Приложение С (справочное). Отбор проб на эндотоксины

Приложение С
(справочное)

Отбор проб на эндотоксины

С.1 Общие положения

Отбор проб сжатого воздуха на эндотоксины является сложным процессом, требующим неиспользованных ранее пластиковых трубок и стеклянных флаконов, а также персонала, обученного методам отбора проб. Наличие эндотоксинов в сжатом воздухе подтверждается после подсчета количества грамм-отрицательных энтеробактерий в конденсате сжатого воздуха и дополнительных измерений содержания бактерий, грибов и дрожжей.

С.2 Методика отбора проб

Примечание - Содержание в сжатом воздухе всего нескольких нанограмм эндотоксинов (продуктов метаболизма граммотрицательных бактерий) может вызвать заболевание.

Испытания следует проводить в стерильных условиях с применением пластины с соответствующей агаровой средой. Точки отбора проб в системе сжатого воздуха выбираются в местах, удобных для сбора конденсата. Для подсчета количества грамм-отрицательных бактерий в конденсате используется следующая методика:

a) непосредственно перед испытанием точки отбора пробы дезинфицируются 70%-ным этиловым спиртом;

b) с флакона с агаровой питательной средой снимается крышка с прикрепленной к ней пластиной;

c) из точки отбора пробы конденсат отбирается в стерильный флакон;

d) прикрепленная к крышке флакона пластина вводится в отобранный конденсат на 10 с. Обе поверхности (пластины и конденсата) должны контактировать;

e) пластина медленно (примерно за 3 с) извлекается из конденсата;

f) содержимое флакона выливается;

g) после инокуляции пластина вновь помещается во флакон. На этой стадии флакон с пластиной может храниться или транспортироваться в течение нескольких часов, что не влияет на результат. Флакон с испытуемой пластиной не допускается замораживать;

h) пластины инкубируются при 27°С в течение 14 сут. При медленном росте микроорганизмов период инкубации продлевается до 1 мес;

i) после инкубации пластина из флакона осторожно удаляется. Рост колоний анализируется и проводятся реакции на изменение цвета по инструкциям производителей.

Приемлемый уровень бактерий, дрожжей и грибов в конденсате, как правило, составляет 10000 КОЕ/мл. При обнаружении одной граммотрицательной бактерии считается, что в сжатом воздухе присутствуют эндотоксины и, следовательно, влажные детали установки следует очистить и продезинфицировать.