Приложение А (справочное). Результаты межлабораторных испытаний

Приложение А
(справочное)

Результаты межлабораторных испытаний

Метод был валидирован в 2002 г. в ходе европейских межлабораторных испытаний, в которых принимало участие 13 лабораторий [5], [6]. Результаты, полученные в ходе этих межлабораторных испытаний, указывают на то, что методика работает хорошо с пределом обнаружения не менее 2% примеси ЭКМ в МК, что соответствует 0,6% ЭМК в шоколаде (при допущении, что содержание жиров в шоколаде 30%) без ошибочно-положительных или ошибочно-отрицательных результатов.

В таблице А.1 приведены приемлемые газохроматографические условия*. Пример профиля триацилглицеридов ЭМК масла какао приведен на рисунке А.1. Данные прецизионности приведены в таблицах А.2 - А.4.

Таблица А.1 - Приемлемые газохроматографические условия, используемые для анализа триацилглицеридов масла какао, эквивалентов масла какао, смесей масла какао/эквивалентов масла какао и шоколада

Возможный метод	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
Характеристики колонки: - неподвижная фаза - длина, м - внутренний диаметр, мм -толщина пленки, мкм	DB-17НТ 30 0,25 0,15	RTx-65TG 30 0,25 0,1	CB- ТАР 25 0,25 0,1	RTx- 65TG 30 0,25 0,1	СВ-ТАР 25 0,25 0,1	RTx-65TG 30 0,25 0,1	СВ-ТАР 25 0,25 0,1	DB-17НТ 30 0,25 0,15	СВ-ТАР 25 0,25 0,1	СВ-ТАР 25 0,25 0,1	СВ-ТАР 25 0, 25 0,1
Температурный режим (термостат):
- начальная температура, °С/время поддержания, мин - программируемая скорость 1, °С/мин - температура 1, °С/время поддержания, мин	80/2 50 300/0	340/1 1 -	280/0 10 320/0	100/0,5 50 330/2	340/0 1 -	200/0 15 360/0	100/0,1 70 -	50/2 50 300/1	200/2 20 320/0	100/1 30 300/2	200/2 12 -
- программируемая скорость 2, °С/мин	30	-	2	1	-	1	-	10	1	30	-
- температура 2, °С/время поддержания, мин	-	-	-	-	-	-	-	340/2	-	-	-
- программируемая скорость 3, °С/мин	-	-	-	-	-	-	-	0,5	-	-	-
- конечная температура, °С/время поддержания, мин	350/30	360/3	360/6	350/5	360/10	370/0	370/0	345/26	360/10	340/35	350/10
- температура инжектора, °С	Термостат	390	370	Термостат	360	390	Термостат	50	65-220-370	100	-
- температура детектора, °С	360	370	370	355	360	390	360	360	370	360	360
Режим введения	На колонку	С делением потока	С делением потока	На колонку	С делением потока	С делением потока	На колонку	На колонку	На колонку	На колонку	На колонку (горячий)
Газ-носитель: - тип - давление, кПа - скорость потока, /мин
	- 0,8	120 -	100 -	Не - 0,8	Не 150 -	150 -	- 1	120 -	Не 90 -	150 -	- 2,4
Проба: - концентрация, мг/ - вводимый объем,
	0,3 0,5	50 0,1	12,5 0,6	0,3 0,5	- 1	10 0,5	15 0,5	0,5 0,5	1 - 2 0,1	0,5 0,4	0,65 0,3

"Рисунок А.1 - Профиль триацилглицеридов сертифицированного стандартного материала масла какао"

Экспериментальные условия:

Газохроматографическая колонка: 25 м0,25 мм кварцевая капиллярная колонка, 0,1 мкм Chrompack ТАР.

Температура термостата колонки: 100°С поддерживается в течение 1 мин; 30 °С/мин до 340 °С, поддерживается в течение 35 мин.

Ввод пробы; холодный на колонку.

Детектор (ПИД): 360°С.

Газ-носитель: , 1,6 бар.

Вводимое количество: 0,5  раствора концентрацией 0,5 мг/мл.

Сокращения:

РРР - трипалмитин.

МОР - 1-маргароил-2-олеоил-3-палмитоилглицерид.

PPS -1,2-дипалмитоил-3-стеароилглицерид.

POP -1,3-дипалмитоил-2-олеоилглицерид.

PLP -1,3-дипалмитоил-2-линолеоилглицерид.

PSS - 1-палмитоил-2,3-дистеароилглицерид.

POS - 1-палмитоил-2-олеоил-3-стеароилглицерид.

РОО - 1-палмитоил-2,3-диолеоилглицерид.

PLS - 1-палмитоил-2-линолеоил-3-стеароилглицерид.

PLO - 1-палмитоил-2-линолеоил-3-олеоилглицерид.

SSS - тристеарин.

SOS -1,3-дистеароил-2-олеоилглицерид.

SOO - 1-стеароил-2,3-диолеоилглицерид.

SLS - 1,3-дистеароил-2-линолеоилглицерид.

ООО - триолеин.

SLO - 1-стеароил-2-линолеоил-3-олеоилглицерид.

SOA - 1-стеароил-2-олеоил-3-арахидоилглицерид.

АОО - 1-арахидоил-2,3-диолеоилглицерид.

Таблица А.2 - Данные прецизионности для образцов чистого масла какао

	Чистое МК(а)			Чистое МК(b)			Чистое МК(c)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий Количество выбросов Количество приемлемых результатов	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 1 12
Среднее значение, г/100 г	20,396	47,731	31,873	19,491	47,421	33,089	18,991	47,210	33,799
Стандартное отклонение повторяемости , г/100 г Относительное стандартное отклонение повторяемости, % Предел повторяемости r[= ,] г/100 г	0,057 0,28 0,160	0,056 0,12 0,157	0,093 0,29 0,261	0,069 0,36 0,194	0,095 0,20 0,265	0,097 0,29 0,271	0,092 0,49 0,258	0,084 0,18 0,236	0,154 0,45 0,430
Стандартное отклонение воспроизводимости , г/100 г Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %	0,142 0,70	0,108 0,23	0,169 0,53	0,081 0,42	0,148 0,31	0,166 0,50	0,120 0,63	0,090 0,19	0,168 0,50
Предел воспроизводимости R [= ], г/100 г	0,397	0,302	0,473	0,227	0,413	0,464	0,337	0,253	0,471
(а) Страна происхождения Гренада. (b) Страна происхождения Гана. (с) Страна происхождения Кот-д'Ивуар.

Таблица А.3 - Данные прецизионности для реальных образцов шоколада

	Шоколад с ЭМК			Шоколад без ЭМК
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий Количество выбросов Количество приемлемых результатов	13 2 11	13 2 11	13 2 11	13 1 12	13 1 12	13 1 12
Среднее значение, г/100 г	25,375	43,757	30,868	19,740	47,401	32,859
Стандартное отклонение повторяемости , г/100 г Относительное стандартное отклонение повторяемости, % Предел повторяемости r[= ], г/100 г	0,128 0,50 0,358	0,101 0,23 0,282	0,180 0,58 0,503	0,089 0,45 0,250	0,070 0,15 0,195	0,074 0,23 0,208
Стандартное отклонение воспроизводимости , г/100 г Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % Предел воспроизводимости R [= ] г/100 г	0,265 1,04 0,741	0,210 0,48 0,588	0,198 0,64 0,553	0,120 0,61 0,335	0,106 0,22 0,298	0,111 0,34 0,310

Таблица А.4 - Данные прецизионности для масла какао с 2% примеси эквивалентов масла какао

	2,06% ЭМК/МК (а)			1,98% ЭМК/МК(b)			2,04% ЭМК/МК(c)			2,09% ЭМК/MК(d)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий Количество выбросов Количество приемлемых результатов	13 0 13	13 0 13	13 0 13	13 1 12	13 1 12	13 1 12	13 2 11	13 2 11	13 2 11	13 1 12	13 1 12	13 1 12
Среднее значение, г/100 г	20,611	47,082	32,307	19,938	46,795	33,267	19,698	46,619	33,682	19,859	46,646	33,495
Стандартное отклонение повторяемости , г/100 г Относительное стандартное отклонение повторяемости, % Предел повторяемости r [= ,], г/100 г	0,184 0,89 0,514	0,095 0,20 0,267	0,222 0,69 0,621	0,050 0,25 0,140	0,070 0,15 0,196	0,082 0,25 0,230	0,093 0,47 0,261	0,063 0,14 0,177	0,137 0,41 0,383	0,029 0,14 0,080	0,083 0,18 0,233	0,077 0,23 0,217
Стандартное отклонение воспроизводимости , г/100 г Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, % Предел воспроизводимости R [= ], г/100 г	0,193 0,94 0,54 0	0,132 0,28 0,368	0,250 0,77 0,701	0,118 0,59 0,331	0,091 0,19 0,254	0,181 0,54 0,506	0,113 0,57 0,317	0,142 0,31 0,399	0,149 0,44 0,417	0,094 0,47 0,262	0,118 0,25 0,330	0,185 0,55 0,517
(а) МК из Гренады смешано с ЭМК вида - средняя фракция масла/(Масляное дерево + Орех бассия) [35/65] (b) МК из Ганы смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/Масляное дерево [50/50]. (с) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла /Сал/Манго [50/25/50]. (d) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла /Масляное дерево/Орех бассия [50/25/25].

Таблица А.5 - Данные прецизионности масла какао с 4 % примеси эквивалентов масла какао

	4,0% ЭМК/МК (а)			3,96% ЭМК/МК(b)			4,04% ЭМК/МК(c)			4,00% ЭМК/МК(d)
	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS	POP	POS	SOS
Количество лабораторий	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13	13
Количество выбросов	0	0	0	1	1	1	1	1	1	1	1	1
Количество приемлемых результатов
	13	13	13	12	12	12	12	12	12	12	12	12
Среднее значение, г/100 г	20,747	46,341	32,912	20,34 8	46,176	33,475	20,421	46,075	33,504	20,765	46,100	33,135
Стандартное отклонение повторяемости , г/100 г	0,141	0,077	0,171	0,075	0,053	0,075	0,115	0,105	0,134	0,109	0,079	0,126
Относительное стандартное отклонение повторяемости, %
	0,68	0,17	0,52	0,37	0,11	0,22	0,56	0,23	0,40	0,53	0,17	0,38
Предел повторяемости r [=,], г/100 г	0,395	0,215	0,478	0,209	0,148	0,209	0,322	0,293	0,377	0,306	0,221	0,354
Стандартное отклонение воспроизводимости , г/100 г
	0,156	0,182	0,279	0,214	0,066	0,213	0,157	0,148	0,196	0,164	0,125	0,226
Относительное стандартное отклонение воспроизводимости, %
	0,75	0,39	0,85	1,05	0,14	0,64	0,77	0,32	0,59	0,79	0,27	0,68
Предел воспроизводимости R [=], г/100 г	0,437	0,510	0,782	0,601	0,183	0,596	0,441	0,414	0,549	0,459	0,351	0,633
(а) МК из Гренады смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/(Масляное дерево + Орех бассия) [35/65]. (b) МК из Ганы смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/Масляное дерево [50/50]. (с) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/Сал/Манго [50/25/25]. (d) МК из Кот-д'Ивуар смешано с ЭМК вида - средняя фракция пальмового масла/Масляное дерево/Орех бассия/[50/25/25].