Приложение 6. Приготовление сред и реактивов для биохимической идентификации бордетелл

Приложение 6

Приготовление сред и реактивов для биохимической идентификации бордетелл

1. Питательный агар с тирозином

К 100 мл дистиллированной воды добавляют 3,5 г сухого питательного агара и 0,1 г тирозина, расплавляют над пламенем горелки, разливают по пробиркам и стерилизуют при 0,5 атм 20-30 мин.

2. Бульон Хоттингера с мочевиной

К 100 мл бульона Хоттингера pH = 7,0 добавляют 1 г мочевины и 0,2 мл 1,6%-го спиртового раствора крезолового красного, стерилизуют текучим паром при 100°С в течение 15 мин. Посев производят в 1 мл среды петлей, выдерживают 24 ч при 35-37°C.

3. Приготовление реактивов для определения уреазы (по методу Заксе)

Готовят 2 реактива. Реактив А: 2 г мочевины, 2 мл 96°-го этилового спирта, 4 мл дистиллированной воды. Реактив Б: 1 мл 0,2%-го спиртового раствора фенол-рота, 0,1 г , 0,1 г , 100 мл дистиллированной воды, 0,5 г хлористого натра. Реактив А не стерилизуют и хранят при температуре 4-10°С, реактив Б стерилизуют в автоклаве текучим паром. Перед употреблением смешивают 1 часть реактива А и 19 частей реактива Б.