Приложение 4. Определение содержания аминного азота

Приложение 4

Определение содержания аминного азота

Определение содержания аминного азота в питательных средах проводят методом формольного титрования. Принцип метода основан на блокировании формальдегидом при pH 7,0 свободных аминогрупп и титровании щелочью эквивалентного количества карбоксильных групп. Начало и конец титрования определяют потенциометрически.

Реактивы: 1) натрия гидроксид (0,1 моль/л) или раствор соляной кислоты (0,1 моль/л);

2) натрия гидроксид 10%-й раствор;

3) раствор формалина (40%-й раствор формальдегида) (ГОСТ 1625-75), перед каждым определением pH формалина доводят до pH 7,0 10%-м раствором натрия гидроксида.

Ход определения

В стакан вместимостью 50 мл наливают необходимый объем (А) (подготовка проб см. примечания 1 и 2) анализируемого раствора препарата, содержащего 1,5-5,0 мг аминного азота, и доводят общий объем дистиллированной водой до 20 мл. Электроды потенциометра погружают в исследуемый раствор, pH которого доводят до значения 7,0 с помощью раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л) или раствора соляной кислоты (0,1 моль/л). В ходе определения электроды должны все время оставаться погруженными в раствор. К нейтрализованному раствору добавляют 2 мл нейтрального формалина, перемешивают и, не вынимая электроды, титруют содержимое раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до pH 9,1. При титровании следует использовать бюретку вместимостью 5 мл. Проводят два параллельных измерения. Содержание аминного азота в исследуемом препарате в процентах (X) вычисляют по следующим формулам.

1) Для сухого образца: X = V x K x 1,4 x 100 / C, где:

V - количество раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л) в миллилитрах, пошедшее на титрование испытуемой пробы от pH 7,0 до 9,1;

K - поправка к титру раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л);

1,4 - количество аминного азота в миллиграммах, эквивалентное 1,0 мл раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л);

С - анализируемая навеска сухого препарата в миллиграммах, содержащаяся в титруемом объеме "А";

100 - коэффициент пересчета миллиграммов в проценты.

2) Для жидкого образца: X = V x K x 1,4 x 100 / A x 1 000, где:

А - количество жидкого образца (мл), взятого на анализ;

100 - коэффициент пересчета миллиграммов в проценты;

1 000 - коэффициент пересчета миллиграммов в граммы.

Примечание 1.

Для сухих образцов (гидролизаты, экстракты, среды (1,5-4,0% аминного азота) - "А" = 10 мл 1%-го раствора (анализируемая навеска образца "С" составляет соответственно 100 мг).

Примечание 2.

Для жидких гидролизатов низкой степени расщепления (0,1-0,2% аминного азота) "А" = 3 мл; для жидких гидролизатов средней степени расщепления (0,3-0,6% аминного азота) "А" = 1 мл; для жидких гидролизатов высокой степени расщепления (0,7-1,3% аминного азота) "А" = 0,5 мл; для жидких питательных сред (0,08-0,14% аминного азота) "А" = 10 мл; для готовых плотных агаровых сред "А" = 3 мл препарата, расплавленного в кипящей водяной бане.