку до конечного объема 1 мл.

- Тщательно перемешать на микроцентрифуге-вортекс. Получившаяся смесь называется "стандартный растворитель".

- Перенести 250 мкл стандартного растворителя в пробирку с сухой порционной матрицей.

- Растворить матрицу перемешиванием при комнатной температуре до просветления раствора (все кристаллы должны раствориться). Конечная концентрация матричного раствора - 10 мг/мл.

- Раствор готов для использования.

Примечание. Приготовленный раствор может храниться в темном месте (во избежание ультрафиолетового воздействия) при комнатной температуре в течение рабочего дня.