Приложение А (справочное). Мониторинг хроматографических характеристик колонки

Приложение А
(справочное)

Мониторинг хроматографических характеристик колонки

А.1 Проверку оптимальности хроматографических условий и состояния хроматографической колонки проводят по хроматограмме градуировочного раствора N 3 (см. 6.3.2) с помощью программного обеспечения или вручную по показателям в соответствии с таблицей А.1.

Таблица А.1 - Основные хроматографические характеристики синтетических пищевых красителей

Наименование красителей	Коэффициент емкости*	Ориентировочное время удерживания, мин	Число теоретических тарелок N	Коэффициент асимметрии As
Тартразин (Е102)	4,06	12,69	85 900	1,09
Желтый "солнечный закат" FCF (E110)	6,96	19,98	197 000	1,34
Желтый хинолиновый (Е104)**	6,31 7,51	18,36 21,35	17 500	1,34
Азорубин (Е122)	9,99	27,55	356 500	1,11
Понсо 4R (Е124)	6,58	19,05	174 800	1,24
Красный очаровательный AC (Е129)	8,02	22,59	260 000	1,19
Синий патентованный V (E131)	13,51	36,32	506 600	1,29
Индигокармин (Е132)	5,08	15,28	128 500	1,02
Бриллиантовый голубой FCF (Е133)	11,07	30,22	383 500	1,16
* Коэффициент емкости () - коэффициент емкости колонки по веществу со временем удерживания tR, показывающий во сколько раз исправленное время удерживания вещества больше, чем время удерживания несорбируемого вещества. ** На хроматограмме желтого хинолинового (Е104) обычно наблюдаются два пика, соответствующие основному (дисульфопроизводному) и сопутствующему (моно-) соединениям.

А.2 Время удерживания соответствующего компонента определяют непосредственно из хроматограмм двух параллельных измерений одной пробы. В случае обнаружения отклонения времени удерживания более чем на  5 % от ранее установленного для любого из СПК проводят контроль стабильности градуировочной характеристики согласно 6.6. В случае невыполнения условия (5) заново устанавливают градуировочную характеристику во всем диапазоне измерений. В случае выполнения условия (7) допускается программное изменение времени удерживания консервантов.

А.3 Число теоретических N тарелок вычисляют по формуле

,

(A.1)

где 16 и 5,545 - множители, вытекающие из свойств нормального распределения;

- время удерживания пика, мин;

- ширина пика у основания, мин;

- ширина пика на его полувысоте, мин.

Колонка считается удовлетворительной, если найденное число теоретических тарелок составляет не менее 90 % от значения, полученного при градуировке хроматографа (см. 6.6).

А.4 Разрешение R_s вычисляют по формуле

,

(А.2)

где , - времена удерживания разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов, мин;

, - ширина пиков у основания, мин.

По результатам двух параллельных измерений вычисляют средние значения R_s для пары разделяемых полностью или критически (не полностью) компонентов (n, n + 1). Колонка считается удовлетворительной при значениях R_s n, n + 1  4,0.

А.5 Коэффициент A_s асимметрии вычисляют по формуле

,

(А.3)

где А - "левый" отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10 % от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин;

В - "правый" отрезок, образованный на горизонтальной линии, проведенной на высоте 10 % от основания пика и разделенной вертикалью, опущенной из вершины пика, мин.

Колонку считают удовлетворительной при значении коэффициента асимметрии, не превышающем 2,5.

Контроль стабильности хроматографической колонки в процессе эксплуатации проводят не реже одного раза в две недели.