Приложение ДА (справочное). Текст международного стандарта ИСО 6341:2012, не вошедший в настоящий стандарт

Приложение ДА
(справочное)

Текст международного стандарта ИСО 6341:2012, не вошедший в настоящий стандарт

В настоящий стандарт не включены:

- термин 3.1 в связи с тем, что он является самоопределяющимся.

"3.1. Контроль партии: Серия повторов, содержащих контрольный раствор";

6.3, второй и третий абзацы, в части применения культивационной среды Элендта М4 и способа ее приготовления, указанных в приложении А, в связи с ограниченной возможностью применения для анализа проб, содержащих металлы.

"Для культуры Daphnia magna Straus в лаборатории можно также использовать Среду М4 (см. приложение А).

Примечание 1 - Среду М4 (приложение А) не следует использовать в качестве воды для разбавления анализируемых проб, содержащих двухвалентные ионы металлов. Вещество ЕДТА, содержащееся в этой среде, может уменьшить их бионакопление, что приведет к уменьшению токсичности. По той же самой причине среду М4 не следует использовать в качестве воды для разбавления анализируемых проб неизвестного состава".

Полный текст приложения А приведен ниже:

" Приготовление среды Элендта М4

А.1 Общие положения

В этом приложении содержатся сведения о приготовлении среды М4 на основе маточных растворов.

А.2 Микроэлементы

Используя вещества и микроэлементы, указанные в таблице А.1 и таблице А.2 и чистую воду (6.2) готовят маточный раствор N 1 и маточный раствор N 2, составы которых приведены в таблице 1 и таблице 2 соответственно.

Таблица А.1 - Состав маточного раствора N 1

Маточный раствор N 1 (отдельные вещества)	Концентрация в чистой воде,	Концентрация по отношению к среде M4	Объем маточного раствора, добавляемого при приготовлении среды,
	57190	20000 раз	1,0
	7210	20000 раз	1,0
LiCI	6120	20000 раз	1,0
RbCI	1420	20000 раз	1,0
	3040	20000 раз	1,0
NaBr	320	20000 раз	1,0
	1260	20000 раз	1,0
	335	20000 раз	1,0
ZnCl	260	20000 раз	1,0
	200	20000 раз	1,0
KI	65	20000 раз	1,0
	43,8	20000 раз	1,0
	11,5	20000 раз	1,0
(а)	5000	2000 раз	-
(b)	1991	2000 раз	-
(а) Растворы и готовят отдельно. (b) Растворяют 5000 мг в чистой воде (6.2) и доводят до 500  чистой водой. Растворяют 1991 мг ·7 в чистой воде (6.2) и доводят до 500  чистой водой. Смешивают эти растворы и сразу автоклавируют. Хранят раствор в темноте.

Таблица А.2 - Состав маточного раствора N 2

Маточные растворы	Концентрация в чистой воде,	Концентрация (по отношению к среде M4)	Объем маточного раствора, добавляемого при приготовлении среды M4,
Маточный раствор N 2 (комбинированные микроэлементы)	-	20 раз	50
	Маточные растворы макроэлементов (отдельные вещества)
	293800	1000 раз	1,0
	246600	2000 раз	0,5
KCI	58000	10000 раз	0,1
	64800	1000 раз	1,0
	50000	5000 раз	0,2
	2740	10000 раз	0,1
	1430	10000 раз	0,1
	1840	10000 раз	0,1
Комбинированный витаминный маточный раствор	-	10000 раз	0,1

Комбинированный витаминный маточный раствор готовят, добавляя витамины к 1 чистой воды (6.2), по таблице А.3.

Таблица А.3. - Состав витаминного маточного раствора

Витамин	Концентрация,	Концентрация по отношению к среде М4
Тиамингидрохлорид	750	10000 раз
Цианокобаламин (B12)	10	10000 раз
Биотин	7,5	10000 раз

Хранят комбинированный витаминный маточный раствор в замороженном виде в небольших количествах. Добавляют к среде непосредственно перед использованием.

А.3 Приготовление среды М4

Для того, чтобы избежать осаждение солей при приготовлении окончательного варианта среды добавляют маточные растворы в небольших количествах к 500 - 800  чистой воды (6.2) и затем доводят объем до 1 ".