Приложение С (справочное). Обоснование тест-системы

Приложение С
(справочное)

Обоснование тест-системы

С.1 Тесты на генотоксичность

Основная функция тестирования генотоксичности - это изучение с использованием тестируемых клеток и организмов потенциала изделий к индукции генетических изменений в эмбриональных и соматических клетках. Научные данные обычно подтверждают гипотезу, что повреждение ДНК соматических клеток является критическим событием в инициации рака. Таким образом, некоторые тесты на оценку повреждений ДНК полезны для изучения предполагаемой канцерогенности. Если в классических исследованиях токсичности можно наблюдать несколько подходящих параметров или показателей в рамках одного эксперимента, этого не происходит в генетической токсикологии. Разнообразие генетических показателей чаще всего препятствует обнаружению более чем одного из них в рамках одной тест-системы.

В руководстве по тестированию собрано примерно 15 различных тестов. Выбор наиболее подходящего из них для соответствия определенному требованию зависит от нескольких факторов. Они включают тип генетических изменений и тесты, необходимые для их определения, или метаболические возможности тест-системы. Следует подчеркнуть, что не существует международного соглашения о лучшей комбинации тестов для определенной цели, хотя сделаны попытки по гармонизации выбора наиболее подходящих тестов. Также полезно отметить, что в использовании или разработках существуют другие тесты по оценке мутагенности, которые, несмотря на отсутствие руководства OECD, также могут быть полезны. Следует принять во внимание существование договора ICH/S2B по фармацевтическим препаратам.

Химикаты, взаимодействующие с ДНК, вызывают повреждения ткани, которые под влиянием различных процессов репарации могут приводить к изменениям на генном уровне, например: генным или точечным мутациям, малым делециям, митотическим рекомбинациям или различным хромосомным изменениям, видимым на микроскопическом уровне, и существуют тесты для исследования каждого из этих явлений. Существующие краткосрочные исследования, разумеется, не могут имитировать все стадии канцерогенного процесса и часто предполагают только обнаружение момента, ведущего к стадии инициации, т.е. способности индуцировать мутагенные или кластогенные повреждения. Таким образом, основная ценность данных исследований - это способность определять вещества, которые могут при определенных условиях воздействия либо вызвать рак путем преимущественно механизма генотоксичности, либо индуцировать первичную фазу канцерогенного процесса. Очевидно, что в связи со сложностью канцерогенного процесса по сравнению с относительной простотой краткосрочных исследований несмотря на предоставляемую полезную качественную информацию заключения в отношении канцерогенной активности необходимо делать со значительной осторожностью.

Так как ни одно исследование не способно определить мутагены и канцерогены в организме млекопитающих с допустимым уровнем точности и воспроизводимости, стандартной научной практикой является применение этих тестов в батареях. Первичная информация по мутагенности вещества может быть получена с помощью тестов, определяющих генные мутации и хромосомные повреждения. Так как отдельные процедуры требуются для исследования показателей, необходима система тестов.

Если существует дополнительная значимая информация, такая как абсорбция, распределение, метаболизм и выведение (ADME), которая указывает на наличие экстрактов в конкретных органах, нужно рассмотреть проведение тестов оценки генотоксичности in vivo. Выбор конкретного теста in vivo будет зависеть от мест накопления экстрактов. Во многих случаях приемлемым является тест оценки хромосомных повреждений гемопоэтических клеток грызунов in vivo. В некоторых случаях могут потребоваться тесты для исследования конкретных органов или конкретных показателей. В большинстве случаев эти исследования не имеют международных признанных протоколов. Для большинства медицинских изделий и/или материалов, для которых исследование на генотоксичность считается необходимым, стандартная батарея тестов in vitro является достаточной для предоставления доказательств генотоксического действия исследуемого образца.

С.2 Тесты на канцерогенность

Целью долгосрочного исследования канцерогенности является наблюдение экспериментальных животных в течение большей части их жизни на предмет развития неопластических повреждений ткани во время или после воздействия различных доз исследуемого образца при подходящем способе воздействия. Такое исследование требует тщательного планирования и документации плана исследования (см. приложение Е), высокого качества оценки патологии и объективного статистического анализа.

С.3 Тесты для оценки токсического воздействия на репродуктивную функцию и развитие

Исследования токсического воздействия на репродуктивную функцию охватывают аспекты размножения, фертильности и развитие эмбриона/плода. Фертильность может быть затронута и у мужчин, и у женщин с результатами от немного сниженной репродуктивной способности до полной стерильности. Токсическое воздействие на развивающийся эмбрион или плод может повлиять на здоровье потомства.

Тератогенность вызвана с негативным влиянием вещества на развивающийся эмбрион и плод. Репродуктивная токсичность очень важна, так как определяет здоровье человечества. Разрабатываются тесты исследований, и концепция комбинированных тестов, охватывающих все аспекты репродуктивной токсикологии, является многообещающей.