Методические указания по определению рамрода, лассо и дуала в воде, почве и растительных пробах хроматографией в тонком слое (утв. заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 27 апреля 1984 г. N 2998-84)

1. Краткая характеристика препаратов

1.1. Рамрод

1.1.1. N-изопропил-N-2-хлорацетанилид - пропахлор.

1.1.2. Структурная формула.

Мол. масса 211,69

1.1.3. Синонимы: пропахлор, нитицид, ацилид.

1.1.4. Белое кристаллическое вещество, трудно растворимое в воде, хорошо - в бензоле, ацетоне, хлороформе, спирте, эфире, гексане. Температура плавления - 70-72°C.

Рамрод малотоксичен для теплокровных. при оральном введении для крыс - 1200 мг/кг, кроликов - 710 мг/кг.

Разрешен к применению в виде 65% смачивающегося порошка на капусте, луке, чесноке, брюкве, турнепсе.

МДУ в капусте и других овощах (кроме картофеля) - 0,2 мг/кг, растительных пищевых продуктах - 0,05 мг/кг. ПДК в воде - 0,01 мг/л.

1.2. Лассо

1.2.1. 2-хлор-2',6'-диэтил-N-метоксиметилацетанилид - алахлор.

1.2.2. Структурная формула.

Мол. масса 269,77

1.2.3. Синонимы: алахлор, лассо, худор.

1.2.4. Белый кристаллический порошок с температурой плавления 40-41°C. Трудно растворим в воде, хорошо - в ацетоне, бензоле, спирте этиловом, хлороформе, этилацетате.

Разрушается в сильных кислотах и щелочах.

Относится к малотоксичным соединениям. для крыс - 1200-1500 мг/кг при оральном введении.

Выпускается в виде концентрата эмульсии и гранулятов.

ПДК и МДУ не установлены.

1.3. Дуал

1.3.1. 2-этил-6-метил-N-(1-метил-2'-метоксиэтил)-хлорацетанилид-метолахлор.

1.3.2. Структурная формула.

Мол. масса 283,80

1.3.3. Синоним: ЦГА 24705.

1.3.4. Бесцветная жидкость с температурой кипения 100°C. Растворимость в воде - 5 мг/л (20°C). Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.

Разрушается в сильных кислотах и щелочах.

Малотоксичен для теплокровных животных. при оральном введении для крыс - 3170 мг/кг.

Разрешен для опытно-производственного применения в виде 50%-ного концентрата эмульсии на посевах свеклы, сои, клещевины.

ПДК и МДУ не установлены.

2. Методика определения

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении гербицидов из растительных проб, почвы и воды органическим растворителем, очистке экстрактов осаждением коэкстрактивных веществ и перераспределением в системе двух несмешивающихся фаз. Количественное определение производят методом хроматографии в тонком слое. Минимально детектируемое количество - 2-4 мкг препаратов в анализируемой пробе. Нижний предел определения 0,02-0,0# мг/кг почвы и растений, 0,02 мг/л воды.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

P - размах варьирования, %

	рамрод	лассо	дуал
растения	84,6-92,3	89,5-93,7	86,0-91,5
почва	93,7-97,3	90,1-96,7	92,5-97,5
вода	94,5-98,7	92,6-97,8	95,5-99,7

# - среднее значение определения, %

	рамрод	лассо	дуал
растения	88,4	91,6	85,5
почва	94,6	92,3	95,0
вода	96,7	94,8	97,7

# - стандартное отклонение, %

	рамрод	лассо	дуал
растения	3,7	3,2	2,5
почва	3,4	2,6	2,5
вода	2,7	2,8	2,4

Доверительный интервал при P = 0,95 и n = 5

	рамрод	лассо	дуал
растения
почва
вода

Метод специфичен в присутствии ДДТ и линдана по .

2.2. Реактивы и растворы

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76.

н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Бензол, ч.д.а., ГОСТ 5955-75.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Аммоний хлористый, х.ч., ГОСТ 3773-75.

Кислота ортофосфорная, ч., ГОСТ 6552-78.

Пластинки "Силуфол", "Хемапол", ЧССР.

Аммиак водный 25%, ГОСТ 3760-74.

Кальций сернокислый, ч.д.а., ГОСТ 3210-76.

Серебро азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-75.

Четыреххлористый углерод, ТУ 6-09-2663-77.

Стандартные растворы гербицидов в хлороформе с содержанием по д.в. 100 мкг/мл.

Коагулирующий раствор. 5 г хлористого аммония растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл 85%-й ортофосфорной кислоты и доводят до 1 л дистиллированной водой.

Проявляющий реактив. 0,5 г азотнокислого серебра, 5 мл дистиллированной воды и 2 мл 25-ого водного аммиака доводят в мерной колбе до 100 мл.

2.3. Приборы и посуда

Колбы конические на шлифах КШ-500 29/32 ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы грушевидные ОКТ-14/23 ТС, ГОСТ 10394-72.

Делительные воронки ВД-3-800, ГОСТ 8613-75.

Воронки конические, диаметр 5 см.

Колбы мерные 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный испаритель ИР-1M, ТУ 25-11-917-74.

Хроматографические камеры, ГОСТ 10565-74.

Микропипетки, ГОСТ 1770-74.

Лампа кварцевая ПРК-4.

Камера для опрыскивания, ГОСТ 11413-70.

Пульверизаторы, ГОСТ 10391-74.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Подготовка реактивов.

Органические растворители необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300-400°C.

2.4.2. Отбор проб.

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР N 2051-79 от 21.08.79 г.

На анализ отбирают 25-30 г растительной пробы, 100 г почвы и 200 мл воды.

2.5. Ход определения

2.5.1. Вода.

200 мл воды в делительной воронке экстрагируют трижды по 80, 60 и 50 мл хлороформом. Объединенный хлороформенный экстракт осушают сульфатом натрия б/в и отгоняют хлороформ на ротационном испарителе при температуре не выше 50°C.

2.5.2. Почва.

100 г воздушно-сухой почвы растирают в ступке и просеивают через сито. Пробу помещают в коническую колбу на 500 мл с притертой пробкой и экстрагируют гербицид на аппарате для встряхивания в течение 2 часов 100 мл хлороформа. Растворитель отфильтровывают через складчатый фильтр со слоем безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10-15 мл. Объединенный экстракт упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре не выше 50°C.

2.5.3. Растительный материал.

25-50 г измельченной растительной пробы экстрагируют хлороформом в течение 2 часов на аппарате для встряхивания. Экстракт отфильтровывают через слой безводного сульфата натрия. Колбу и фильтр трижды промывают хлороформом порциями по 10-15 мл. Объединенный экстракт отгоняют досуха на ротационном испарителе при температуре 50°C. Сухой остаток растворяют в 3 мл охлажденного ацетона и прибавляют 25-30 мл охлажденной коагулирующей смеси. Колбу помещают на 30-40 мин в холодильник, после чего содержимое отфильтровывают через плотный бумажный фильтр в делительную воронку. Препараты экстрагируют трижды н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают досуха при температуре не выше 50°C.

2.5.4. Хроматографирование.

К сухому остатку прибавляют 0,1-0,2 мл хлороформа и наносят образцы на хроматографическую пластинку "Силуфол". Стенки колбы ополаскивают несколькими каплями растворителя и наносят в центр пятна.

Хроматографирование проводят в системе четыреххлористый углерод - эфир (3:2). После этого пластинка высушивается от растворителей и опрыскивается проявляющим реактивом. После облучения под УФ-лампой в течение 10-15 мин препараты проявляются в виде темно-серых пятен. рамрода - ; дуала - ; лассо - .

Для дополнительной очистки можно использовать двумерную хроматографию. В качестве первой системы подвижных растворителей используется четыреххлористый углерод, а второй - смесь четыреххлористого углерода - эфира (3:2).

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен проб и стандартных растворов.

Содержание препаратов вычисляется по формуле:

(мг/кг; мг/л),

где: m - масса препарата, нанесенного на пластинку из стандартного раствора, мкг;

- площадь пятна стандартного раствора, ;

- площадь пятна пробы, ;

A - масса или объем пробы, взятой на анализ, г или мл.

2.7. Требования безопасности

Соблюдать правила работы с токсическими соединениями II-го класса опасности (гербициды), ЛВЖ (органические растворители) и УФ-светом.

2.8

При необходимости дополнительной идентификации и определения содержания лассо в количествах, меньших 0,02-0,04 мг/кг, используют "Временные методические указания по определению микроколичеств лассо в почве и зеленой массе кукурузы методом хроматографии в тонком слое" N 2997-84, принцип определения которых основан на гидролитическом расщеплении лассо до 2,6-диэтиланилина и детектировании последнего по реакции азосочетания с 1-нафтолом в тонком слое силикагеля.

2.9. Разработчики

Настоящие методические указания разработаны А.А. Красных, Всероссийский НИИ защиты растений, И.И. Кофманом и Л.В. Нижко, Институт физиологии растений АН УССР

2.10

Методика апробирована во ВНИИГИНТОКС в Институте коллоидной химии и химии воды АН УССР, г. Киев

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А.И. Заиченко