Приложение. Схема тестирования, необходимая для установления достижения цели Союза по уменьшению распространения соответствующих серотипов Salmonella во взрослых племенных стадах Gallus gallus

Приложение

Схема
тестирования, необходимая для установления достижения цели Союза по уменьшению распространения соответствующих серотипов Salmonella во взрослых племенных стадах Gallus gallus

1. Схема отбора проб

Рамочная схема отбора проб для обнаружения наличия Salmonella enteritidis, Salmonella infantis, Salmonella hadar, Salmonella typhimurium и Salmonella virchow (соответствующие серотипы сальмонеллы) распространяется на все взрослые племенные стада домашних кур (Gallus gallus), включающие как минимум 250 птиц (племенные стада). Указанное положение применяется без ущерба действию положениям Регламента (ЕС) 2160/2003 и Директивы 2003/99/ЕС в отношении требований к мониторингу популяций других животных или других серотипов.

2. Мониторинг племенных стад

2.1. Место, частота и статус отбора проб

Отбор проб в племенных стадах производится по инициативе предпринимателя пищевой отрасли и в качестве части официальной проверки.

2.1.1. Отбор проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли

Отбор проб производится каждые две недели в месте, назначенном компетентным органом из двух нижеследующих вариантов:

(a) в инкубатории; или

(b) в хозяйстве.

Компетентный орган может принять решение о применении одного из вариантов, указанных в пунктах (а) или (b), ко всей схеме тестирования для всех племенных стад бройлеров и одного из вариантов для всех племенных стад кур-несушек. Однако отбор проб у племенных стад, несущих инкубационные яйца, предназначенные для торговли в пределах Союза, должен проходить в хозяйстве.

Необходимо установить процедуру, чтобы гарантировать, что лаборатория, выполняющая анализы, безотлагательно уведомляет компетентный орган об обнаружении наличия соответствующих серотипов Salmonella при отборе проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли. Своевременное уведомление об обнаружении наличия каких-либо соответствующих серотипов сальмонеллы является обязанностью предпринимателя пищевой отрасли и лаборатории, выполняющей анализы.

Путем частичного отступления от первого параграфа настоящего пункта, если в течение двух последовательных лет во всем государстве-члене ЕС цель Союза была достигнута, по усмотрению компетентного органа отбор проб в хозяйстве может производиться каждые три недели. Однако компетентный орган может принять решение оставить или вновь применить двухнедельный интервал тестирования в случае обнаружения наличия соответствующих серотипов Salmonella в племенном стаде в хозяйстве и/или в любом другом случае, если сочтет это целесообразным.

2.1.2. Отбор проб как часть официальной проверки

Отбор проб в качестве части официальной проверки включает:

2.1.2.1. Если отбор проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли производится в инкубатории:

(a) обычный отбор проб каждые 16 недель в инкубатории;

(b) обычный отбор проб в хозяйстве 2 раза в течение производственного цикла: первый - через 4 недели после перехода в фазу яйцекладки или перевода в зону для несушек и второй - в конце фазы яйцекладки, не ранее чем 8 недель до окончания производственного цикла;

(с) подтверждающий отбор проб в хозяйстве после обнаружения наличия соответствующих серотипов Salmonella при отборе проб в инкубатории.

2.1.2.2. Если отбор проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли производится в хозяйстве, обычный отбор проб должен производиться три раза в течение производственного цикла:

(а) после 4 недель после перехода в фазу яйцекладки или перевода в зону для несушек;

(b) в конце фазы яйцекладки, не ранее чем 8 недель до окончания производственного цикла;

(с) в любое время в течение производственного цикла, если прошло достаточно времени с момента отбора проб, указанных в пунктах (a) и (b).

2.1.2.3. Путем частичного отступления от пунктов 2.1.2.1 и 2.1.2.2. и если в течение двух последовательных лет во всем государстве-члене ЕС цель Союза была достигнута, компетентный орган может заменить обычный отбор проб на отбор проб:

(a) один раз в хозяйстве в любое время в течение производственного цикла и один раз в год в инкубатории; или

(b) два раза в хозяйстве в любое время с достаточным перерывом в течение производственного цикла.

Однако компетентный орган может принять решение оставить или вновь применить отбор проб, указанный в п. 2.1.2.1. или 2.1.2.2., в случае обнаружения наличия соответствующих серотипов Salmonella в племенном стаде в хозяйстве и/или в любом другом случае, если сочтет это целесообразным.

Вместо отбора проб компетентным органом может проводиться отбор проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли.

2.2. Протокол отбора проб

2.2.1. Отбор проб в инкубатории

При каждом отборе проб должен быть взят как минимум один образец из одного племенного стада.

Отбор проб должен производиться в день вылупления, когда образцы доступны во всех племенных стадах. Если это невозможно, то необходимо гарантировать, что образцы собираются у каждого стада с интервалом, указанным в п. 2.1.

Весь материал из всех инкубаторов, из которых на день отбора проб были удалены выведенные цыплята, должен быть пропорционально включен в набор образцов.

Если в инкубаторах более 50 000 яиц одного родительского племенного стада, необходимо взять второй образец.

Образец включает как минимум следующее:

(a) одну составную пробу визуально загрязненных подстилок в выводных шкафах инкубатора, взятую произвольно из пяти отдельных выводных шкафов инкубатора или различных мест в инкубаторе, чтобы получить общую поверхность отбора проб 1 м2; если инкубационные яйца одного племенного стада содержатся более чем в одном инкубаторе, то такая составная проба берется из каждого инкубатора, но не более чем из пяти; или

(b) одну пробу, взятую одним или несколькими смоченными тканевыми тампонами с участка поверхности как минимум 900 см2 немедленно после удаления цыплят. Проба берется со всей поверхности пола как минимум пяти выводных шкафов или подстилки из пяти мест, включая пол, в каждом выводном шкафу инкубатора, но не более чем из пяти, с вылупленными яйцами из стада. Необходимо проследить, чтобы от стада, из которого происходят яйца, отбирался как минимум один образец; или

(с) 10 г скорлупы, взятой из 25 различных выводных шкафов инкубатора, (чтобы получить общую массу 250 г в исходном образце), в пяти инкубаторах с инкубационными яйцами от одного стада, размолотой, смешанной и разделенной для формирования 25 г пробы для составления репрезентативного образца для тестирования.

Процедура, указанная в пунктах (а), (b) и (с), соблюдается при отборе проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли и при отборе проб в качестве части официальной проверки. Однако в отбор проб необязательно должен включать инкубатор с яйцами от разных стад, если по меньшей мере 80% яиц представлены в других инкубаторах, где отбирались пробы.

2.2.2. Отбор проб в хозяйстве:

2.2.2.1. обычный отбор проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли

Отбор проб включает в основном образцы фекалий и направлен на обнаружение 1%-й распространенности в стаде с доверительным пределом 95%. Для указанных целей образцы должны включать одно из следующего:

(a) объединенные в пул фекалии из различных образцов свежих фекалий, каждый весом не менее 1 г, взятый произвольно из нескольких мест в птичнике, где содержится племенное стадо, или, в том случае, если племенное стадо имеет свободный доступ к более чем одному птичнику в отдельном хозяйстве, взятый из каждой группы зданий в хозяйстве, в которых содержится стадо. Фекалии могут быть объединены для анализа по меньшей мере в два пула.

Количество мест, откуда необходимо брать образцы для формирования пула, следующее:

Количество птиц в племенном стаде	Количество образцов фекалий, которые необходимо взять в племенном стаде
250 - 349	200
350 - 449	220
450 - 799	250
800 - 999	260
1000 или более	300

(b) Бахилы и/или пылевые пробы:

Бахилы должны быть достаточно абсорбирующими для впитывания влаги. Для этой цели также могут использоваться марлевые "носки".

Поверхность бахил смачивается специальными растворами (такими как 0,8% раствор хлорида натрия, 0,1% раствор пептона в стерильной деионизированной воде, стерильной воде, или каким-либо другим раствором, одобренным компетентным органом).

Образцы берут во время обхода здания таким маршрутом, который позволяет взять репрезентативные образцы из всех частей птичника или соответствующего сектора. Маршрут включает также места с подстилкой и места для сбора навоза при условии, что по таким поверхностям передвигаться безопасно. Пробы отбирают во всех отдельных загонах птичника. По завершении отбора проб в отдельном секторе бахилы должны быть аккуратно убраны, чтобы не повредить собранный материал.

Образцы состоят из следующего:

(i) пять пар бахил, репрезентативных в отношении 20% площади птичника; бахилы могут быть объединены для анализа как минимум в два пула; или

(ii) как минимум одна пара бахил, репрезентативных в отношении всей площади птичника, и дополнительная пылевая проба, собранная из нескольких мест птичника с поверхностей, где визуально присутствует пыль; для сбора пылевой пробы используют один или несколько смоченных тканевых тампонов общей поверхностью как минимум 900 см2.

(с) В племенных стадах, содержащихся в клетках, отбор проб может составлять естественным образом смешанные фекалии с ленточных транспортеров для уборки помета, скребков или пометных канав, в зависимости от типа птичника. Собирают два образца весом как минимум 150 г для индивидуального тестирования:

(i) ленточных транспортеров под каждым ярусом клеток, которые постоянно находятся в движении и сливают фекалии в шнековый транспортер или конвейерную систему;

(ii) системы пометных канав, в которой направляющие под клетками выводят фекалии в канаву под зданием;

(iii) системы пометных канав в птичнике с клеточными батареями, когда клетки смещены таким образом, что фекалии попадают напрямую в канаву.

Обычно в здании несколько блоков с клетками. Объединенные в пул фекалии представлены одним общим объединенным в пул образцом. Два объединенных в пул образца берут от каждого племенного стада, как описано ниже в подпараграфах с третьего по шестой.

В системах с ленточными транспортерами или скребками, последние должны быть запущены в день отбора проб до непосредственного отбора.

В системах с направляющими под клетками и скребками собираются объединенные в пул фекалии, которые попали на скребок после его запуска.

В системах птичников с клеточными батареями, в которых отсутствует система ленточного транспортера, объединенные в пул фекалии собирают со всей канавы.

Системы ленточных транспортеров: объединенный в пул материал с фекалиями собирается с разгрузочных концов конвейера.

2.2.2.2. Отбор проб как часть официальной проверки

(а) обычный отбор проб производится, как описано в пункте 2.2.2.1.

(b) Подтверждающий отбор проб после обнаружения соответствующих серотипов Salmonella при отборе проб в инкубатории производится таким образом, как описано в пункте 2.2.2.1.

Дополнительные образцы для возможного тестирования на противомикробные вещества или ингибиторы роста бактерий могут быть собраны следующим образом: птицы отбираются произвольно из каждого птичника в хозяйстве, обычно до пяти птиц из одного птичника, если компетентный орган не сочтет необходимым отбирать большее количество птиц.

Если источник инфекции не подтвержден, до снятия ограничений на торговлю проводится противомикробное тестирование или новое бактериологическое тестирование на наличие соответствующих серотипов Salmonella племенного стада или его потомства.

Если обнаружены противомикробные средства или ингибиторы роста бактерий, инфекция Salmonella считается подтвержденной.

(c) Подозрение на ложные результаты

В исключительных случаях, когда у компетентного органа есть основания сомневаться в результатах тестирования (например, ложноположительные или ложноотрицательные результаты), он может принять решение о повторе тестирования в соответствии с пунктом (b).

3. Исследование образцов

3.1. Перевозка и подготовка образцов

3.1.1. Перевозка

Образцы предпочтительно пересылаются в лаборатории, указанные в Статьях 11 и 12 Регламента (ЕС) 2160/2003, экспресс-почтой или курьером в течение 24 часов после сбора. Если они не отправлены в течение 24 часов, то образцы должны храниться в холодильнике. Перевозка осуществляется при температуре окружающей среды при условии исключения чрезмерного нагрева (свыше 25° C) и воздействия солнечных лучей. В лаборатории образцы хранятся в холодильнике до проведения исследования, которое должно быть начато в течение 48 часов после получения и 96 часов после отбора проб.

3.1.2. Выводные шкафы инкубатора:

(a) Образец помещают в 1 литр забуференной пептонной воды (BPW), которая была предварительно нагрета при комнатной температуре, и с осторожностью смешивают.

(b) Продолжают культивирование образца с применением метода обнаружения, описанного в пункте 3.2.

3.1.3. Бахилы и пылевые пробы:

(a) одна или несколько пар бахил/носков и пылевая проба (тканевый тампон) с осторожностью распаковывают, избегая смещения собранного материала с фекалиями или материала с пылью, и помещают в 225 мл BPW, которая была предварительно нагрета до комнатной температуры.

(b) Бахилы/носки и тканевые тампоны с осторожностью погружают в BPW для обеспечения достаточного количества свободной жидкости вокруг образца для перемещения Salmonella из образца. При необходимости можно добавить больше BPW.

Необходимо отдельно приготавливать бахилы и тканевые тампоны.

(с) В тех случаях, когда пять пар бахил/носков объединены в два образца, каждый объединенный в пул образец помещают в 225 мл или более BPW, чтобы полностью погрузить образец и обеспечить достаточное количество свободной жидкости вокруг образца для перемещения Salmonella из образца.

(d) Перемешивают вращением сосуда до полного пропитывания образца и продолжают культивирование с использованием метода обнаружения, описанного в пункте 3.2.

3.1.4. Другие образцы материала с фекалиями:

(a) образцы фекалий объединяют в пул и тщательно смешивают, отбирают сокращенную пробу весом 25 г для культивирования.

(b) Сокращенную пробу весом 25 г помещают в 225 мл BPW, предварительно нагретую до комнатной температуры.

(с) Продолжают культивирование образца с применением метода обнаружения, описанного в пункте 3.2.

Если стандарты ISO по подготовке соответствующих образцов для обнаружения Salmonella согласованы, то они применяются вместо требований по подготовке образцов, указанных в пунктах 3.1.2., 3.1.3. и 3.1.4.

3.2. Метод обнаружения

Обнаружение соответствующих серотипов Salmonella проводят в соответствии с Поправкой 1 EN/ISO 6579-2002/Amd1:2007. "Микробиология пищевых продуктов и кормов - Горизонтальный метод обнаружения Salmonella spp. - Поправка 1: Приложение D: Обнаружение Salmonella spp. в экскрементах животных и образцов из окружающей среды на стадии первичного производства".

Что касается образцов, взятых при помощи бахил, пылевых проб и других образцов материала с фекалиями, указанных в пункте 3.1., инкубированный BPW накопительный бульон для будущей культуры может быть объединен в пул. Для этого оба образца выдерживают в BPW, как указано в пункте 3.1.3. Берут 1 мл инкубированного бульона от каждого образца и тщательно смешивают, затем берут 0,1 мл смеси и делают посевы в модифицированную полужидкую среду Раппапорта-Василиадиса (MSRV).

Образцы в BPW не должны встряхиваться, взбалтываться или иным образом перемешиваться после инкубации, так как это высвобождает ингибирующие частицы и уменьшает последующее выделение в MSRV.

3.3. Серотипирование

По меньшей мере один изолят из каждого образца, демонстрирующий положительную реакцию, должен быть типирован по схеме Кауфманна-Уайта.

3.4. Альтернативные методы

В отношении образцов, взятых по инициативе предпринимателя пищевой отрасли, вместо методов подготовки образцов, методов обнаружения и серотипирования, указанных в пунктах 3.1., 3.2. и 3.3. настоящего Приложения, могут применяться альтернативные методы, если они валидированы в соответствии с последними редакциями EN/ISO 16140.

3.5. Хранение штаммов

Необходимо гарантировать хранение как минимум одного выделенного штамма соответствующих серотипов Salmonella, полученного в результате отбора проб как части официальной проверки от одного птичника в течение одного года, для целей последующего возможного фаготипирования или тестирования чувствительности к противомикробным препаратам с использованием обычных методов коллекционирования культур, которые должны обеспечивать сохранность штаммов как минимум в течение двух лет. Если компетентный орган примет соответствующее решение, изоляты, полученные в результате отбора проб по инициативе предпринимателей пищевой отрасли, также должны храниться для указанных целей.

4. Результаты и отчетность

Племенное стадо считается положительным для цели подтверждения достижения цели Союза:

- если наличие соответствующих серотипов Salmonella (кроме штаммов вакцины) обнаружено в одном и более образцах, взятых в стаде, даже в том случае, если соответствующие серотипы Salmonella обнаружены только в пылевой пробе, или

- если подтверждающий отбор проб как часть официальной проверки в соответствии с пунктом 2.2.2.2(b) не подтвердил наличие соответствующих серотипов Salmonella, но в стаде обнаружены противомикробные вещества или ингибиторы роста бактерий.

Указанное правило не применяется в исключительных случаях, описанных в пункте 2.2.2.2(с), где первоначальный положительный результат по Salmonella, полученный при отборе проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли, не подтверждается при отборе проб как части официальной проверки.

Племенное стадо с положительным результатом учитывается один раз независимо от частоты обнаружения соответствующих серотипов Salmonella в данном стаде на протяжении производственного цикла или от того, по чьей инициативе - предпринимателя пищевой отрасли или компетентного органа - проводился отбор проб. Однако если отбор проб в течение производственного цикла продолжается два календарных года, то отчет ведется отдельно по результатам каждого года.

Отчет должен содержать следующее:

(а) подробное описание вариантов, применяемых в схеме отбора проб, и вид отобранных образцов соответственно;

(b) общее количество взрослых племенных стад, состоящих по меньшей мере из 250 птиц, которые были протестированы как минимум один раз в течение отчетного года:

(c) результаты тестирования, в т.ч.:

(i) общее количество племенных стад, положительных по любой Salmonella в государстве-члене ЕС;

(ii) количество племенных стад, положительных по как минимум одному из соответствующих серотипов Salmonella;

(iii) количество племенных стад, положительных по каждому серотипу Salmonella или неопределенному Salmonella (нетипируемые или несеротипированные изоляты);

(d) количество случаев, когда исходный положительный по Salmonella образец, полученный при отборе проб по инициативе предпринимателя пищевой отрасли, не был подтвержден при отборе проб в качестве части официальной проверки;

(e) пояснения результатов, в частности, в отношении исключительных случаев.

Результаты и любая релевантная информация должны сообщаться в качестве части отчета о тенденциях и источниках, указанного в Статье 9(1) Директивы 2003/99/ЕС.