Наставление по диагностике паратуберкулезного энтерита крупного рогатого скота (утв. лечебно-эпизоотическим отделом Главветупра Наркомзема СССР 22 октября 1939 г.) (прекратило действие)

Наставление по диагностике паратуберкулезного энтерита крупного рогатого скота
(утв. лечебно-эпизоотическим отделом Главветупра Наркомзема СССР 22 октября 1939 г.)

ГАРАНТ:

Настоящее Наставление фактически прекратило действие

См. Наставление по диагностике паратуберкулезного энтерита (паратуберкулеза) крупного рогатого скота, утвержденное Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 18 августа 1975 г.

I. Лабораторная диагностика

Для прижизненной бактериоскопической диагностики паратуберкулезного энтерита собирают кал от больных животных и из него извлекают обрывки слизистой оболочки, кусочки с кровью или комочки слизи. Кал пересылают в лабораторию в пробирках или банках, закрытых корковыми, резиновыми или притертыми пробками.

С той же целью у подозрительных, поносящих животных производят соскобы слизистой оболочки прямой кишки при помощи ложки Фолькмана или других инструментов. При исследовании соскоба паратуберкулезные микробы обнаруживаются в тех случаях, когда пораженными бывают конечный отрезок ободочной кишки или прямая кишка.

Материал пересылают в лабораторию либо в пробирках, либо в виде мазков, фиксированных нагреванием на предметных стеклах.

Для посмертной бактериологической диагностики от павшего или убитого паратуберкулезного животного направляют в лабораторию куски пораженного кишечника и увеличенные брыжеечные лимфатические узлы, консервированные в 30%-ной стерилизованной глицериновой воде. Другую часть того же материала для бактериоскопического и гистологического исследований направляют в законсервированном виде (в 5%-ном формалине). При наличии в материале нетипичных для паратуберкулезного энтерита кислотоупорных микробов сапрофитического характера прибегают к дифференциальной обработке материала при помощи антиформина. Последний применяют только в свежем, неразложившемся виде, предварительно проверенный. Он растворяет кислотоупорные сапрофиты и не действует в течение указанного далее времени на кислотоупорных паразитов.

Материал обрабатывают следующим способом: 2 г кала или измельченной стенки кишечника заливают 30 50%-ного антиформина; смесь тщательно встряхивают до получения гомогенной взвеси, выдерживают в течение 18 часов при температуре 25°, время от времени встряхивают и затем центрифугируют. Осадок после удаления антиформина отмывают дистиллированной водой. Из отмытого осадка изготовляют мазки и окрашивают по Циль-Нельсену.

Для скрепления материала предметное стекло смазывают каким-либо белком, Этот способ обработки одновременно является и способом накопления паратуберкулезных микробов в материале.

Другой способ обработки материала, описываемый ниже, применяют только для накопления кислотоупорных микробов. Небольшое количество кала (2-4 г) тщательно растирают в стерильной ступке и к нему, смотря по консистенции, прибавляют большее или меньшее количество 25%-ного раствора поваренной соли, чтобы получилась жиденькая эмульсия, которую процеживают через грубое полотно. 4-5 этой эмульсии набирают в центрифужную пробирку, прибавляют сюда 2 петролейного эфира (бензина или лигроина) и в течение 15-25 минут центрифугируют при 4000-5000 об/мин. Под нижней частью верхнего слоя, который отсасывают пипеткой, берут материал для мазков. Окраску производят по Циль-Нельсену.

Для выяснения сапрофитического характера находимых в материале кислотоупорных микробов (после обработки этого материала серной кислотой по Гону) производят высевы из обработанного материала на яичные, сывороточные и обычные питательные среды. Кислотоупорные сапрофиты дают рост культур на 3, 5, 10-й день. Это не исключает одновременного наличия в материале и паратуберкулезных микробов, но облегчает диагноз.

Мазки для микроскопии (из различных материалов) приготовляют в количестве не менее 10. В случае незначительного содержания паратуберкулезных микробов в материале в препаратах просматривают до 5000 полей зрения. Положительные результаты прижизненной бактериоскопии решают вопрос о наличии паратуберкулезного энтерита, отрицательные же не имеют диагностического значения.

Гистологические срезы для исследования на паратуберкулезный энтерит окрашивают по Циль-Нельсену, обесцвечивают кислотой и дополнительно окрашивают гематоксилином.

II. Аллергическая диагностика

Для обнаружения аллергических реакций у паратуберкулезного скота применяют двойную внутрикожную или подкожную пробу птичьим туберкулином.

К аллергической диагностике паратуберкулезного энтерита прибегают только в тех хозяйствах, где точно установлены случаи болезни при помощи клинико-бактериоскопической или патологоанатомической и бактериоскопической или гистологической диагностики, а также в соседних хозяйствах и фермах, если не исключается возможность соприкосновения их скота с больным скотом на пастбище, через предметы ухода и иными способами, при посредстве которых допустим перенос инфекции.

Прежде чем приступить к применению паратуберкулезного аллергена, необходимо предварительно удалить из стада на убой всех клинически больных животных, затем оставшийся скот исследовать на туберкулез при помощи двукратной глазной или двойной внутрикожной туберкулинизации бычьим туберкулином. Животных с положительной туберкулиновой реакцией и без клинических признаков паратуберкулезного энтерита выделяют в туберкулиновое хозяйство (ферму). После этого скот неблагополучного хозяйства исследуют на паратуберкулезный энтерит. Допускается одновременное исследование на туберкулез и паратуберкулезный энтерит, причем в случае применения для этой цели внутрикожных проб последние производят по обе стороны шеи. Точно также при разновременном применении внутрикожных проб их применяют на противоположных сторонах шеи. Животных, одновременно реагирующих на бычий туберкулин и на птичий туберкулин, по возможности убивают на мясо или изолируют в паратуберкулезном пункте.

Для проведения массовых аллергических проб необходимо иметь значительный запас шприцев и игл к ним, которые во время работы следует держать в подготовленном виде, прокипяченными и защищенными от загрязнения (в стерилизаторе). После введения аллергена животному игла (не снимается со шприца) тотчас завертывается в чистую ватку, обильно смоченную в ректификованном спирте, и в таком виде (со шприцем) переносится к другому животному и т.д. По израсходовании препарата в шприце и перед набором в шприц новой порции препарата иглу надо сменить; бывшую в употреблении иглу надо простерилизовать.

Техника двойного внутрикожного применения птичьего туберкулина

По середине шеи хорошо выстригают ножницами полосу шерсти в 15-20 см длиной и в 10 см шириной. Захватив пальцами левой руки бесшерстную складку кожи, правой рукой при помощи технического (или специального) штангенциркуля измеряют нормальную толщину складки и эту величину, в миллиметрах, записывают (в заранее составленной ведомости) против каждого животного. Обычно нормальная толщина кожной складки равна у коров 5-7-9 мм, у быков - 10-15 мм и выше. После измерения складки кожу основательно очищают (отмывают) от грязи и дезинфицируют растворами карболовой кислоты или лизоформа или денатурированным спиртом. В центре бесшерстной полосы в толщу кожи вводят неразведенный (в том виде, как он получен с биофабрики) птичий туберкулин в следующих дозах: телятам до 3 месяцев - 0,1 , от 6 до 12 месяцев - 0,15 , от 1 до 2 лет - 0,2 , от 2 до 3 лет - 0,3 , свыше 3 лет - 0,4-0,5 , в зависимости от состояния животного. Если после введения препарата под пальцами не ощущается образования маленького, величиной с горошину, пузырька, то это означает, что аллерген введен неправильно, под кожу. В таком случае следует инъекцию повторить. Для инъекции пользуются 1-2-граммовым шприцем Рекорд-Праваца с бегунком и тонкими короткими иглами (N 28-32).

Через 48 часов после введения аллергена учитывают результаты первой пробы: исследуют характер кожной реакции и измеряют штангенциркулем толщину кожной складки, причем утолщенное место складки должно быть на изгибе (на гребне). Результаты измерения записывают в ведомость против каждого животного.

Животных, у которых обнаруживают положительную реакцию, дальнейшему испытанию не подвергают. Всему остальному скоту вводят аллерген вторично в то же самое место и в той же дозе. Перед инъекцией кожу дезинфицируют. На этот раз реакцию учитывают через 24 часа после введения аллергена. Следовательно, в общей сложности на проведение внутрикожной аллергической диагностики требуется 72 часа.

Первая инъекция аллергена является подготовляющей (сенсибилизирующей), вторая - диагностической.

Оценка аллергических реакций

За положительную реакцию признают появление на месте инъекции птичьего туберкулина разлитого отека без строгой контурации и границ, размерами (приблизительно) 35X45 - 100X120 мм и больше, напряженного в центре и тестоватой консистенции к краям, горячего на ощупь и болезненного при дотрагивании рукой.

Наличие характерного воспалительного отека является основным критерием для признания положительной реакции. Толщина складки кожи играет второстепенную роль в диагностике. Превышение нормальной толщины складки при измерении ее кутиметром, примерно, на 7 мм и больше подтверждает заключение.

За сомнительную реакцию признают отеки с недостаточно характерно выраженными воспалительными признаками и при утолщении кожной складки, примерно, от 5 до 7 мм сверх нормы. Различной величины неспецифические, отграниченные, безболезненные затвердения, если даже толщина складки превышает норму на 5-7 мм, за типичные аллергические реакции не признают.

Реакции, появившиеся ранее 48 часов после инъекции туберкулина, не учитывают.

Если при окончательной оценке встречаются с сомнительными и неопределенными реакциями, то через 5-10 дней животных, обнаруживших такие реакции, повторно испытывают туберкулиновыми пробами на другом участке кожи или на другой стороне шеи.

При вторичном получении неопределенных реакций немедленно применяется подкожная проба, по результатам которой делается окончательное заключение о наличии или отсутствии паратуберкулеза у данного животного.

Примечания. 1. Двойная внутрикожная проба не препятствует применению подкожной пробы до нее и после нее.

2. Телят можно испытывать внутрикожной пробой, начиная с месячного возраста.

Техника подкожного применения птичьего туберкулина

На все время работы со скотом для последнего должны быть созданы условия полного покоя.

Животных обязательно привязывают к кормушкам во дворах или в базах, в определенном порядке, не нарушаемом в течение всего срока обследования. В жаркие дни рекомендуется ставить скот под навесы на привязь или в хорошо вентилируемые помещения, а также обеспечивать его свежими сочными кормами.

В случае отдаленного расположения мест для водопоя скот поят из ведер водой, подвозимой в достаточном количестве в бочках.

Для измерения температуры тела животных применяют выверенные перед работой термометры, которые должны быть закреплены (бирка) за определенными животными.

Перед испытанием птичьим туберкулином у животных устанавливают среднюю суточную температуру путем троекратного измерения ее, в 6, 12 и 18 часов, но обязательно до водопоя и не ранее чем через 2 часа после водопоя. В этот день водопой скота надо производить в обычные, установленные часы.

Животные с нормальной температурой допускаются к подкожной туберкулинизации. При этом порядок расстановки скота ни в коем случае не нарушается, и выпуск скота из помещений на прогулку или на пастбище не разрешается впредь до полного окончания обследования всех животных проверяемого гурта.

Птичий туберкулин для диагностики паратуберкулезного энтерита применяют в виде 20%-ного раствора его в 0,5%-ной карболовой воде (20 туберкулина плюс 80 0,6%-ной карболовой воды). Приготовленный раствор фильтруют через бумажный фильтр и стерилизуют в колбе или флаконе путем кипячения в коховском аппарате или на водяной бане в течение 1 часа или в автоклаве при температуре 110° в продолжение 20 минут. Дозы: для взрослых животных 10 , для молодняка в возрасте до 2 лет 6-8 . Туберкулин вводят подкожно на шее.

Непосредственно после туберкулинизации скот следует напоить и в дальнейшем, до окончания работы по измерению температуры, на водопой не допускать во избежание случайных колебаний температуры.

Через 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18 и 20 часов после введения птичьего туберкулина у скота регулярно и точно измеряют температуру одними и теми же прикрепленными к каждому животному термометрами. Последние всякий раз протирают сперва ваткой, смоченной в 5%-ном карболовом растворе, а затем ваткой с вазелином.

Оценка подкожной аллергической реакции

Подкожное введение птичьего туберкулина у инфицированных паратуберкулезным энтеритом животных сопровождается повышением температуры, нередко явлениями угнетения, потерей аппетита, усталостью, дрожанием мускулатуры, иногда поносами. Кроме того, на месте инъекции препарата у отдельных больных животных наблюдаются местные воспалительные отеки различной величины.

Температурная кривая в положительных случаях имеет довольно типичный характер. Максимальный подъем температуры изредка наблюдается даже на 4-м часу после введения туберкулина, однако чаще на 8, 10, 12 и 14-м часу и реже на 6 и 16-м и в более поздние часы. Температура то довольно быстро, то постепенно нарастает и затем постепенно снижается; в редких случаях перед окончательным ее падением вновь происходит незначительный подъем.

Термическую (температурную) реакцию признают положительной, если температура у взрослых животных достигает или превышает 40° и разница между средней суточной до испытания и максимальной температурой после инъекции препарата равна не меньше чем 1°. У молодняка в возрасте до 1 года температуру расценивают соответственно на 0,5° выше, чем у взрослого скота.

Термическую реакцию признают сомнительной, если максимальный подъем температуры находится в пределах от 39,7 до 40°, а разница между средней суточной и максимальной температурой после туберкулинизации составляет не менее 0,7°. В том случае, когда сомнительная термическая реакция сопровождается угнетением, дрожью животного или характерным отеком на месте инъекции препарата, ее следует расценивать как положительную.

Подъем температуры до 39,6° с неопределенной, нетипичной кривой, однократные быстрые взлеты и быстрое снижение температуры, температурные скачки, а также запоздалое начало подъема температуры на 10-12-м часу не могут быть принимаемы за специфические реакции, и их рассматривают как нехарактерные или, так называемые, отрицательные реакции.

Следует иметь в виду, что у большинства животных в предклинической и клинической стадиях болезни, а также у тяжелобольных термической реакции на птичий туберкулин не наблюдается.

Примечание. 1. Нельзя производить подкожную туберкулинизацию коров за 2 месяца до отела во избежание абортов, вследствие сильной термической реакции, а также в течение 1/2 месяца после отела, когда можно ожидать сбивчивых показаний вследствие послеродовых колебаний температуры по другим причинам.

2. Не рекомендуется применять подкожную пробу у телят до 6-месячного возраста вследствие большой лабильности у них нормальной температуры, почему возможны сбивчивые, ошибочные температурные показатели.