5 Метод С. Жидкость - жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной Florisil

5 Метод С. Жидкость - жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной Florisil

5.1 Сущность метода

(См. ссылку [6]).

Хлорорганические соединения вместе с жиром экстрагируют из пробы по методике, описанной в 5.4.1. Экстракт выпаривают почти досуха, затем растворяют в петролейном эфире. Хлорорганические соединения затем выделяют, используя диметилформамид. После добавления раствора сульфата натрия хлорорганические соединения далее разделяют петролейным эфиром.

Органическую фазу очищают, используя хроматографию на колонке, заполненной Florisil, применяя петролейный эфир/диэтиловый эфир в качестве элюирующего растворителя. Элюат выпаривают и анализируют, используя газожидкостную хроматографию.

5.2 Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

5.2.1 Петролейный эфир с температурой кипения 30 - 40°С, подвергнутый повторной перегонке.

5.2.2 Диэтиловый эфир (), не содержит пероксидов.

5.2.3 Петролейный эфир с температурой кипения 60 - 0°С, подвергнутый повторной перегонке.

5.2.4 Элюирующий растворитель: смесь диэтилового эфира (5.2.2) и петролейного эфира (5.2.1) (6 : 94 по объему).

5.2.5 Адсорбент: Florisil, от 60 до 100 меш.

Адсорбент нагревают в муфельной печи при температуре 650°С в течение 2 ч. Охлаждают до температуры 130°С и выдерживают при этой температуре в течение 5 ч в сушильном шкафу. Дают остыть до комнатной температуры в эксикаторе, затем переносят в плотно закупоренный сосуд с широким горлом. Добавляют 5 частей дистиллированной воды к 95 частям адсорбента (по объему) и встряхивают, пока не исчезнут комочки. Дают отстояться в течение 24 ч и перед использованием встряхивают.

5.2.6 Сульфат натрия () гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре (50025)°С в течение 4 ч. Охлаждают и хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой.

5.2.7 Диметилформамид (ДМФА), насыщенный петролейным эфиром. Перегоняют ДМФА и отбирают фракцию с температурой кипения 15 - 154°С. Насыщают его петролейным эфиром (5.2.1).

5.2.8 Петролейный эфир, насыщенный диметилформамидом.

5.2.9 Раствор сульфата натрия, 2-процентный раствор.

5.2.10 н-гексан [].

5.3 Оборудование

Применяют обычное лабораторное оборудование.

5.3.1 Высокоскоростной смеситель.

5.3.2 Роторный испаритель (Kuderna-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500  и прикрепленной градуированной пробиркой.

5.3.3 Хроматографические колонки внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм с запорными кранами из политетрафторэтилена (ПТФЭ) и пластинами из пористого стекла.

5.4 Методика

5.4.1 Экстракция жира и хлорорганических соединений

Для общих методов см. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

5.4.2 Экстракция жира и пестицидов с применением ДМФА

Пробу экстракта, содержащего от 2 до 5 г жира, растворяют в 25  петролейного эфира, насыщенного ДМФА (5.2.8). Переливают в делительную воронку вместимостью 250 . Экстрагируют небольшими порциями измеренного объема (например, 75 ) ДМФА, насыщенного петролейным эфиром (5.2.7), который добавлен в делительную воронку. Каждый раз энергично встряхивают в течение 1 - 2 мин. и сливают ДМФА-фазу в делительную воронку вместимостью 500 . Перемешивают соединенные фазы с 200  раствора сульфата натрия (5.2.9) и каждый раз встряхивают в течение 1 - 2 мин. с одной порцией в 40  и тремя порциями по 25  петролейного эфира (5.2.3). Фазы петролейного эфира собирают и промывают приблизительно 10  воды. Обезвоживают над сульфатом натрия (5.2.6) и пропускают через фильтр из ваты. Добавляют через ватный тампон около 5  н-гексана (5.2.10) и уменьшают объем примерно до 5  в роторном испарителе (5.3.2).

5.4.3 Очистка на Florisil с петролейным эфиром

Хроматографическую колонку (5.3.3) до половины наполняют петролейным эфиром (5.2.3). Добавляют 20 г дезактивированного адсорбента (5.2.5) маленькими дозами через воронку, держа при этом запорный кран из политетрафторэтилена (ПТФЭ) частично открытым, и осторожно постукивают колонку. Используют только колонки без видимых вкраплений воздуха. Покрывают слоем 20 мм безводного сульфата натрия (5.2.6) и дают петролейному эфиру впитаться.

Экстракт пробы наносят на колонку с несколькими кубическими сантиметрами элюирующего растворителя (5.2.4). Дают ему просочиться в колонку через открытый кран до тех пор, пока мениск не достигнет слоя сульфата натрия (5.2.6).

Ополаскивают первоначальную емкость несколькими кубическими сантиметрами элюирующего растворителя (5.2.4) и продолжают, как описано выше. Элюируют колонку 200  элюирующего растворителя в колбу с круглым дном вместимостью 500  при скорости потока, не превышающей 5 . Выпаривают элюат в роторном испарителе (5.3.2) до 5 . Перемещают выпаренный экстракт в градуированную пробирку с диэтиловым эфиром (5.2.2) и разбавляют до определенного объема 10 - 20  диэтиловым эфиром.

5.5 Газовая хроматография

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Для предварительных испытаний см. ISO 3890-1/IDF 75-1 (разделы 10 - 14).