Приложение А (рекомендуемое). Порядок подготовки хроматографической колонки и определение ее эффективности

Приложение А
(рекомендуемое)

Порядок
подготовки хроматографической колонки и определение ее эффективности

А.1 Подготовка хроматографической колонки

Новую капиллярную колонку помещают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют в потоке газа-носителя со скоростью 40  в режиме программирования температуры со скоростью 6°С/мин до температуры 170°С и выдерживают еще 1 ч при конечной температуре. После охлаждения выходной конец колонки подсоединяют к детектору и проверяют стабильность нулевой линии при рабочей температуре термостата колонок в соответствии с указаниями производителя.

А.2 Контрольное определение

Для определения отсутствия загрязнения аналитической системы и хроматографической колонки, а также контроля чистоты используемых посуды, реактивов и материалов после вывода прибора на заданный режим в течение 30 мин перед проведением серии определений проводят измерение градуировочного раствора N 1 (см. таблицу 2) в условиях, указанных в 7.2.

Критерием готовности аналитической системы является отсутствие на контрольной хроматограмме пиков посторонних веществ. В случае наличия пиков посторонних веществ проводят кондиционирование колонки или заменяют колонку на новую. При обнаружении посторонних пиков необходимо поднять температуру колонки, испарителя и переходной камеры до 150°С и поддерживать ее от 30 до 60 мин для ускоренного элюирования высококипящих компонентов.

Дрейф базовой линии, определяемый как наибольшее смещение сигнала нулевой линии после 30 мин, не должен превышать 20% от высоты пика, соответствующего массовой доле этанола в градуировочном растворе.

А.3 Оценка эффективности разделения

Разрешение пиков проверяют для каждой новой колонки при ее установке по пробной хроматограмме контрольного раствора, содержащего добавку изомасляного альдегида, в количестве 0,1% от массовой доли этанола.

Раствор готовят аналогично процедуре, описанной в 8.1.

Степень разделения этанола и изомасляного альдегида вычисляют по ГОСТ 17567.

Для получения необходимой степени разделения эффективность хроматографической колонки (n) по этанолу должна быть не менее 300. Эффективность хроматографической колонки определяют в соответствии с ГОСТ 17567.

В дальнейшем подготовку и кондиционирование колонки проводят в случае снижения разделительной способности колонки.