Приложение J (обязательное). Меры по снижению риска, связанного с заражением вирусами и другими инфекционными агентами, такими как TSE

Приложение J
(обязательное)

Меры
по снижению риска, связанного с заражением вирусами и другими инфекционными агентами, такими как TSE

J.1 Общие положения

Для поддержания характеристик медицинских продуктов на клеточной основе обычно живые клетки не могут быть подвергнуты воздействию физических или химических методов, которые эффективны для инактивации или удаления инфекционных агентов, таких как вирусы или агентов TSE. Пока методы инактивации или удаления инфекционных агентов не утверждены, безопасность медицинских продуктов на клеточной основе зависит от надлежащего выбора и тестирования доноров и пригодности исходных материалов, используемых во время обработки. Должны быть установлены строгие требования к источникам и критерии приемки для всех материалов человеческого происхождения для обеспечения того, что клетки или ткани, используемые в качестве исходного материала для медицинских продуктов на клеточной основе, не заражены, а материалы, используемые при обработке, не привносят инфекционных агентов.

Для медицинских продуктов на клеточной основе можно использовать непосредственно первичную культуру основных клеток, или выращенные клетки, или ткани, в течение нескольких циклов культивированные на протяжении нескольких пассажей, поэтому обширные испытания невозможны. Следовательно, необходимо использовать соответствующий режим исследования доноров, такой как в Европе (см. ссылку [35]) и США (см. ссылку [53]). Подробности приведены в приложении С. Объединение клеток может увеличить риск передачи заболевания. Если используют клеточные линии, по возможности, должны быть установлены соответствующие охарактеризованные главный банк клеток (Master Cell Bank, МСВ) и рабочий банк клеток (Working Cell Banks, WCB).

При разработке и производстве медицинских продуктов на клеточной основе необходимо принимать соответствующие меры для минимизации риска передачи вируса; кроме того, необходимо учитывать риск заражения TSE, а также другие аспекты.

J.2 Источник заражения вирусом/TSE

J.2.1 Человеческие ткани и клетки

Процесс производства медицинских продуктов на клеточной основе обычно не включает конечную стерилизацию, этапы очистки, этапы удаления и/или инактивации вирусов. Следовательно, должны быть четко определены строгие требования к источникам, а также критерии приемки для всех материалов человеческого и животного происхождения в соответствии с предполагаемым использованием.

Обычно ткани и клетки человека могут содержать вирусы. Это патогенные вирусы человека, которые могут расти в условиях обработки и в отдельных случаях при росте клеток. Как правило, все вирусы, передающиеся через кровь, рассматривают как потенциальные контаминанты. Дополнительно следует рассматривать тканеспецифичные вирусы, такие как вирусы герпеса (CMV, EBV), связанные с клетками крови.

Необходимо учитывать риск заражения человеческих тканей агентом вариантной болезни Крейтцфельдта-Якоба (variant Creutzfeldt-Jakob disease, vCJD) и, если применимо, использовать соответствующий отбор доноров (см. ссылки [35] и [53]).

Производство медицинских продуктов на клеточной основе должно соответствовать принципам надлежащей производственной практики. Область производства должна быть физически отделена от области забора. Если в одной и той же области производства обрабатывают и хранят различные тканевые и клеточные продукты, существует повышенный риск перекрестного загрязнения на каждом этапе процедуры, например, через оборудование для обработки или контейнеры для хранения, такие как емкости с жидким азотом. Следовательно, должны быть внедрены надлежащие меры контроля для предотвращения перекрестного загрязнения.

Лечебные продукты из аутогенных клеток могут также разрабатывать от вирус-положительных (например, ВИЧ, гепатит В, гепатит С) пациентов. Важно проверить, увеличиваются ли вирусы во время культивирования клеток ex vivo. Кроме того, должны быть внедрены строгие принципы предотвращения перекрестного загрязнения между вирус-положительными и вирус-отрицательными клеточными культурами.

J.2.2 Технологические добавки

Для получения, отбора, культивирования или даже генетической или фенотипической модификации клеток требуются различные материалы, такие как другие клетки, ферменты, антитела, цитокины, сыворотка и антибиотики. Каждое вещество, используемое во время процедуры, должно быть четко определено и оценено на предмет его соответствия предполагаемому применению. Качество биологически активных добавок в культуральной среде, таких как факторы роста, цитокины и антитела, должно быть документально отражено; кроме того, следует дать оценку их качества и безопасности. Необходимо контролировать даже безопасность аминокислот. Если они получены от материалов животного происхождения, должно быть приведено документальное подтверждение, что нет риска заражения животным TSE.

Для распространения клеток часто используют фетальную бычью сыворотку (fetal bovine serum, FBS). Хорошо известно, что FBS может быть заражена вирусами (см. ссылки [41], [61], [62]). Свиной трипсин, часто используемый для культивирования клеток, связан с риском заражения. Испытания сыворотки или трипсина, например, заявленные поставщиками в сертификате об анализе (Certificate of Analysis, СоА), являются недостаточными для гарантии отсутствия заражения вирусами; причинами ограниченной значимости испытаний является чувствительность используемых методов выявления и малый объем, который может быть использован для испытаний. Необходимо избегать использования этих компонентов, если иное не обосновано и документально не отражено. Если обосновано, следует использовать инактивированную сыворотку и/или инактивированный трипсин. Если в качестве добавки к среде применяют человеческую сыворотку, отсутствие загрязнения вирусами должно быть обосновано соответствующими способами.

При использовании материалов FBS производитель должен продемонстрировать:

a) соответствие ИСО 22442 (все части стандарта); или

b) сертификат соответствия, принятый EDQM (European Directorate for the Quality of Medicines and Health Care, Европейским директоратом по качеству лекарственных средств и здравоохранению), или эквивалент.

Поставщик должен предоставить надлежащую документацию, демонстрирующую качество и безопасность по отношению к вирусам и TSE всех исходных материалов человеческого или животного происхождения. Очень важно учитывать этот момент с самого начала разработки продукта и вести документацию на все исходные материалы во время различных циклов разработки продукта.

J.3 Методы снижения риска

J.3.1 Тестирование донора человеческих тканей и клеток

Разработаны конкретные требования к выбору и тестированию доноров, например, в Европе (см. ссылку [35]) и в США (см. ссылку [53]). Подробности приведены в приложении С. Статус вирусного инфицирования любого клеточного образца, включая аутогенные клетки, должен быть известен для обеспечения возможности соответствующего отделения инфицированных клеток и установления соответствующих мер безопасности при обслуживании и хранении клеток и материалов.

J.3.2 Испытания банков клеток

Если использованы клеточные линии, по возможности, должны быть установлены соответствующие охарактеризованные главный банк клеток (Master Cell Bank, МСВ) и рабочий банк клеток (Working Cell Banks, WCB). Банки клеток, включая характеристику и исследования клеток, должны соответствовать Руководству ICH Q5D (см. ссылку [17]).

J.3.3 Отбор соответствующих исходных материалов и/или реагентов

Для получения, отбора, культивирования или модификации клеток требуются различные исходные материалы или реагенты. Качество биологических материалов должно быть документально отражено, и каждое вещество, используемое в процедуре, должно быть точно определено и оценено в соответствии с предполагаемым использованием.

Следует учитывать риск загрязнения случайными веществами, и особенно в оценке риска необходимо рассматривать все исходные материалы и/или реагенты человеческого или животного происхождения. Основной стратегией является избегание использования биологических материалов, если это возможно.

При невозможности, необходимо учитывать следующее.

При росте in vitro основных клеток сыворотка является соответствующей добавкой к среде, и многие клетки невозможно успешно культивировать без сыворотки. Если для снижения риска заражения рассматривают применение бычьей сыворотки, следует использовать только фетальную бычью сыворотку и, если возможно, инактивированные продукты FBS. Поставщики должны документально подтвердить, что проводимые процедуры инактивации эффективны в отношении инактивации вирусов и что перед инактивацией были проведены соответствующие испытания, которые продемонстрировали, за исключением BVDV, что сыворотка свободна от определяемых бычьих вирусов. Было показано, что гамма-излучение 30 кГр или выше эффективно для инактивации вирусов (см. ссылки [31], [36], [40]).

Если используют FBS, должны быть приняты меры для снижения риска TSE. Необходимо учитывать соответствующие стандарты, такие как ИСО 22442 (все части стандарта) и руководства (см. ссылку [41]).

Для технологических добавок животного происхождения необходимо учитывать возможную чувствительность пациента, такую как аллергические реакции и/или образование антител.

Риск заражения бычьими вирусами во время культивирования клеток возможно снизить, используя в качестве добавок к среде сыворотку человека, однако при этом необходимо принимать соответствующие меры для предотвращения заражения вирусами человека. В случае лечебных продуктов из аутогенных клеток сыворотка пациента может подходить для использования в качестве добавки к клеточной культуре.

Для культивирования клеток часто используют трипсин. Он может быть получен из свиных тканей и, следовательно, заражен свиными вирусами, особенно свиным парвовирусом и/или свиным цирковирусом типа 1/2. Оба вируса обладают высокой устойчивостью к тепловой и химической инактивации. Следовательно, если возможно, необходимо применять инактивированный свиной трипсин растительного происхождения или рекомбинантный трипсин.

Материалы, полученные от человека или животных, включая клетки, которые функционируют как поддержка для роста и адгезии, например, питающие клетки, должны быть оценены и/или утверждены на их соответствие предполагаемому использованию. Если применяют клетки животных, они должны исследоваться на отсутствие выявляемых видоспецифичных вирусов с использованием соответствующих утвержденных проб. Можно ознакомиться с методическими документами на предмет выбора соответствующих вирусов для установления соответствующих режимов испытания (см. ссылки [16], [32], [54], [55]).

Если исходные материалы, реагенты и/или наполнители имеют лицензию на продажу или упомянуты в Фармакопее, необходимо сделать соответствующие ссылки. Если применимы другие методические документы, такие как для моноклональных антител (см. ссылки [30], [56]), или для медицинских продуктов, выделенных из плазмы (см. ссылку [42]), или для оценки вирусной безопасности лекарственных биопрепаратов (см. ссылку [16]), они также должны быть учтены. Такие материалы следует использовать в производстве медицинских продуктов на клеточной основе, только если их вирусная/TSE безопасность надлежаще продемонстрирована (см. ссылку [41]).