Межгосударственный стандарт ГОСТ 13979.3-68 "Жмыхи и шроты. Метод определения суммарной массовой доли растворимых протеинов" (утв. постановлением Комитета стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР от 1 ноября 1968 г. N 73)

Oilcakes oil-meals. Methods of determination of soluble proteins

Группа Н69
ОКСТУ 9146

Дата введения установлена с 1 января 1970 г.
Взамен ГОСТ 5983-51 в части метода определения
содержания сырого протеина, ГОСТ 80-62
в части определения суммарного содержания
растворимых протеинов и ГОСТ 606-62
в части определения суммарного
содержания растворимых протеинов

ГАРАНТ:

Ограничение срока действия снято по протоколу N 2-92 Межгосударственного Совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 2-93)

Настоящий стандарт распространяется на жмыхи и шроты, получаемые при переработке масличных семян, и устанавливает метод определения суммарной массовой доли растворимых протеинов.

Сущность метода состоит в выделении водо- и щелочерастворимых протеинов и количественном определении их по методу Кьельдаля.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

1. Отбор проб

1.1. Отбор проб производят по ГОСТ 13979.0-86.

Разд. 2. (Исключен, Изм. N 2).

3. Метод определения суммарного содержания растворимых протеинов

Сущность метода заключается в выделении водо- и щелочерастворимых протеинов и количественном определении их по методу Кьельдаля.

3.1. Аппаратура, реактивы и материалы

3.1.1. Для проведения испытания должны применяться следующие аппаратура, реактивы и материалы:

весы лабораторные класса точности 3 или 4 с наибольшим пределом взвешивания 200 г или 500 г или другие весы с таким же классом точности;

воронка В-100-150 ХС по ГОСТ 25336-82;

воронка Бюхнера 1 (2,3) по ГОСТ 9147-80;

колбы Кн-1 (2) - 250 (500) ТС по ГОСТ 25336-82;

бюретка 1 (2) - 1 (2) - 25-0,1 по ГОСТ 29251-91;

пипетка 2-1 (2) - 25 по ГОСТ 29227-91;

цилиндр 1-10 (25, 100) по ГОСТ 1770-74;

установка для отгонки аммиака;

колбонагреватели;

насос водоструйный или насос Комовского;

парообразователи;

измельчитель механический;

сито с величиной отверстий 0,5 мм из набора лабораторных сит;

ступка фарфоровая диаметром 10 см по ГОСТ 9147-80;

ступка 2 (3,4) и пестик 2 (3, 4) по ГОСТ 9147-80;

кислота серная по ГОСТ 4204-77, х. ч., с (1/2 H₂SO₄) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.);

натр едкий технический по ГОСТ 2263-79, раствор с массовой долей 33 %;

натрия гидрат окиси по ГОСТ 4328-77, раствор с массовой долей 0,2 %;

индикатор метиловый красный по нормативно-технической документации, раствор с массовой долей 0,2 %, спиртовой раствор;

калия гидрат окиси по ГОСТ 23363-90, с (КОН) = 0,1 моль/дм³ (0,1 н.);

бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026-76.

(Измененная редакция, Изм. N 2).

3.2. Подготовка к испытанию

3.2.1. Из средней пробы выделяют пробу для анализа массой около 15 г, отвешивают на весах классов точности 3 или 4. Выделенную пробу измельчают до прохода через сито с величиной отверстий 0,5 мм. Остаток на сите, не поддающийся измельчению, тщательно смешивают с материалом, прошедшим через сито.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

3.3. Проведение испытания

3.3.1. На весах класса точности 3 или 4 отвешивают 5 г пробы измельченного исследуемого продукта, помещают в коническую колбу, приливают 200 см³ натрия гидрат окиси раствора с массовой долей 0,2 %, перемешивают содержимое колбы легким вращением ее и оставляют настаиваться в течение 1,5 ч, перемешивая через каждые 15 мин. По истечении указанного времени содержимое колбы фильтруют через складчатый фильтр.

Примечание. В случае, если растворы фильтруются медленно, рекомендуется проводить фильтрацию на воронке Бюхнера через слой бумажного теста (толщиной слоя около 1 см) при слабом отсасывании водоструйным насосом или насосом Комовского.

(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).

3.3.2. После того, как будет отфильтровано 75-80 см³ жидкости, берут пипеткой 25 см³ прозрачного фильтрата и помещают в колбу Кьельдаля. Туда же приливают 5 мл концентрированной серной кислоты, вводят несколько кристалликов перекристаллизованной сернокислой меди и ставят колбу на колбонагреватель.

Сначала выпаривают воду из колбы, затем ведут сжигание органических веществ до получения голубоватой прозрачной жидкости.

3.3.3. По окончании сжигания колбу охлаждают, приливают в нее 75 см³ дистиллированной воды и производят отгонку образовавшегося аммиака паром на установке Кьельдаля (черт. 2).

Для этого помещают колбу Кьельдаля на колбонагреватель, плотно закрывают пробкой, в которую вставлен каплеуловитель и трубка, соединяющая колбу Кьельдаля с парообразователем.

В приемную колбу наливают из бюретки 25 см³ 0,1 моль/дм³ раствора серной кислоты и 3-5 капель метилового красного в качестве индикатора. Приемник устанавливают под холодильником так, чтобы оттянутый конец холодильника был погружен в серную кислоту.

3.3.4. Когда прибор собран, пропускают воду через холодильник, а в колбу Кьельдаля через воронку быстро приливают 30-40 см³ раствора с массовой долей 33 % едкого натра, закрывают зажим воронки и соединяют колбу с парообразователем, предварительно доведенным на электроплитке до кипения.

Включают колбонагреватель и начинают отгонку аммиака. Отгонку ведут до тех пор, пока объем в приемной колбе не увеличится на 125-150 см³, после чего проверяют полноту отгонки аммиака с помощью лакмусовой бумажки. Красная бумажка не должна окрашиваться в синий цвет.

Конец трубки обмывают из промывалки дистиллированной водой и продолжают отгонку еще 5 мин для смывания кислоты с внутренней поверхности трубки холодильника.

По окончании отгонки содержимое колбы титруют 0,1 моль/дм³ раствором едкого калия до перехода окраски от красной к желтой.

В таких же условиях проводят контрольный опыт (без пробы продукта).

1 - колба Кьельдаля; 2 - колбонагреватель; 3 - электроплитка; 4 - парообразователь; 5 - соединительная трубка; 6 - зажим; 7 - воронка; 8 - каплеуловитель; 9 - пробка; 10 - холодильник; 11 - приемная колба

Черт. 2*

------------------------------

* Черт. 1. (Исключен, Изм. N 2).

3.4. Обработка результатов

3.4.1. Суммарную массовую долю растворимого протеина в продукте (Х₂) в процентах вычисляют по формуле

,

(3)

где - объем 0,1 моль/дм³ раствора едкого калия, израсходованный на титрование 25 мл 0,1 моль/дм³ раствора серной кислоты в контрольном опыте, мл;

- объем 0,1 моль/дм³ раствора едкого калия, израсходованный на титрование избытка серной кислоты в основной пробе, мл;

- поправка к титру 0,1 моль/дм³ раствора едкого калия;

0,0014 - объем азота, эквивалентный 1 см³ точно 0,1 моль/дм³ раствора серной кислоты, г;

200 - объем исходного раствора, см³;

25 - объем раствора, взятый для анализа, см³;

- масса продукта, г;

6,25 - коэффициент для пересчета количества азота на сырой протеин.

3.4.2. Суммарную массовую долю растворимого протеина к общему содержанию сырого протеина (Х₃) в процентах вычисляют по формуле

,

(4)

где - массовая доля растворимого протеина, %;

- массовая доля сырого протеина при фактической влажности продукта, %, определенного в соответствии с ГОСТ 13496.4-93.

Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать 0,5 %.

3.3.3. 3.3.4, 3.4, 3.4.1, 3.4.2. (Измененная редакция, Изм. N 2).