Приложение 7. Питательные среды для культивирования грибов

Приложение 7

Питательные среды для культивирования грибов

1. Агар Чапека.

1.1. В состав агаризованной среды Чапека входят следующие компоненты:

сахароза - 30,0 г

натрий азотнокислый - 3,0 г

калий фосфорнокислый однозамещенный - 1,0 г

магний сернокислый - 0,5 г

калий хлористый - 0,5 г

железо сернокислое закисное - 0,01 г

вода дистиллированная - 1000 мл

агар-агар - 20-30 г.

1.2. Для приготовления агара Чапека берут 20-30 г агар-агара, заливают его 1000 мл дистиллированной воды и вымачивают 2 часа при комнатной температуре. Воду сливают и измеряют ее объем для определения количества воды, впитавшейся агаром. Затем агар промывают 2-3 раза дистиллированной водой.

Взвешивают остальные компоненты среды и растворяют в дистиллированной воде, которую берут в объеме, равном количеству воды, слитой при вымачивании агара. К раствору добавляют отмытый агар-агар, после чего варят среду в автоклаве текучим паром в течение 1 часа.

Полученную среду фильтруют, разливают по пробиркам или колбам и стерилизуют в автоклаве при температуре 110-112° (под давлением 0,5 по показанию манометра) в течение 20 мин.

2. Сусловый агар.

Неохмеленное пивное сусло (промежуточный продукт в производстве пива), содержащее обычно 12-14% сахаров, фильтруют через тонкий слой ваты или 3-4 слоя марли, разбавляют дистиллированной водой (1:2 или 1:3) до 3-7° по ареометру Баллинга, затем добавляют 2% агар-агара. Разливают по пробиркам или колбам и стерилизуют в автоклаве при температуре 110-112° (0,5 кгс /кв. см по показанию манометра) в течение 20 минут.

3. Мальц-агар.

В состав мальц-агара входят следующие компоненты:

мальц-экстракт - 20,0 г

декстроза - 20,0 г

пептон - 1,0 г

агар-агар - 25,0 г

дистиллированная вода - 1000 мл.

Стерилизуют среду при 110-112° (0,5 по показанию манометра) в течение 20 минут.

4. Среда Ван-Итерсона.

В состав среды Ван-Итерсона входят следующие компоненты:

аммоний азотнокислый - 0,5 г

калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,5 г

вода дистиллированная - 1000 мл.

Среду стерилизуют в автоклаве под давлением 1 в течение 20 мин. Для удобства в дальнейшем использовании среду целесообразно предварительно разлить в пробирки по 6 мл.

5. Сред