Методические указания на хроматографическое определение дибутилфталата, диоктилфталата, дидодецилфталата в воздухе (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 3 сентября 1980 г. N 2221-80)

Дибутилфталат - жидкость с мол. массой 278,35, т. кип. 340°С, т. пл. - 35°C, растворима в воде 0,04%, хорошо растворима в органических растворителях.

Диоктилфталат - жидкость с мол. массой 390, т. кип. 380°C, т. пл. - 40°С не растворима в воде, хорошо растворима в органических растворителях.

Дидодецилфталат - жидкость с мол. массой 502, т. кип. 250-260°С при 1,5 мм рт. ст., не растворима в воде, хорошо растворима в органических растворителях.

II. Реактивы и аппаратура

8. Применяемые реактивы

Дибутилфталат, ч., ГОСТ 2102-67

Диоктилфталат для хроматографии, х.ч., МРТУ 6-09-851-63

Дидодецилфталат, ч., МРТУ 6-09-2740-65

Стандартные растворы в хлороформе с содержанием 1 мг/мл каждого из фталатов

Метилен хлористый, ч., МРТУ 6-09-5362-68

Резорцин, чда, ГОСТ 9945-62, 40% раствор с добавлением 0,5 г хлористого цинка, чда, ГОСТ 4529-69

Едкое кали, чда, ГОСТ 4203-65, 40% раствор и 0,1 н раствор

Кислота серная, чда, ГОСТ 4204-66, 4 н раствор

Хлороформ, чда, ГОСТ 215-74

Этанол ГОСТ 5962-67

Силикагель КСК с зернением 5-25 мг

Гипс медицинский

9. Применяемые приборы и посуда

Аспирационное устройство

Поглотительные приборы с пористой пластинкой

Хроматографические камеры

Пульверизаторы стеклянные

Градуированные пипетки емкостью 0,1 мл с оттянутым концом, ГОСТ 1770-74

Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 1770-74

Лампа ПРК-4 с фильтром N 3 (стекло Вуда)

Фарфоровые чашки емкостью 25 мл

Флуориметр

Пластинка для хроматографирования. Стеклянную пластинку (9x12 см) промытую содой, хромовой смесью, дистиллированной водой, протирают этиловым спиртом и покрывают сорбционной массой. Для приготовления неподвижной фазы для одной пластинки смешивают 0,4 г силикагеля с 0,05 г медицинского гипса и приливают 1,7 мл воды. Нанесение сорбента на пластинку должно быть закончено за 1-2 мин, пластинку активируют в течение часа при температуре 105°С.

III. Отбор проб воздуха

10. Воздух со скоростью 0,5 л/мин аспирируют через поглотительный прибор с пористой пластинкой, наполненный 5 мл этилового спирта. Отбор проб проводят при охлаждении (вода + лед). Для определения 2 предельно допустимой концентрации следует отобрать 8 л воздуха, диоктилфталата 4 л воздуха, дидодецилфталата 2 л воздуха. Срок хранения проб 30 дней.

IV. Описание определения

11. Содержимое поглотительных приборов переносят в фарфоровые чашки и упаривают на водяной бане при 40-50°С. Полученный остаток растворяют в 0,2-0,3 мл хлороформа и переносят в пробирки с притертыми пробками. На покрытую сорбентом пластинку с помощью микропипетки наносят на линию старта пробу по 0,01 мл и стандартные растворы смеси дибутил-, диоктил-, дидодецилфталата с содержанием от 2,5,7# до 50,80 мкг соответственно. После испарения растворителя при комнатной температуре, пластинку помещают в хроматографическую камеру для разделения. В качестве подвижной фазы используют хлористый метилен. Разделение смеси длится 40-50 мин.

После того, как линия растворителя (линия фронта) достигнет соответствующей высоты (0,5 см от края пластинки), пластинку извлекают из камеры, сушат на воздухе до удаления растворителя.

Пятна фталатов после хроматографического разделения проявляют, орошая хроматограф 20% раствором резорцина в этаноле, затем нагревают в течение 10 мин в термостате при 150°С, и после охлаждения пластинку орошают 4н раствором серной кислоты, вновь нагревают 20 мин при 120°С, а затем после охлаждения проявляют 40% раствором щелочи. Фталаты проявляются в виде желтых овальных пятен. Величины Rf для дибутил-, диоктил-, дидодецилфталата равны соответственно 0,56, 0,76, 0,86.

Количественное определение производят: а) по визуальному сравнению величины и интенсивности окрашенных пятен анализируемых фталатов с пятнами "свидетелей", полученных при хроматографировании эталонных образцов на этой же пластинке;

б) по флоуресценции, для чего готовят стандартную шкалу, т.е. подвергают хроматографическому разделению "свидетели". После проявления хроматограммы зоны локализации соскабливают и переносят в колориметрические пробирки, наполненные 6 мл 0,1 н раствора щелочи. Пробирки энергично встряхивают и появившуюся флоуресценцию растворов измеряют на флоуриметре.

Для построения калибровочной кривой проводят пять параллельных измерений и по полученным средним данным строят графики зависимости оптической плотности от концентрации вещества.

Для определения содержания фталатов в пробах после их хроматографического разделения окраску каждого пятна элюируют, измеряют величину оптической плотности элюатов и с помощью графика находят количество каждого фталата в пробе.

Концентрацию фталатов в воздуха (X) вычисляют по формуле:

, где

y - количество фталата, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг

- общий объем пробы, мл

V - объем пробы, взятый для анализа, мл

- объем воздуха в л, взятий для анализа и приведенный к стандартным условиям по формуле (см. приложение 1).

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И. Заиченко