Приложение 3. Рецепты питательных сред

Приложение 3

Рецепты питательных сред

1. Глюкозо-сывороточный бульон. В свежеприготовленный мясо-пептонный бульон, содержащий 1% глюкозы (pH 7,4-7,6), соблюдая правила стерильности, добавляют 10% нормальной инактивированной сыворотки крови лошади и асептично разливают в стерильные пробирки по 5-7 :

Сыворотку инактивируют прогреванием в течение 30 мин в водяной бане при 56°C.

2. Глюкозо-кровяной агар. К расплавленному и стерильному 2%-ному мясо-пептонному агару, охлажденному до 45°C (не выше), содержащему 1% глюкозы, прибавляют 5-10% дефибринированной, стерильно взятой крови кролика или барана. Кровь добавляют в среду, соблюдая правила стерильности. Приготовленную среду разливают в стерильные чашки Петри (предварительно нагретые в термостате), дают застыть и подсушивают в термостате. Слой агара должен быть равномерно окрашен в красный цвет.

3. Желчный бульон. К мясо-пептонному бульону добавляют нативную желчь крупного рогатого скота и устанавливают pH среды 7,4-7,6. Для получения 10%-ного желчного бульона к 90 МПБ прибавляют 10 желчи, для получения 40%-ного - к 60 МПБ прибавляют 40 желчи.

Приготовленный желчный бульон разливают в пробирки по 5-7 и стерилизуют в автоклаве 20-30 мин при 113-115°C (0,6-0,7 атм).

4. Среда с 6,5% хлорида натрия. В 100 МПБ в количестве 6,0 г хлорида натрия, после его растворения разливают в пробирки по 5-7 и стерилизуют в течение 20-30 мин при 1 атм.

5. Среда с теллуритом калия. К мясо-пептонному агару, охлажденному до 45-50°C, добавляют из расчета на 1000 - 50 инактивированной нормальной сыворотки крови лошади, 0,1 г налидиксовой кислоты (неграм или невиграмон) и 0,7 г (35 2%-ного водного раствора) теллурита калия. Среду перемешивают и разливают в чашки.

6. Энтерококковая дифференциально-диагностическая среда.

К мясо-пептонному агару, охлажденному до 45-50°C, перед употреблением кроме 1% глюкозы и 5% дефибринированной крови добавляют из расчета на 1000 : ТТХ (2,3,5-трифенилтетразолий хлорид) 0,1 г, 0,01%-ный водный раствор кристаллического фиолетового - 12,5 , налидиксовой кислоты - 0,1 г, стерильного обезжиренного молока - 200 :

ТТХ и налидиксовую кислоту предварительно растворяют в небольшом количестве стерильного бульона.