Межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.20-2014 "Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Метод определения остаточных количеств пестицидов" (введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 ноября 2014 г. N 1586-ст) (с изменениями и дополнениями)

Межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.20-2014
"Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Метод определения остаточных количеств пестицидов"
(введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 ноября 2014 г. N 1586-ст)

С изменениями и дополнениями от:

10 августа 2017 г.

Feeds, mixed feeds and raw material. Method for determining residual quantities of pesticides

Дата введения - 1 января 2016 г.

Взамен ГОСТ 13496.20-87

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 Разработан Открытым акционерным обществом "Всероссийский научно-исследовательский институт комбикормовой промышленности" (ОАО "ВНИИКП")

2 Внесен Межгосударственным техническим комитетом по стандартизации МТК 4 "Комбикорма, белково-витаминные добавки, премиксы"

3 Принят Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 14 ноября 2014 г. N 72-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Армения	AM	Минэкономики Республики Армения
Киргизия	KG	Кыргызстандарт
Россия	RU	Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 17 ноября 2014 г. N 1586-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 13496.20-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

5 Взамен ГОСТ 13496.20-87

Информация об изменениях:

Изменением N 1, введенным в действие приказом Росстандарта от 10 августа 2017 г. N 858-ст, в раздел 1 внесены изменения, вступающие в силу с 1 марта 2018 г.

См. текст раздела в предыдущей редакции

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на корма, комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения в них остаточных количеств хлорорганических пестицидов изомеров ГХЦГ (-ГХЦГ, -ГХЦГ, -ГХЦГ) и метаболитов ДДТ (ДДТ, ДДД, ДДЕ) с применением тонкослойной хроматографии.

Нижние пределы обнаружения и количественного определения пестицидов составляют 0,01 мг/кг для бета-изомера ГХЦГ и 0,02 мг/кг для альфа-, гамма-изомеров ГХЦГ и метаболитов ДДТ.

Информация об изменениях:

Изменением N 1, введенным в действие приказом Росстандарта от 10 августа 2017 г. N 858-ст, в раздел 2 внесены изменения, вступающие в силу с 1 марта 2018 г.

См. текст раздела в предыдущей редакции

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты*(1)

ГОСТ 12.2.007.0-75 Система стандартов безопасности труда. Изделия электротехнические. Общие требования безопасности

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 334-73 Бумага масштабно-координатная. Технические условия

ГОСТ 892-89 Калька бумажная. Технические условия

ГОСТ 1277-75 Реактивы. Серебро азотнокислое. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 3760-79 Реактивы. Аммиак водный. Технические условия

ГОСТ 3956-76 Силикагель технический. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ ИСО 5725-1-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения*(2)

ГОСТ ИСО 5725-2-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений*(3)

ГОСТ ИСО 5725-6-2003 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике*(4)

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 13496.0-2016 Комбикорма, комбикормовое сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 13586.3-2015 Зерно. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 13979.0-86 Жмыхи, шроты и горчичный порошок. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 17681-82 Мука животного происхождения. Методы испытаний

ГОСТ 19908-90 Тигли, чаши, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечники из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия

ГОСТ 20363-88 Бумага чертежная прозрачная. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27668-88 Мука и отруби. Приемка и методы отбора проб

ГОСТ 28311-89 Дозаторы медицинские лабораторные. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ ISO 6497-2014 Корма. Отбор проб

ГОСТ ISO 6498-2014 Корма, комбикорма. Подготовка проб для испытаний

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов по указателю "Национальные стандарты", составленному по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом, следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Сущность метода

Сущность метода заключается в экстракции пестицидов из анализируемой пробы ацетоном, очистке экстракта на хроматографической колонке с силикагелем, дополнительной очистке концентрированной серной кислотой и хроматографировании на пластинках для тонкослойной хроматографии с использованием гексана в качестве подвижной фазы.

4 Требования техники безопасности

4.1 При выполнении испытаний необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроприборами по ГОСТ 12.1.019 и ГОСТ 12.2.007.0, а также требования, изложенные в технической документации на используемые приборы.

4.2 Работа с химическими реактивами должна проводиться в вытяжном шкафу.

4.3 Помещение должно быть оснащено вентиляционными системами по ГОСТ 12.4.021, соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

4.4 Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005.

5 Условия проведения испытаний

При подготовке и проведении испытаний должны быть соблюдены следующие условия:

     - температура окружающей среды .........................от 15 °С до 25 °С;

     - относительная влажность воздуха, не более ............80%;

     - атмосферное давление .................................(9710) кПа;

6 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы и реактивы

6.1 Средства измерений

6.1.1 Весы неавтоматического действия с пределами допускаемой абсолютной погрешности 0,0001 г и 0,01 г по ГОСТ OIML R 76-1 или нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

6.1.2. Цилиндры мерные 1(2, 2а, 3, 4) - 50(100) -2 по ГОСТ 1770.

6.1.3 Колбы мерные 2-25(50, 100) -1 по ГОСТ 1770.

6.1.4 Пробирки мерные П-2-10-0,1 ХС по ГОСТ 1770.

6.1.5 Пипетки радуированные# 1(2) -1(1 а, 2, 2а) -1-1(10) по ГОСТ 29227.

6.1.6 Дозаторы пипеточные одноканальные переменного объема 10 - 100 , 100 - 1000  по ГОСТ 28311.

Примечания

1 Средства измерений должны быть поверены в установленные сроки.

2 Допускается использование других средств измерений, имеющих аналогичные или лучшие метрологические характеристики.

6.2 Вспомогательное оборудование, посуда и материалы

6.2.1 Аппарат для встряхивания.

6.2.2 Мельница лабораторная.

6.2.3 Шкаф сушильный лабораторный с регулируемой температурой.

6.2.4 Баня водяная лабораторная с регулируемой температурой.

6.2.5 Камера для хроматографирования.

6.2.6 Испаритель вакуумный ротационный.

6.2.7 Прибор для УФ-облучения.

6.2.8 Пластинки хроматографические, размером 150 x 150 мм или стеклянные (см. приложение А).

6.2.9 Пипетки Пастера или микрошприцы.

6.2.10 Воронки стеклянные В-56(100) ХС по ГОСТ 25336.

6.2.11 Воронки делительные ВД-1 (2, 3) -250 ХС по ГОСТ 25336.

6.2.12 Колбы конические Кн-1-250-29/32(34/35) -ТХС по ГОСТ 25336.

6.2.13 Колонки хроматографические стеклянные (см. рисунок 1).

6.2.14 Пульверизатор стеклянный (см. рисунки 2, 3).

Рисунок 1

Рисунок 2

Рисунок 3

6.2.15 Силикагель технический АСКГ по ГОСТ 3956.

6.2.16 Кварцевые чаши 50(100) по ГОСТ 19908 или выпарительные чашки 2 по ГОСТ 9147.

6.2.17 Сита с размером стороны квадратной ячейки 1,00 и 0,15 мм,

6.2.18 Штатив лабораторный ШЛ.

6.2.19 Палочки стеклянные с оплавленными концами.

6.2.20 Бумага масштабно-координатная по ГОСТ 334;

6.2.21 Бумага универсальная индикаторная.

6.2.22 Фильтры обеззоленные по ГОСТ 12026.

6.2.23 Калька бумажная натуральная по ГОСТ 892 или бумага чертежная прозрачная по ГОСТ 20363.

6.2.24 Вата гигроскопическая.

6.2.25 Груша резиновая.

Примечание - Допускается использование вспомогательного оборудования с аналогичными техническими характеристиками и материалов по качеству не ниже указанных.

6.3 Реактивы

6.3.1 Ацетон по ГОСТ 2603, ч.д.а.

6.3.2 Гексан, ч.

6.3.3 Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч.

6.3.4 Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.

6.3.5 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

6.3.6 Аммиак водный по ГОСТ 3760, ч.д.а.

6.3.7 Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, х.ч.

6.3.8 Межгосударственные стандартные образцы пестицидов:

- ДДТ (-Дихлордифенилтрихлорэтан),

- ДДД (-Дихлордифенилдихлорэтан),

- ДДЕ (-Дихлордифенилтрихлорэтилен),

- -ГХЦГ (-изомер гексахлорциклогексана),

- - ГХЦГ (-изомер гексахлорциклогексана),

- -ГХЦГ (-изомер гексахлорциклогексана).

Примечание - Допускается использование реактивов по качеству не хуже указанных, в том числе импортных.

Информация об изменениях:

Изменением N 1, введенным в действие приказом Росстандарта от 10 августа 2017 г. N 858-ст, в раздел 7 внесены изменения, вступающие в силу с 1 марта 2018 г.

См. текст раздела в предыдущей редакции

7 Отбор проб

Отбор проб - по ГОСТ 13496.0, ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0, ГОСТ 17681, ГОСТ 27668, ГОСТ ISO 6497.

Информация об изменениях:

Изменением N 1, введенным в действие приказом Росстандарта от 10 августа 2017 г. N 858-ст, в раздел 8 внесены изменения, вступающие в силу с 1 марта 2018 г.

См. текст раздела в предыдущей редакции

8 Подготовка проб

Подготовка проб к испытанию - по ГОСТ ISO 6498.

9 Подготовка к проведению испытаний

9.1 Приготовление основных стандартных растворов пестицидов массовой концентрации 200 

В мерную колбу вместимостью 50  (см. 6.1.3) помещают 0,01 г межгосударственного стандартного образца пестицида (см. 6.3.8), взвешенного на весах (см. 6.1.1) с погрешностью 0,0001 г, добавляют гексан (см. 6.3.2), перемешивают и гексаном доводят объем раствора до метки.

Срок хранения растворов в плотно закрытой стеклянной емкости при температуре от 4°С до 6°С - не более одного года.

9.2 Приготовление рабочих стандартных растворов пестицидов массовой концентрации 20 

В мерную пробирку вместимостью 10  (см. 6.1.4) помещают дозатором (см. 6.1.6) или пипеткой (см. 6.1.5) 1  основного стандартного раствора пестицида (см. 9.1) и гексаном (см. 6.3.2) доводят объем раствора до метки.

В 0,1  приготовленного раствора содержится 2 мкг пестицида.

Срок хранения растворов при температуре от 4°С до 6°С - не более 2 мес.

9.3 Приготовление проявляющего реактива

В мерную колбу вместимостью 100  (см. 6.1.3) помещают 0,5 г азотнокислого серебра (см. 6.3.7), добавляют 5  дистиллированной воды (см. 6.3.5), перемешивают, добавляют 7  аммиака (см. 6.3.6) и ацетоном (см. 6.3.1) доводят объем раствора до метки.

Срок хранения проявляющего реактива в темном месте - не более 3 сут.

На одну хроматографическую пластинку расходуется 8 - 10  проявляющего реактива.

9.4 Подготовка пластинок для хроматографии

Пластинки для хроматографии (см. 6.2.8) перед употреблением промывают дистиллированной водой (см. 6.3.5). Для этого в камеру для хроматографирования (см. 6.2.5) наливают дистиллированную воду на высоту 5 - 7 мм и помещают в нее пластинку в вертикальном положении. После того как линия фронта подвижного растворителя, в данном случае воды, поднимется на высоту 10 мм от верхнего края пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе.

Перед использованием пластинку активируют в сушильном шкафу (см. 6.2.3) при температуре 65°С в течение 4 - 5 мин, а затем с вертикальных сторон отрезают полосы шириной 3 мм, что способствует выравниванию фронта растворителя и улучшает разделение веществ.

9.5 Очистка силикагеля АСКГ

В стеклянную емкость насыпают силикагель (см. 6.2.15), заливают его гексаном (см. 6.3.2) и перемешивают стеклянной палочкой (см. 6.2.19), гексан сливают. Промывку повторяют два - три раза. Промытый силикагель сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Хранят в плотно закрытой стеклянной емкости.

9.6 Очистка ваты

В стеклянную емкость помещают вату (см. 6.2.24), заливают ее гексаном (см. 6.3.2), выдерживают 5 - 10 мин, гексан сливают. Операцию повторяют два - три раза. Очищенную вату помещают в стеклянную воронку (см. 6.2.10) и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Хранят в закрытой стеклянной емкости.

9.7 Подготовка хроматографической колонки

В нижнюю часть хроматографической колонки (см. 6.2.13) помещают кусочек очищенной по 9.6 ваты, насыпают промытый по 9.5 силикагель АСКГ на высоту 70 мм (100 мм - для комбикормов, содержащих травяную муку), уплотняют постукиванием по колонке деревянной палочкой, затем насыпают безводный сернокислый натрий (см. 6.3.4) слоем в 10 мм.

Через колонку пропускают 20  гексана (см. 6.3.2) и удаляют гексан, продувая колонку с помощью резиновой груши.

10 Проведение испытаний

10.1 Экстракция

20,00 г анализируемой пробы, взвешенной с погрешностью 0,01 г, помещают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250  (см. 6.2.12), заливают 50  ацетона (см. 6.3.1) и перемешивают на аппарате для встряхивания (см. 6.2.1) в течение 1 ч.

Экстракт фильтруют через воронку (см. 6.2.10) с бумажным фильтром (см. 6.2.22) в колбу для отгонки ротационного испарителя (см. 6.2.6) или выпарительную чашку (см. 6.2.16). Затем повторяют экстракцию пробы таким же количеством ацетона и фильтруют экстракт. Экстракты объединяют. Фильтр промывают двумя порциями ацетона по 5 - 10 .

Допускается экстракцию проводить следующим способом: залитую ацетоном анализируемую пробу оставляют на 12 - 15 ч (как правило, на ночь) и экстрагируют, встряхивая на аппарате в течение 1 ч.

Ацетон из объединенного экстракта испаряют на вакуумном ротационном испарителе (см. 6.2.6). Допускается испарять ацетон под тягой в вытяжном шкафу при комнатной температуре или, для ускорения испарения, на водяной бане (см. 6.2.4) при температуре не выше 50°С.

Маслянистый остаток растворяют в 5  гексана и количественно переносят содержимое в хроматографическую колонку, подготовленную по 9.7, омывая чашку еще тремя порциями гексана по 3 - 5 . Колонку продувают с помощью резиновой груши, прошедший через колонку гексан отбрасывают.

Затем пестициды извлекают (элюируют), пропуская 100  гексана через колонку порциями по 10 - 20 . Элюат концентрируют до объема нескольких капель на вакуумном ротационном испарителе или под тягой вытяжного шкафа.

10.2 Очистка экстракта

Если концентрированный элюат маслянистый или темный, то его очищают концентрированной серной кислотой. Для этого его количественно переносят в делительную воронку (см. 6.2.11), омывая колбу (чашку) двумя - тремя порциями гексана по 2 - 3 , добавляют концентрированную серную кислоту (см. 6.3.3) порциями по 20 , кажды