Приложение 4. Приготовление толстой капли на плёнке для создания учебных коллекций по А.Е. Беляеву (1981)

Приложение 4

Приготовление толстой капли на плёнке для создания учебных коллекций по А.Е. Беляеву (1981)

Толстые капли для исследования крови на малярию не обязательно готовить на предметном стекле, возможно для учебных целей приготовление препарата на прозрачной пленке.

Преимущества данного метода заключаются в следующем:

- из одного прокола можно получить десятки препаратов;

- материал не занимает много места и может храниться десятки лет;

- смонтированный препарат защищен от механических повреждений;

- исключается воздействие масла и растворителя, отчего окраска не портится и сохраняется пигмент;

- после просмотра масло снимается сухой ватой и не нужен растворитель для удаления масла;

- при обучении все участники получают идентичные или почти идентичные препараты, что важно для обсуждения после просмотра.

Площадь стандартной толстой капли диаметром примерно 2 см составляет около 3 см2 и содержит порядка 30 мкл крови; 100 микроскопических полей большого увеличения содержат 0,2 мкл, иными словами во всём объёме толстой капли содержится количество крови в 150 раз большее, чем нужно для одного исследования.

Из толстой капли на плёнке легко вырезать небольшой кусочек с количеством крови, достаточным для просмотра. Эти кусочки можно смонтировать с помощью клейкой ленты на разные стёкла, получив таким образом из одной порции крови, которая обычно берётся для исследования на малярию, несколько десятков учебных препаратов.

Для плёнки-носителя подходят многие виды плёнки, например, отмытая фотоплёнка, прозрачная плёнка для письма (для ретропроекторов) и т.д. Существенное условие заключается в том, чтобы она не разбухала от воды: например, гидрофильный целлофан не подходит. Кроме того, плёнка должна быть достаточно жёсткой, чтобы ею можно было манипулировать: по этой причине не подходит, например, упаковочный полиэтилен.

Процедура приготовления учебных препаратов проста. Кровь из прокола пальца размазывают произвольным образом на куске прозрачной плёнки. Кровь к плёнке прилипает несколько хуже, чем к стеклу, поэтому лучше не красить её сразу, а подождать несколько дней.

Перед окраской плёнка разрезается на куски по размеру гнёзд контейнера для окраски, т е. примерно по размеру предметного стекла. При окраске куски плёнки удерживаются в контейнере пустыми предметными стёклами, вставленными в гнёзда. Окраска и просушка проводятся обычным порядком. Затем из окрашенного препарата вырезают кусочек примерно 5 х 5 мм, который помещают на предметное стекло кровью вверх и приклеивают его кусочком скотча.

Окрашенный материал хранят в конвертах. При хорошей окраске препараты не выцветают десятилетиями. По мере необходимости вырезают новые кусочки и монтируют их: таким образом, из одного прокола можно получить несколько сот препаратов.

Микроскопическая картина смонтированного препарата отличается от обычного препарата на стекле только наличием отдельных пузырьков воздуха, запертых между кровью и скотчем. Эти пузырьки отнюдь не мешают, а даже помогают в фокусировке.

При монтаже может быть только одна ошибка, если плёнка положена кровью вниз. В таком случае картинка получается мутная: видны ядра лейкоцитов с размытыми границами. Исправить такую ошибку несложно, нужно просто отодрать скотч и перевернуть препарат.

Ошибки при просмотре заключаются в просмотре не того слоя: поверхности скотча (А) и поверхности раздела нижней поверхности плёнки предметного стекла (В). В этих слоях бывают видны какие-то частицы пыли и загрязнений. Правильная позиция обозначена литерой Б.

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А.Ю. Попова