Приложение 6.7.4.1. Примеры возможных схем исследования

Приложение 6.7.4.1

Примеры возможных схем исследования

Примеры возможных схем исследования описаны и приведены ниже. Эти примеры приведены для иллюстрации того, что схемы исследования животных и различные парадигмы тестирования могут быть осуществлены различными способами.

Пример 1

- Одна группа из 20 детенышей/пол/уровень дозы (т.е. 1 самец и 1 самка в помете) используют для тестирования предотъемного поведенческого онтогенеза. Из этих животных, 10 детенышей/пол/уровень дозы (т.е. 1 самец или 1 самка в помете) гуманно забиты в ПНД 22. Мозг извлекают, взвешивают и обрабатывают для гистопатологической оценки. Кроме того, данные по взвешиванию мозга собирают, используя нефиксированный мозг из оставшихся 10 самцов и 10 самок из каждого уровня дозы.

- Другая группа из 20 животных/пол/уровень дозы (т.е. 1 самец и 1 самка в помете) используют для функционально-поведенческих исследований после отъема (подробные клинические наблюдения, двигательная активность, слуховой испуг и когнитивные функции у подростков) и оценки возраста полового созревания. Из этой группы 10 животных/пол/уровень дозы (т.е. 1 самец или 1 самка в помете) наркотизируют и фиксируют с помощью перфузии для исследования при прекращении тестирования (примерно PND 70). После дополнительной фиксации in situ мозг извлекали и обрабатывали для нейропатологической оценки.

- Для тестирования когнитивных функций у лиц молодого возраста (например, ПНД 60-70) используется третья группа из 20 детенышей/пол/уровень дозы (например, 1 самец и 1 самка из помета). Из этой группы животных 10 детенышей/пол/группа (1 самец или 1 самка из помета) забивают для изучения при прекращении тестирования, мозг извлекают и взвешивают.

- Остальные 20 животных/пол/групп резервируют для возможных дополнительных испытаний.

Таблица 6.7.4.1.1

N детеныша*		Кол-во детенышей для тестирования	Показатель/Тест
самец	самка
1	5	20 с/ц + 20 с/а	Поведенческий онтогенез
		10 с/м + 10 с/а	PND 22 масса мозга/невропатология/морфометрия
		10 с/м + 10 с/а	PND 22 масса мозга
2	6	20 с/ц + 20 с/а	Подробные клинические наблюдения
		20 с/ц + 20 с/а	Двигательная активность
		20 с/ц + 20 с/а	Половое созревание
		20 с/ц + 20 с/а	Моторные и сенсорные функции Обучение и память (ПНД 25)
		20 с/ц + 20 с/а	Юноши: масса мозга /нейропатология/ морфометрия ~ ПНД 70
		10 с/м + 10 с/а
3	7	20 с/ц + 20 с/а	Обучение и память (юноши)
		10 с/м + 10 с/а	Юноши: масса мозга ~ ПНД 70
4	8	-	Резерв животных для замены или дополнительных тестов

______________________________

* Для этого примера - пометы отсеиваются до 4 самцов + 4 самок, детеныши-самцы пронумерованы от 1 до 4, детеныши-самки - с 5 по 8.

Пример 2

- Одну группу из 20 детенышей/пол/уровень доз (т.е. 1 самец и 1 самка из помета) используют для предотъемного тестирования поведенческого онтогенеза. Из этих животных 10 детенышей/пол/уровень доз (1 самец или 1 самка из помета) гуманно забивают в ПНД 11. Мозг извлекают, взвешивают и обрабатывают для гистопатологической оценки.

- Другую группу из 20 детенышей/пол/уровень доз (1 самец и 1 самка из помета) используют для постотъемных тестов (подробные клинические наблюдения, двигательная активность, оценка возраста полового созревания, моторные и сенсорные функции). Из этих животных 10 детенышей/пол/уровень доз (т.е. 1 самец и 1 самка из помета) наркотизируют и фиксируют при перфузии при прекращении исследования (примерно PND 70). После дополнительной фиксации in situ мозг извлекают и обрабатывают для нейропатологической оценки.

- Для тестирования когнитивных функций у подростков и юношей 10 детенышей/ пол/уровень доз используют (например, 1 самец или 1 самка из помета). Разные животные используются для тестирования когнитивной функции в ПНД 23 и у юношей. При прекращении тестирования 10 детенышей/пол/группа, как взрослых особей, забивают, мозг извлекают и взвешивают.

- Остальные 20 детенышей/пол/группа, не отобранных для тестирования, забивают при отъеме и выбрасывают.

Таблица 6.7.4.1.2

N детеныша*		Количество детенышей для тестирования	Показатель/Тест
самец	самка
1	5	20 с/ц + 20 с/а	Поведенческий онтогенез
		10 с/м + 10 с/а	ПНД 11 масса мозга/невропатология/морфометрия
2	6	20 с/ц + 20 с/а	Подробные клинические наблюдения
		20 с/ц + 20 с/а	Двигательная активность
		20 с/ц + 20 с/а	Половое созревание
		20 с/ц + 20 с/а	Моторные и сенсорные функции Юноши: масса мозга
		10 с/м + 10 с/а	/нейропатология/ морфометрия ~ ПНД 70
3	7	10 с/м + 10 с/а	Обучение и память (ПНД 23)
3	7	10 с/м + 10 с/а	Обучение и память (Юноши)
			Юноши: масса мозга
4	8	-	Животные забитые и выброшенные