Приложение 2. Рецепты специальных сред

Приложение 2

Рецепты специальных сред

1. Среда Хью-Лейфсона, Состав: пептона - 2.0 г, хлорида натрия - 5.0 г., калия фосфорнокислого двухзамещенного - 0.3 г, бромтимолового синего - 0.03 г, агар-агара - 3.0 г дистиллированной воды - 1000 мл. Компоненты смешивают, расплавляют агар, рН смеси доводят до 7.1-7.2. Среду кипятят, разливают в пробирки по 3 мл и стерилизуют в автоклаве при 1 атм (120°С) 20 мин. После охлаждения смеси до 45-50°С в каждую пробирку стерильно вносят по 0.3 мл 10%-ного стерильного раствора глюкозы. Готовая среда травянисто-зеленого цвета.

2. Среда Меллера, Состав: пептона - 5.0 г, мясной воды (вода и мясо берется в соотношении 1:1) - 300.0 мл, бромкрезоловый красный 1.6%-ный раствор - 0.625 мл, крезоловый красный 0.2%-ный водный раствор - 2.5 мл, D-глюкозы - 0.5 г, пиридоксаля (можно витамина ) - 5.0 г дистиллированной воды - 1000 мл. Компоненты смешивают, рН смеси доводят до 6.0 или 6.5. Затем среду делят на 4 части, в три из которых добавляют по 1% одной из аминокислот - 1- аргинина, 1-лизина, 1-орнитина, (DL-формы - 2%). Четвертая часть среды (без аминокислоты) - контрольная. В пробирках с орнитином рН среды устанавливают после добавления аминокислоты, перед стерилизацией. Среду разливают в пробирки по 2 мл и стерилизуют в автоклаве при 1 атм (120°С) 20 мин.

3. Среда Биргер-Крушинской. Состав: гидролизата казеина (пептона) - 5.0 г, дрожжевого экстракта - 3.0 мл, глюкозы - 1.0 г, индикатора бромтимолового синего - 45.0 мл (0.1%-ного раствора в 20%-ном спирте), дистиллированной воды - 1000 мл. Компоненты смешивают, устанавливают рН смеси 6.0-6.2. Среду делят на 4 части, в три из которых добавляют по 1% одной из аминокислот - 1-аргинина, 1-лизина, 1-орнитина, (DL-формы - 2%). Четвертая часть среды (без аминокислоты) - контрольная. В пробирках с орнитином рН среды устанавливают после добавления аминокислоты, перед стерилизацией. Среду разливают в пробирки по 2-4 мл и стерилизуют текучим паром 3 дня или в автоклаве при 0.5 атм 15 мин.