Приложение А (рекомендуемое). Экспериментальные условия оценки метаморфоза земноводных в течение 21 сут

Приложение А
(рекомендуемое)

Экспериментальные условия
оценки метаморфоза земноводных в течение 21 сут

Таблица А.1 - Экспериментальные условия оценки метаморфоза земноводных в течение 21 сут

Тестовые организмы		Личинки Xenopus Laevis
Начальная личиночная стадия		Nieuwkoop и Faber стадия 51
Период воздействия		21-е сут
Критерии отбора личинок		Стадия развития и общая длина (необязательно)
Испытуемые концентрации		Минимум три концентрации, охватывающие примерно один порядок величины
Режим воздействия		Проточный (предпочтительно) и/или статистического восстановления
Скорость потока в испытуемой системе		25 мл/мин (полностью замененный объем приблизительно каждые 2,7 ч)
Основные конечные точки/сутки определения		Гибель	Ежедневно
		Стадия развития	7 и 21 сут
		Длина задних конечностей	7 и 21 сут
		Длина от кончика морды до клоаки	7 и 21 сут
		Сырая масса тела	7 и 21 сут
		Гистология щитовидной железы	21 сут
Разведенная вода/лабораторный контроль		Дехлорированная водопроводная вода (активированным углем) или эквивалентный лабораторный источник
Плотность личинок		20 личинок/испытуемый сосуд (5 л)
Испытуемый раствор/испытуемый сосуд		4 - 10 л (воды минимум 10 - 15 см)/испытуемый сосуд из стекла или нержавеющей стали (например, 22,5 х 14 х 16,5 см)
Повторности		4 повторности испытуемых сосудов/испытуемые концентрации и контроль
Допустимый уровень гибели в контролях		10% в повторности испытательного сосуда
Фиксация образцов щитовидной железы	Фиксируемое количество	Все головастики (первоначально оцениваются 5 головастиков на повторность)
	Область	Голова или все тело
	Фиксирующая жидкость	Фиксатор Дэвидсона
Кормление	Питание	Сыворотка Микрон или эквивалентный продукт
	Количество/периодичность	Смотри таблицу 1 по режиму кормления с использованием Сыворотки Микрон
Освещение	Световый день	12 ч света; 12 ч темноты
	Интенсивность	От 600 до 2000 люкс (измеряется на поверхности воды)
Температура воды		(221)°С
РН		6,5 - 8,5
Концентрация растворенного кислорода (DO)		Более 3,5 мг/л (более 40% насыщенного воздуха)
Примерное расписание аналитической химии		Один раз/неделя (4 примерных события/испытание)